１ １００．４０ １００．２７ ９８．７２ ９９．６３
９６．０３ ９６．１２
２ ９９．５３ ９９．６３ ９８．７６ ９８．８５
９６．８８ ９５．５３
３ ９８．８５ ９９．０２ ９９．２０ ９９．７０ ９５．７１ ９５．８４
平均 ９９．５９ ９９．６４ ９８．８９ ９９．３９
９６．２１ ９５．８３
ＲＳＤ（％） ０．７８ ０．６３ ０．２７ ０．４７
孙丽娜 禹海英（ 河南华利药业有限责任公司， 河南平顶山， ４６７００１）
［摘要］ 目的 建立用凝胶法检测复方氨基酸注射液（ １８ＡＡ） 细菌内毒素方法。方法 用不同厂家的鲎试剂对不同批号 的复方氨基酸注射液分别进行干扰试验， 考察复方氨基酸注射液（ １８ＡＡ） 细菌内毒素检测法。结果 复方氨基酸注 射液对鲎试剂反应无干扰作用。结论 细菌内毒素检测法可用于复方氨基酸注射液（ １８ＡＡ） 的热原检测。 ［关键词］ 细菌内毒素； 鲎试剂； 干扰试验； 复方氨基酸注射液
根据样品细菌内毒素限值， 用灵敏度为 ０．２５ＥＵ／ｍ 鲎试 剂， 按《中国药典》２００５ 版细 菌 内 毒 素 干扰 试 验 规 定 方 法 进 行检测， 把供试品稀释 ２ 倍， 依法检查， 实验结果见表 １。
表 １ 供试品正式干扰试验结果
鲎试剂批号 样品批号
细菌内毒素浓度（ ＥＵ／ｍｌ）
阴性 反应终 结果
２ 方法与结果
２．１ 试验准备 试验所用器皿， 经 ２５０℃烘干 １ｈ 以上除去可能存在的
外源内毒素。 ２．２ 鲎试剂灵敏度的复核
将细菌内毒素国家标准品用细菌内毒素检查用水溶 解 ， 于 旋 涡 混 合 器 上 混 匀 １５ｍｉｎ， 分 别 稀 释 成 ２．０λ、１．０λ、 ０．５λ、０．２５λ４ 个浓度等级内毒素标准溶液， 每稀释一步均应 在漩涡混合器上混合 ３０ｓ， 按 ２００５ 版药典附录细菌内毒素 检查法中灵敏度复核法进行， 试验结果表明所用上述批号 鲎试剂， 其灵敏度标示值符合规定， 可用于试验。 ２．３ 样品细菌内毒素限值（Ｌ） 及最大有效稀释倍数（ＭＶＤ） 的确定
（ ３） 《中 国 药 典 》２００５ 年 版 对 测 氯 霉 素 含 量 所 用 方 法 比 ２０００ 年版方法专属性好， 在用于检测假冒伪劣药品时优于
１４８ 中国医药导报 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ
２００６ 年 ９ 月第 ３ 卷第 ２７ 期
· 药物研究 ·
复方氨基酸注射液细菌内毒素检测法
６ 两版药典特点
（ １） 两版药典对测氯霉素含量所用的方法都具有灵敏度 高 、精 密 度 好 、实 验 结 果 准 确 、实 验 方 法 科 学 等 优 点 。
（ ２） 《中 国 药 典 》２００５ 年 版 对 测 氯 霉 素 含 量 所 用 的 方 法— ——高效液相色谱法， 更科学、更准确， 专属性强。
氯霉素是氯霉素类抗生素， 对革兰阳性菌和阴性菌均 具有快速抑菌作用， 同时对立克次体， 支原体和衣原体具有 较强的抑制作用， 属广谱抗生素。氯霉素片含量测定在《中 国药典》２０００ 年版采用的是紫外分光光度法， 在 ２００５ 年版 改为高效液相色谱法， 本文对两版药典的含量测定方法及 检验结果进行了比较评议。
０．６３ ０．３１
上表表明 ： 两版药典方法检验结果一致。
３ 回收试验及结果比较
