安徽农业科学２０１０生１．２．３玉米ＰＧＰＲ的初步鉴定。
按照《微生物分类学》和《简明第８版伯杰细菌鉴定手册》的方法，根据个体形态观察、群体形态观察和生理生化特征３个指标对纯化的菌株进行分类鉴定。
１．２．４菌株对玉米种子萌发率的影响。
选择几株有广谱抗菌特性的菌株（ＫＭ２和ＫＭｌ９），在ＩＪＢ培养基上培养２４ｈ，用无菌水和灭菌棉签将细菌菌苔刮下，配制成浓度为１０９ｃｆｕ／ｍｌ的细菌悬浮液。
种子消毒后，在已制备好的细菌悬浮液中浸泡３０ｍｉｎ后，置于培养皿湿润的滤纸上，每皿２５颗种子，每个处理３个重复，对照用无菌水处理，然后将平皿置于２５℃暗培养，观察菌株对种子萌发率的影响。
１．２．５菌株对玉米植株高度的影响。
土壤经高温灭菌后与菌悬液按比例混合，分装到塑料钵中。
灭菌后种子处理方法同“１．２．４”，播种于经２次高压灭菌的菜同土塑料钵中，每钵８粒，５个重复，置于光照培养箱中培养，出苗后２１ｄ后取材，测定玉米植株的高度和干重。
２结果与分析２．１玉米根际细菌对病原真菌的拮抗作用经过初筛，发现一些根际细菌对１１种病原真菌中某些种具有拮抗作用（表２）。
试验还发现，菌株ＫＭｌ９对小麦根腐、玉米圆斑、棉花黄萎、玉米根腐和玉米苗枯病病菌具有拮抗作用，这几种病害均是大田植物病害。
菌株ＫＭ２对小麦全蚀、棉花枯萎、玉米根腐和玉米苗枯病病菌具有拮抗作用。
说明ＫＭｌ９、ＫＭ２２株菌具有较广的抑菌谱。
表２玉米根际细菌对病原真菌的拮抗作用Ｔａｂｌｅ２Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍｏｆｍａｉｚｅｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｆｌａａｇａｉｎｓｔｐａｔｈｏｇｅｎ测试菌病原真菌测试菌病原真菌ＴｅｓｔｂａｃｔｅｒｉａＰａｔｈｏｇｅｎＴｅｓｔｂａｃｔｅｒｉａＰａｔｈｏｇｅｎＫＭｌ９Ｃ、Ｅ、Ｄ、Ｊ、ＫＫＭｌ５ＬＫＭ２Ｆ、Ｂ、Ｊ、ＫＫＭｌ６ＡＫＭｌ８ＤＫＭ７Ｄ２．２铁载体的检测结果产生铁载体的菌株，能够在铬奥醇检测平板上的菌落周围形成橙红色晕圈。
该试验中共检测到５株产生铁载体的玉米根际细菌，其中ＫＭｌ５、ＫＭｌ８和ＫＭｌ９菌落周围形成的橙红色晕圈较大（图１），说明ＫＭｌ５、ＫＭｌ８和ＫＭｌ９这３个菌株产生的铁载体比较多。
注：Ａ．ＫＭｌ９；Ｉ．ＫＭｌ５；Ｊ．ＫＭｌ８。
图１产生铁载体菌株的检测Ｆｉｇ．１Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｓｔｒａｉｎｓｗｉｔｈｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ２．３ＰＧＰＲ的初步鉴定选取具有明显拮抗作用和产生较ＫＭｌ８的菌落特征描述：射光杆菌属（Ｌｕｃｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ多铁载体的菌株ＫＭ２、ＫＭｌ５、ＫＭｌ８和ＫＭｌ９进行分类鉴定，ｓｐ．），无芽孢，１．０９ｌｘｍ×３．２３；ｚｍ，极生单鞭毛。
可以液化明初步鉴定结果为：ＫＭ２、ＫＭｌ５和ＫＭｌ９均为假单胞菌属胶，甲基红阳性，Ｖ．Ｐ．反应阴性，过氧化氢酶阳性，发酵葡萄（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．），ＫＭｌ８为射光杆菌（１＿ａｃｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ叩．）。
ＫＭ２的菌落特征描述：假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．），Ｇ一，短杆，无芽孢，极生单鞭毛，菌落平均大小为０．５６斗ｍ×０．９６岬，琼脂平板上橙色，边缘整齐，表面光滑稍隆起，产生水溶性橙色色素。
