生殖毒性
1.3.5 雄性激素测定
1.1.1 睾丸与附睾的解剖结构
曲精小管 白膜 鞘膜脏层 鞘膜腔
输出小管 睾丸网 直精小管 附睾管 输精管
1.1.2 人生精小管扫描电镜像 ×180
血管 间质细胞 支持细胞 初级精母细胞
精原细胞 精子细胞 精子
1.1.3 精子的发生过程
精子的发生是精原细胞发育成为成熟精子的过程。 精子的发生过程始于胎儿期的原始生殖细胞。出生后分化成
曲细精管内的精原细胞。 精原细胞在促性腺激素作用下依次进一步分裂成熟为初级精
母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子。 精子由间质细胞包裹释放入直精细管，并移入附睾内进一步
成熟，再经输精管送入精囊贮存。 从精原细胞分化为成熟的精子，不同物种所需时间不同。人
64天、小鼠32天、家兔43天Wistar大鼠53.2天、牛54天。
1.3.4 体外试验
体外试验较在体试验具有简便的优点。 体外试验主要将哺乳动物的生殖细胞在体外条件下
进行培养，观察受试物是否引起生殖细胞改变。
也可通过分离培养睾丸支持细胞和间质细胞，测定 支持细胞的乳酸含量和乳酸脱氢酶活性的变化以及 测定间质细胞分泌的雄激素含量来判断受试物是否 对所培养细胞功能有影响。
支持细胞分泌的抑制素和间质细胞分泌的雄激素，又可反馈 抑制下丘脑GnRH和腺垂体FSH及LH的分泌。
正常情况下，各种激素的分泌量是相对恒定的，其中某一种 激素分泌量升高或下降，或某一种激素的相应受体改变，将 影响精子发生，并致第二性征改变及性功能障碍。
1.2 化学物的雄性生殖毒性
睾丸的功能主要是生成精子和合成雄激素。并受神 经内分泌调节。能影响睾丸、附睾、输精管、精囊 腺的结构和功能及内分泌调节功能的因素，均可致 雄性生殖系统损害。
精子形态观察
其通过伊红染色在显微镜下很容易观察。 精子头部和尾部的形态学改变可影响精子的
运动和穿透卵细胞的能力。 但该指标不够灵敏，应结合其它试验进行综
合分析。
精子状态分析
精子状态包括精液的pH值、液化时间，精子 运动能力，蛋白质、脂质和微量元素的含量 等。
通过该试验，可了解精子所处的微环境及精 子运动等情况是否与受试物有关。
1 雄性生殖毒性
1.1 雄性生殖细胞的发生过程 1.2 化学物的雄性生殖毒性 1.3 雄性生殖毒性的检测方法
1.1 雄性生殖细胞的发生过程
1.1.1睾丸与附睾的解剖结构 1.1.2 人生精小管扫描电镜像 ×180 1.1.3 精子的发生过程 1.1.4 睾丸功能的内分泌调节
1.1.4 睾丸功能的内分泌调节
下丘脑的神经内分泌细胞分泌促性腺释放激素（GnRH），可 促进腺垂体远侧部的促性腺激素细胞分泌卵刺激素（FSH） 和黄体生成素（LH）。
雄性，FSH促进支持细胞合成ABP；LH可刺激间质细胞合成和 分泌雄激素（睾丸酮）。ABP可与雄激素结合，从而保持生 精小管含有高浓度的雄激素，促进精子发生。
性变； 许多农药也可引起精子生成减少、睾丸萎缩、精子
畸形、性功能减退。
1.2.2 对内分泌功能的影响
铅可干扰下丘脑-垂体-睾丸轴的正常分泌功 能，使FSH、LH和睾酮分泌减少。
二硫化碳可使睾酮分泌减少，而FSH和LH分泌 增加。睾酮分泌减少与FSH和LH分泌增加呈现 相关性。
1.2.3 对性功能和生殖功能的影响
该试验需结合其它试验进行综合分析。
1.3.2 精子穿透试验
该试验是精子在体外的受精试验。它是检测精子在 体外能否成功穿透去透明带的金黄地鼠卵子而受精 的试验。其是常规试验所不能显示的，是常规分析 的辅助试验。
该试验的精子可以是大鼠、小鼠、家兔、猪、牛和 人的精子。
该试验可用于不育症诊断和外源化学物生殖毒性方 面的检测。
雄性性功能包括性欲、阴茎勃起、性交、情欲高潮 和射精几个方面，并受内分泌功能和精神心理因素 的调节。影响其任何环节均可影响性功能。
雄性生殖功能正常情况下除性功能外，还包括精子 能正常发生、成熟、输送和贮存。影响任何环节均 可影响正常生殖功能，影响精发生和成熟将直接影 响生殖功能。
上述重金属能影响性功能和生殖功能。
1.2.1 对睾丸生精细胞的影响 1.2.2 对内分泌功能的影响 1.2.3 对性功能和生殖功能的影响
1.2.1 对睾丸生精细胞的影响
棉酚可损伤精子、精细胞和精母细胞； 二硫化碳可引起睾丸萎缩、精子产生障碍、生精细
胞突变，睾丸萎缩、性欲下降； 铅、镉、汞、过量锰可引起睾丸、附睾、精囊退行
1.3.3 睾丸中标志酶活性测定
睾丸中标志酶活性的变化能可靠地较早反映受试物对睾丸功 能的损害。
在精母细胞和精细胞中首先出现的酶类，其含量和活性随精 子的形成和成熟而达到高峰。包括：透明质酸酶、山梨醇脱 氢酶、乳酸脱氢酶-x、5-核苷酸酶、α-磷酸甘油脱氢酶。
在睾丸足细胞、间质细胞或精原细胞内含量最高的酶类，其 活性和含量在性成熟前达到高峰，且随精母细胞、精细胞和 精子的形成和成熟而降低。包括：6-磷酸葡萄糖脱氢酶、苹 果酸脱氢酶、三磷酸甘油醛脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、γ谷氨酰转肽酶、尿苷二磷酸酶、鸟苷酸脱羧酶等。
精子收集的方法可用交配后冲洗阴道法，但多采用 处死动物后收集附睾尾部和输精管中的精子。
判断精子生成情况可用下列三指标评定： 精子计数： 精子形态观察： 精子状态分析：
精子计数
其是雄性生殖功能的一项重要指标。可提供 有关精子发育与成熟方面的粗略信息。
如果精子数目显著减少，则可以认为受试物 对雄性生殖具有损害作用，但不能确定毒性 作用发生在精子生成周期的哪个环节。
1.3 雄性生殖毒性的检测方法
1.3.1 精子生成分析 1.3.2 精子穿透试验 1.3.3 睾丸中标志酶活性测定 1.3.4 体外试验 1.3.5 雄性激素测定 1.3.6 显性致死试验 1.3.7 雄性生殖细胞遗传毒性检测 1.3.8 雄性生殖毒性病理检查
1.3.1 精子生成分析