精取氯霉素对照品适量， 按处方比例加入氯霉素片的 辅料， 混匀， 精取混合物适量， 按 ２．１ 方法分别制成 ６０μｇ／ｍｌ、 ５０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ 溶液各 ２ 份， 测得含量， 计算回收率及 ＲＳＤ 值； 另精取混合物适量， 按 ２．２ 方法分别制成 ２５μｇ／ｍｌ、２０μｇ／ ｍｌ、１５μｇ／ｍｌ 溶液各 ２ 份， 测得含量， 计算回收率及 ＲＳＤ 值。
将复方氨基酸注射液（ １８ＡＡ） 稀释成一系列浓度， 按《中 国 药 典 》２００５ 年 版 二 部 附 录 上 规 定 的 方 法 ， 用 灵 敏 度 为 ０．２５ＥＵ／ｍｌ 的鲎试剂进行预试验。根据试验可知该样品对鲎试 剂不存在干扰。将细菌内毒素国家标准品用细菌内毒素检查 用水溶解 ， 于旋涡混合器上混匀 １５ｍｉｎ， 分别稀释成 ２．０λ、 １．０λ、０．５λ、０．２５λ４ 个浓度等级内毒素标准溶液， 每稀释一步均 应在旋涡混合器上混合 ３０ｓ， 按《中国药典》２００５ 版二部附录 细菌内毒素检查法中灵敏度复核法进行， 根据结果可知， 所用 上述批号鲎试剂， 其灵敏度标示值复核规定， 可用于试验。 ２．４．２ 正式干扰实验
４ 精密度试验
取 ３ 项下 ５０μｇ／ｍｌ 的溶液， 按 ２００５ 版药典方法，连续进
样 ６ 针， 按峰面积计算 ＲＳＤ 为 ０．１３％。取 ３ 项下 ２０μｇ／ｍｌ 的 溶 液 ， 按 ２０００ 版 药 典 方 法 连 续 测 ６ 次 ， 按 吸 光 值 计 算 ＲＳＤ 值为 ０．０９％。
５ 空白试验
· 药物研究 ·
２００６ 年 ９ 月第 ３ 卷第 ２７ 期
两版药典对氯霉素含量测定的比较
霍天凤 １ 赵素珍 １ 宋闫军 ２ （ １ 河南省焦作市食品药品检验所， 河南焦作， ４５４０００； ２ 河南省温县药品检验所， 河南温县， ４５４８００）
［摘要］ 目的 对《中国药典》２０００ 年版和 ２００５ 年版的氯霉素含量测定方法进行了比较， 并对测量结果进行了分析和 评价。方法 按两版药典规定的方法分别对氯霉素片的含量进行测定。结果 两版药典方法科学、准确、精密， 检测结 果一致。结论 ２００５ 年版《中国药典》方法科学、准确度高； ２０００ 年版《中国药典》方法简单、结果准确， 检验成本小， 检 验时间短。 ［关键词］ 氯霉素； 紫外分光光度法； 高效液相色谱法
注 射 剂 Ｋ＝５ＥＵ／ｋｇ／ｈ， 剂 量 （ Ｍ） 按 家 兔 体 重 每 １ｋｇ 注 射 １０ｍｌ， Ｌ＝５／１０＝０．５ ＥＵ／ｍｌ， ＭＶＤ＝ＬＣ／λ， λ为 标 示 灵 敏 度 ， Ｃ 为
溶液浓度， 当 Ｌ 以 ＥＵ／ｍｌ 计算时， Ｃ 为 １．０ｍｌ／ｍｌ， 根据 ＭＶＤ＝ ＬＣ／λ， 当 λ＝０．２５ＥＵ／ｍｌ， ＭＶＤ＝２ 倍。 ２．４ 干扰试验 ２．４．１ 干扰试验预试验
（ 收稿日期： ２００６－ ０７－ ２９）
２０００ 年版方法。 （ ４） 高效液相色谱法可以准确地检出有关物质的含量，
１ 仪器、试剂和药品
ＵＶ－ ２５５０ 紫外分光光度计 （ 日本岛津） ， ＳＳＩＰＣ２３００ 高
效 液 相 色谱 仪 。氯 霉 素 片 （ 规 格 ： ０．２５ｇ） ， 氯 霉 素 对 照 品 （ 编
号： １３０５５５－ ２００５０１， 含量： ９９．５％， 中国药品 生 物 制 品 检 定
所） ， 氯霉素二醇物对照品（ 编号： １３０４３６－ ２００３０２ 中国药品
用 ２００５ 版药典方法， 测得平均回收率为 １００．１２％， ＲＳＤ 值 为 ０．５７％ ； 用 ２０００ 版 药 典 方 法 ， 测 得 平 均 回 收 率 为 １００．４５％， ＲＳＤ 值为 ０．６４％ 。表明两种方法结果一致， 都有很 高的准确度和精密度。也说明氯霉素片辅料及其降解物不
