样液5ml
（7.5%氯化钠 肉汤培养液）
挑选可疑菌落
革兰染色镜检
如镜检结果为：排列成葡 萄状，无芽孢与荚膜的菌 落则应进行以下实验
先用玻片法， 如样品和生理 盐水均出现了 凝集现象则再 做试管法
发酵甘露醇 产酸者为阳性
甘露醇发酵实验
血浆凝固酶试验 （玻片法、试管法）
结果报告
五、溶血性链球菌的检验程序
若为革兰阳 性，且呈链 状排列的球 菌 取典型菌落进 行革兰染色镜检
结果报告 杆菌肽敏感试验
六、结果记录与评价
表1、卫生纸微生物指标检 测结果 微生物 细菌总数 大肠菌群 金黄色葡 萄球菌 溶血性链 球菌 单位 CFU/g ￣ 结果 表2、卫生纸微生物指标标准规定
微生物
细菌总数 大肠菌群 金黄色葡 萄球菌 溶血性链 球菌
。
三、大肠菌群的检验程序
样液5ml 初发酵
35℃ ± 2℃ 18-24h
(乳糖胆盐发酵管）
选择产酸产气的 阳性管，平板分离 （ EMB)
35℃±2℃ 18-24h
其可疑菌落为：紫 红色或黑紫色，圆 形边缘整齐、表面 光滑湿润带有金属 光泽
凡乳糖胆盐发酵产 酸、产气，乳糖发 酵管产气，典型大 肠菌落特点的革兰 阴性无芽孢杆菌可 报告阳性
5ml样液+50ml 营养肉汤
35℃±2℃ 24h
接种血平板
35℃±2℃ 24h
典型菌落为灰 白色，半透明 或不透明，针 尖状突起，表 面光滑，边缘 整齐，周围有 无色透明溶血 环
观察菌落特征
镜检为革兰阳性链 状排列球菌，血平 板上有溶血环，链 激酶及杆菌肽敏感 试验阳性者，则可 报告检出
链激酶实验
一、提出我们要讨论的问题
两千年前由蔡伦发明纸，改变了书写的历史。十九世纪，开始以木浆制 纸。人类很多伟大的发明都是在无意识中创造出来的，卫生纸的发明也是如 此。在将近一百年前的二十世纪初，美国史古脱纸业公司买下一大批纸，因 运送过程中的疏忽，造成纸面潮湿产生皱折而无法使用。面对一仓库的无用 的纸，大家都不知如何是好，该公司负责人亚瑟· 史古脱却产生了一个想法， 他想到在卷纸上打洞，变成容易撕下成一小张一小张的纸张。史古脱将这种 纸命名为“桑尼”卫生纸巾，卖给火车站、饭店、学校等放置于厕所中，因 为相当好用而大受欢迎，并慢慢普及到一般家庭中，同时为公司创下了许多 利润。 然而随着卫生纸的需求越来越多，人们对它的要求也不断提高。卫生 纸早已成为人们日常生活中不可缺少的部分。那么，卫生纸到底卫不卫生， 对我们的健康有什么影响呢？所以我们讨论的问题为：从微生物
单位
CFU/g ￣ ￣
规定
600 不应检出 不应检出
￣
￣
￣
不应检出
七、实验安排
根据检验内容与程序，我们的实验安排大 致如下：
第一天：配制所需要的培养基，准备所需的试剂与器材， 样品液的制备，菌落总数测定，大肠初发酵，金黄 色葡萄球菌的增菌，溶血性链球菌的增菌 第二天：对阳性的检测菌进行平板分离 第三天：对平板上的可疑菌进行革兰染色镜检，及进一步的 确证实验 第四天：观察最终结果，检验结果的EMB上可疑菌落
阳性菌落染 色特性为： 革兰阴性杆 菌，散在排 列，有一部 分呈长丝状
结果观察与 报告
复发酵 （乳糖发酵管）
挑取可疑 菌落进行 革兰染色镜检
四、金黄色葡萄球菌的检验程序
增菌
35℃±2℃， 24h
平板分离
（血琼脂平板）
35℃±2℃ 24h
金黄色大而凸起， 圆形、表面光滑、 周围有溶血团
的角度探讨卫生纸的卫生问题？由于卫生纸的种类较多， 我们这次讨论的主要是厕用卫生纸 为了回答上述问题，我小组通过参照国标GB208102006设计实验如下
二、实验培养基、试剂与器材
1、培养基与试剂：
一、样品制备：生理盐水 二、细菌菌落总数的检测：营养琼脂、 三、大肠菌群的检测 1、乳糖胆盐发酵管 2、伊红美兰琼脂培养基 3、乳糖发酵管 4、革兰染液 四、金黄色葡萄球菌的检测 1、7.5％NaCl肉汤 2、血平板 3、甘露醇发酵试验：甘露醇发酵培养基 4、血浆凝固酶实验：兔血浆；生理盐水 五 、溶血性链球菌的检测 1、营养肉汤 2、血平板 3、链激酶实验：草酸钾血浆；灭菌生理盐水；氯化钙 4、杆菌肽敏感试验：0.04单位杆菌肽纸片，已知阳性菌株；血平板
四、实验室的检验
一、样品的采集与处理： 从一提卷子中，称量样品10g± 1g，减 碎后加入到200ml灭菌生理盐水中，充分混 匀，得到一个生理盐水样液。
二、菌落总数的检验
1、操作步骤： 将上述样液自然沉降后取上清液接种5个平皿，每个平皿 中加入1ml样液，然后用冷却至45℃左右熔化的营养琼脂15-20ml，倒 入平皿内，充分混匀。待琼脂凝固后翻转平皿，置35℃± 2℃ 培养 48h，然后计数菌落数（当平板上菌落数超过200时应稀释后再计数）。 2、结果报告：菌落呈片状生长的菌落不宜采用，计数符合要求平板上的 菌落按下式计算结果：X=A*K/5 式中：X——细菌菌落总数，单位为菌落形成单位每克(CFU/g) A——5块琼脂培养基平板上的细菌总数，单位为菌落形成 单位每克 (CFU/g) K——稀释度 当菌落数在100以内时，按实有数报告，大于100时，采用两位有效 数字。如果样品菌落总数超过标准规定的10%，按以上程序进行复检， 当两次实验结果的平均值都达到标准的规定，则判定被检样品合格，其 中有任何一次结果平均值超过标准规定则判定被检样品不合格
2、需要的器材
天平、烧杯、电炉、刻度吸管、接种 环、酒精灯、玻片、恒温培养箱、恒温水 浴锅、无菌平皿、剪刀、三角烧瓶、显微 镜、高压蒸汽灭菌锅等。
三、实验经费预算
根据国标GB20810-2006，我们的实验
经费大概为：570元（这是以一整瓶培养基的价 钱计算的，因为我们所用培养基一般都是实验室 常用的，而且我们所用的量很少，实验室以后还 可以接着用，其实际的费用应该比这个低。其可 行性应该比较高）