思考：
限制性内切酶剪切的是DNA中的什么 化学键？
限制性内切酶的特性？
DNA分子经限制性内切酶处理后形成
的结构叫什么名称？精品文档
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（1）限制性内切酶剪切的结构
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注意：
限制性内切酶破坏的是DNA骨架上 的磷酸与脱氧核糖形成的化学键（磷酸二 酯键），而不是碱基对之间的氢键。
（2）限制性内切酶的特性
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定向基因改造设想
设想一 能否让禾本科的植物也能够固定 空气中的氮？
设想 二
能否让细菌“吐出”蚕丝？
设想三
能否让微生物产生出人的胰岛素、 干扰素等珍贵的药物？
经过多年的努力，科学家于20世纪70
年代创立了可以定向改造生物的新技术—
—基因工程。
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金湖二中精生品文档 物教研组 5
请大家阅读P1内容，你认为基因 工程的理论基础和技术基础有哪些？
形成氢键
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2.不属于质粒被选为基因运载体
的理由是
（ D）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNA
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3. 有 关 基 因 工 程 的 叙 述 中 ， 错 误 的 是
（多选）
（ BD ）
A、基因工程技术能定向地改造生物 的遗传性状，培育生物新品种
B、重组DNA的形成在细胞内完成
③具有某些标记基因，便于筛选：
④对受体细胞无害、易分离。
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（2）常使用的运载体
质粒、噬菌体、动植物病毒等；
其中，质粒是最常用的运载体。
（3）质粒
本质：细胞染色体（或拟核DNA分子） 外能自主复制的小型环状DNA分子；
质粒的存在对宿主细胞无影响；
质粒的复制只能在宿主细胞内完成。
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3、将目的基因导入 受体细胞
4、目的基因的检测
与鉴定
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一、提取目的基因
目的基因主要是指编码蛋白质的 结构基因。
例如，与生物抗逆性相关的基因、
与优良品质相关的基因、与生物药物
和保健品相关的基因、与毒物降解相
关的基因，以及与工业所需用酶相关
的基因等，也可以是具有一些具有调
控作用的因子。
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判断：
质粒只存在于原核细胞中。
思考：
基因工程用到的工具酶有哪些？
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练习
1.以下说法正确的是
（C ）
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核 苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件之一是：具有 多个限制酶切点，以便与外源基因连接
D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间
基因工程基础：
（1）DNA的规则双螺旋结构是基因工 程的物质基础；
（2）不同生物共用一套密码子是理论基 础；
（3）转移载体和工具酶的发现为基因工
程的提供了技术基础精品文。档
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几点说明：
（1）最早的基因工程
——艾弗里的肺炎双球菌的转化 实验，证明了DNA可以从一种生物个 体转移到另一个生物个体；
（2）不同生物的DNA分子完成重组的 理论基础：不同生物的DNA分子的结 构和组成成分一样；
黏性末端；SmaⅠ能识别CCCGGG序列，
并在C和G之间切割精形品文成档 平末端。
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练习：
请大家看第4页下面的DNA片段， 如果此DNA片段被EcoRⅠ限制酶处 理，请你标出切点，并写出切割后的 末端。
要从一个DNA分子中获得一个 所需要的基因，要有几个切口？产生 几个末端？
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2、 DNA连接酶——“分子缝合针”
（3）最早的转基因动物——1980年的
转基因老鼠。
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1、基因工程的概念
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技 术。
概念一：在生物体外，通过对DNA分子进 行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进 行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行 无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产 生出人类所需要的基因产物。
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3、基因进入受体细胞的载体——
“分子运输车”
阅读课本相关内容，回答问题：
（1）运载体的化学本质是什么？
（2）运载体要具备哪些条件？
（3）常使用的运载体有哪些？
（4）最常用的运载体是什么？它 存在于哪些细胞中？
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（1）运载体具备的条件
①能够在宿主细胞中复制并保持稳 定；
②具有多个限制酶的切点，以便与 外源基因连接；
一种限制性内切酶只能识别一种特 定的脱氧核苷酸序列，并且能在特定的切 点是切割DNA分子。
（3）分布：
主要在微精品生文档物中。
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你认为微生物中的限制性内切 酶有什么作用？
（4）结果：
产生黏性末端（碱基互补配对）、平 末端。
（5）举例：
大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ)能识
别GAATTC序列，并在G和A之间切开形成
回忆：
（1）生物的主要遗传物质是什么？
（2）DNA的空间结构和基本组成单位是 什么？
（3）你还能画出四种脱氧核苷酸的结构 简式吗？
（4）一条链上的脱氧核苷酸相互连接是 通过什么来完成的？
（5）基因控制蛋白质的合成过程。
（6）中心法则的精图品文解档 。
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The camelecow
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（一）将需要的基因直接从供体生物 的细胞内提取出来。 供体生物细胞
看图思考：
DNA连接酶连接的是什么结构？
请你说出DNA连接酶和DNA聚合酶
的差异。
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根据酶的来源不同，可以将DNA 连接酶分为两类：
从大肠杆菌中分离得到：E.coliDNA 连接酶，只能将双链DNA片段互补的粘性 末端之间连接。
从T4噬菌体中分离到： T4连接酶， 既可以“缝合”双链DNA片段互补的粘性 末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平 末端，但连接平末端之间的效率比较低。
C、目的基因须由运载体导入受体细 胞
D、质粒都可作为精品运文档载体
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4、在基因工程中，切割运载体和
含有目的基因的DNA片段，需使用
A. 同种限制酶
（A ）
B. 两种限制酶CFra bibliotek 同种连接酶D. 两种连接酶
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你认为基因工 程可分为哪几步？
1、目的基因的获取
2、基因表达载体的 构建
概念二：按照人们的意愿，把一种生物的 个别基因复制出来，加以修饰，然后放到另一 种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。
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从基因工程概念上看，你认为基 因工程可分为几步？
基因工程是在分子水平对DNA分子进 行的“剪切”和“拼接”，这需要专门的 工具。
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二、基因操作的工具
1、限制性核酸内切酶——“分子手 术刀”