干扰含量测定结果。
（ ３） 《中 国 药 典 》２０００ 版 对 测 氯 霉 素 含 量 所 用 方 法— —— 紫外分光光度法， 简单， 检验成本小， 检验时间短。
７ 讨论
（ １） 高效液相色谱法以科学、准确、精密、灵敏等特点而被 广泛应用， 越来越多的药品标准淘汰了其它方法， 而采用了高 效液相色谱法， 尤其对于多组份的复方药物， 经过色谱柱分离 后， 逐一测得含量， 收到了很好的效果， 克服了分光光度法及 其它方法无法解决的问题。自从高效液相色谱法被推广后， 提 高了很多药品的质量控制标准， 使得许多过去无法控制的药 品的质量现在得以控制。但由于高效液相色谱仪价格昂贵、检 验时间长， 并且必须有标准物质， 所用试剂较多、较贵， 因而又 阻碍了它的广泛使用。对于单一组份的药物， 无需分离这一过 程， 用紫外分光光度法和高效液相色谱法结果一致。
复 方 氨 基 酸 注 射 液 （ １８ＡＡ） ， 厂 家 ： 河 南 华 利 药 业 有 限 责任公司， 批号为 ０５０９１８１ （ ２５０ｍｌ：１２．５ｇ） 、０５１０２５１（ ２５０ｍｌ： １２．５ｇ） 、０５１０１８１（ ５００ｍｌ：２５ｇ） 。 １．３ 仪器
电 热 干 燥 箱 、旋 涡 混 合 器 、电 热 恒 温 水 浴 锅 、试 管 、刻 度 吸管。
０．５ ０．２５ ０．１２５ ０．０６ 对照 点浓度 Ｅｔ＝ｌｇ－１（Ｘｓ／４）
湛江安度斯 ０５０９１８１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － － － － － － － ０．２５ ０．２５
０５１０２５１ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ － － － － － － － － － － ０．２５ ０．２５
细菌内毒素法 较 家 兔 法 检 测 热 原 灵 敏、简 便 、快 速 ， 越 来越多的药品热原检测法逐渐被内毒素法所代替， 氨基酸 注射液系列产品检测标准大部分仍采用 ９８ 版部颁标准， 被 ２００５ 版药典收载及 ２００２ 版国家药品标准收载， 热原检测项 已修订为内毒素法， 而复方氨基酸 注 射 液 （ １８ＡＡ） 采用 的 是 ９８ 版部颁标准， 仍用家兔法检测热原。
生物制品检定所） 。
２ 样品含量测定及结果比较
取 ３ 批氯霉素片样品， 每批平行作 ３ 个样， 按两版药典
方法分别测得含量， 结果见表 １。
表 １ 样品测定结果比较
编号 １ 号样品含量（ ％） Ⅱ号样品含量（ ％） Ⅲ号样品含量（ ％）
２００５ 版 ２０００ 版 ２００５ 版 ２０００ 版 ２００５ 版 ２０００ 版
１ 材料
１．１ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ剂 细 菌 内 毒 素 国 家 标 准 品 ： 批 号 为 ２００５－ ６（ １００ＥＵ／支 ） ，
厂家为中国药品生物制品检定所， 鲎试剂： 厂家为湛江安度 斯生物公司， 批号为 ０５０７２５０（ 灵敏度为 ０．２５ＥＵ／ｍｌ） 。厂家为 福州新北生化工业公司， 批号为 ０５０８０９１２ （ 灵敏度为 ０．２５ ＥＵ／ｍｌ） 。细菌内毒素检查用水： 厂家为湛江安度斯生物公 司， 批号为 ０５０９０７０（ ２ｍｌ／支） 。 １．２ 样品