酶联免疫试剂
• 抗原抗体之间的特异反应与酶的高效催 化反应有机的结合。 固相 样品 放大
• 抗原 抗体 抗抗体-酶-底物-显色 • 抗体 抗原 抗体-酶-底物-显色
丙肝抗原 ELISA试剂
HRP酶 单克隆抗体
HRP 酶标记抗HCV抗体
酶标板
样品中HCV 抗原 抗 HCV 抗体
HIV-1 p24抗原检测试剂的原理
酶类化学试剂:丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒；碱性磷酸酶（ALP）测定试剂盒 凝血试剂:凝血酶原时间（PT）测定试剂盒；组织纤溶酶原激活物（t-PT）测定试剂盒
（第十三类）
普通生化类试剂（清洁环境）（包括一 般化学试剂、血气电解质类、血液分析 仪用试剂类等）
一般化学试剂：无机离子（铝、镉等）测定试剂盒；白蛋白测定试剂盒（BCG法）；总胆固醇测 定试剂盒（COD-CE-PAP法） 血气电解质:电解质分析仪随机试剂；生化分析仪用稀释液、冲洗液 血液分析仪用试剂: 血液分析仪用稀释液、溶血剂
（第四类）蛋白芯片（微阵列）类试剂 （第五类）单抗类试剂
（第六类）多抗类试剂 （第七类）诊断血清（菌液） （第八类）血球凝集类试剂
蛋白芯片（微阵列）：丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（蛋白芯片法）；多肿瘤标志 物检测试剂盒（蛋白芯片法）
血型定型类试剂：血型定型试剂盒（单克隆抗体） 免疫组化：ImmuChem免疫组化试剂盒（单抗） 免疫比浊：血清载脂蛋白A1免疫比浊试剂盒 乳胶凝集：D-dimer二聚体乳胶凝集试剂盒
时间分辨荧光法：游离甲状腺素（FT4）定量测定试剂盒 电化学发光法：甲型肝炎病毒抗体诊断试剂盒
微粒子酶免法：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒
（第二类）胶体金（硒、乳胶）类试剂
胶体金法：梅毒抗体-乙肝表面抗原诊断试剂盒 胶体硒法：HIV(1+2+0)试剂盒
（第三类）免疫印迹试剂
免疫印迹试剂盒: 风湿病自身抗体检测试剂盒（免疫印迹法）
2 八十年代初期，放射免疫测定(RIA)，
抗HBs单克隆抗体
3 八十年代中期，酶联免疫试剂，基因工程表达乙肝
病毒核心抗原和e抗原
4 九十年代， 聚合酶链反应(PCR)，丙肝，戊肝
病毒基因被克隆，各种基因工程抗
原被应用
5 近期，
发光免疫,生物芯片技术(基因芯片，
蛋白芯片)
（第一类）
酶联免疫（酶标板、磁珠、微粒 子）类试剂
（第九类）核酸扩增类试剂
荧光PCR：乙型肝炎病毒核酸定量测定试剂盒 PCR-ELISA：结核分支杆菌检测试剂盒（核酸扩增酶联免疫法） PCR-毛细管电泳：性染色体多倍体（分型与突变）检测试剂盒； PCR-电泳：α-地中海贫血基因诊断试剂盒（gap-PCR法） 转录介导扩增（TMA）：沙眼衣原体与结核分枝杆菌检测试剂盒
• 酶联免疫法：乙型肝炎病毒e抗体诊断试剂盒（酶 联免疫法）；
• 癌胚抗原定量测定试剂盒(免疫荧光法) • 化学发光法：人生长激素（GH）定量测定试剂盒
• 增强化学发光免疫分析法：巨细胞病毒抗体检测 试剂盒
• 时间分辨荧光法：游离甲状腺素（FT4）定量测 定试剂盒
• 电化学发光法：甲型肝炎病毒抗体诊断试剂盒 • 微粒子酶免法：丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒
血型定型类试剂：血型定型试剂盒（人血清/马血清） 免疫组化：癌胚抗原检测试剂盒（多抗） 免疫比浊：β-微球蛋白测定试剂盒（免疫比浊法） 乳胶凝集：沙门氏菌乳胶凝集试剂盒
诊断血清：侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清；志贺氏菌属四种混合多价血清 诊断菌液：伤寒沙门菌菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原诊断菌液
抗体致敏血球：破伤风抗体诊断试剂（血凝法）；白喉抗体诊断试剂（血凝法）
发光免疫试剂
• 1.抗原抗体反应的基本原理及方法模式与 酶联免疫试剂完全相同
• 2.检测光信号，其光信号可因酶催化而产 生也可用其他方法使其产生
酶促化学发光
• 以酶为催化剂，通过氧化反应，使 底物发光。 过氧化物酶（HRP )促发光，底 物——鲁米诺 碱性磷酸酶(AP )促发光，底物——
商业化产品中常见的化学发光系统（一）
（第十四类） 干化学类试剂
（第十五类） 药敏类试剂
（第十六类） 培养基类
干化学试剂（条、卡或盒）：干化学尿液分析试纸条；尿微量白蛋白（UALB）测试卡 药敏纸片（卡）：抗生素药敏纸片；随机专用药敏试剂（盒）（卡） 马丁干粉培养基；人胚胎干细胞无血清培养基
我国体外试剂的几个发展阶段
1 七十年代末， 乳胶凝集，血球凝(PHA,RPHA）
第十类） 基因芯片（微阵列）类试剂
（第十一类） 探针放大（原位杂交）类试剂
基因芯片（微阵列）：α-地中海贫血基因芯片诊断试剂盒 PCR-杂交：人乳头瘤病毒基因分型检测试剂盒（PCR-反向杂交法）
bDNA类：HIV-1 bDNA 检测试剂盒；mRNA检测试剂盒(生物素原位杂交法)
（第十二类）
普通生化类试剂（十万级要求）（包括 酶类化学试剂、凝血试剂类等试剂）
鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光系统（HRP）
O
NH NH
NH2 O
O
NH
-N2
NH
OOH
NH2 O
OH
*
O ONH2 O来自OHO +光
O
NH2 O
鲁米诺及其衍生物的增强剂（Enhancer）
R
OH
OH
R
B
OH
N OH
S R
商业化产品中常见的化学发光系统（二）
O O OCH3 AP
O O OCH3
OPO32-
几种主要的酶联免疫方法模式
1 双抗体夹心法应用 HBsAg, HBeAg, HBcAg, pres1, pres2 2 双抗原夹心法 应用 抗HBs，抗HIV 3竞争法 应用 抗HBc, 抗pres2 4 中和抑制法 应用 抗Hbe 5 捕获法 应用 抗HBc IgM 6 间接法应用 抗HCV, 抗HEV,
体外诊断试剂的分类和基本原理
中国药品生物制品检定所 TEL： E.Mail:
十六个体系考核类型分类表
分类
产品型别及产品举例
（第一类）酶联免疫（酶标板、磁珠、微粒子） 类试剂
酶联免疫法：乙型肝炎病毒e抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）；癌胚抗原定量测定试 剂盒(免疫荧光法) 化学发光法：人生长激素（GH）定量测定试剂盒 增强化学发光免疫分析法：巨细胞病毒抗体检测试剂盒
AMPPD及其衍生物 的化学发光系统
（AP）
O-
O
OCH3 O
*
+
O-
光子 (477nm)