能液化明胶，甲基红阳性，Ｖ．Ｐ．反应阴性，过氧化氢酶阳性，发酵葡萄糖，可利用Ｄ一半乳糖、甘露醇、阿拉伯糖、蔗糖作碳源，不能利用乳糖、淀粉，不能利用甘油产生二羟基丙酮，石蕊牛奶反应还原。
ＫＭｌ５的菌落特征描述：假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ叩．），Ｇ一，杆状．两端略尖，菌落平均大小为０．７７ｐ．ｍ×１．７０ｐ，ｍ，无鞭毛，琼脂平板上菌落低凸、表面光滑。
能液化明胶，甲基红阴性，Ｖ．Ｐ．反应阴性，过氧化氢酶阴性，可利用甘油产生二羟基丙酮，能发酵葡萄糖，利用阿拉伯糖、乳糖、甘露醇、蔗糖和半乳糖，石蕊牛奶反应产碱。
糖，能利用Ｄ－半乳糖、甘露醇、蔗糖，可水解淀粉，不能利用阿拉伯糖。
ＫＭｌ９的菌落特征描述：假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．），Ｇ一，无芽孢，０．８３岬×１．０７岬，极生单鞭毛，产生水溶性橙色色素。
可以液化明胶，甲基红阳性，Ｖ．Ｐ．反应阳性，过氧化氢酶阳性，能利用甘油产生二羟基丙酮，发酵葡萄糖，能利用Ｄ．半乳糖、甘露醇、蔗糖、阿拉伯糖和乳糖，能水解淀粉。
２．４菌株对玉米种子萌发率的影响菌悬液处理对玉米种子萌发的影响见图２和图３。
从图２、３可见，玉米种子经ＫＭｌ９的培养液和ＫＭ２的培养液处理后，种子的萌发率都有了很大的提高，且在低温条件下玉米种子的萌发率也显著提高。
从图４中还可以看出，ＫＭｌ９对种子萌发率的效果要好于ＫＭ２。
说明ＫＭｌ９和ＫＭ２能够有效地促进玉米种子的萌发。
玉米根际促生菌的筛选及其对玉米生长发育的影响作者：刘晓东， 王补全， 李伟作者单位：山西省太原市康美瑞科技发展有限公司研发部,山西,太原,030006刊名：安徽农业科学英文刊名：JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES年，卷(期)：2010，38(10)被引用次数：0次1.ROVIRA A D The rhizosphere and plant growth 19912.KERR A Biological control of crown gall:Seed inoculation 19723.许煜泉.高虹.童耕雷假单胞菌JKD-2分泌铁载体抑制稻瘟病菌 1999(3)4.BUYER J S.SIKORA L J A requirement for the iron-regulated outer membrane protein fega in the Bradyrhizobium japonicum soybean symbiosis 19905.王平.董飚.李阜棣小麦根圈细菌铁载体和检测 1994(6)6.王平.冯新梅.王国新小麦根圈细菌中PGPR的筛选及其初步鉴定 1999(4)7.刘国奇.蒋如璋韭菜根际荧光假单胞菌株的分离和初步研究 1999(3)8.AR-NESS E.CHEN Y.HADAR H Siderophores of Pseudomonas putida as an iron source for dicot and monocot plants 19911.期刊论文丁延芹.杜秉海.DING Yan-Qin.DU Bing-hai玉米根际细菌中PGPR的筛选及初步鉴定-土壤肥料2001(3)通过离体拮抗试验和检测菌株产生铁载体的情况从玉米根际细菌中筛选出8株拮抗菌和26株铁载体产生菌，其中DC01、DC09、DC22、PY313既具有真菌抗性又能产生铁载体，并对部分菌株进行了初步鉴定。
2.学位论文石荣以ACC为唯一氮源快速筛选抗西瓜枯萎病菌的PGPR及拮抗菌B8的初步研究1998利用1-氨基环丙烷基-1-羧酸(ACC)为唯一氮源的培养基从种植小麦/水稻、甜瓜、番茄三种不同作物的土壤中筛选得到80株具有ACC氮酶活性的促进植物生长的根际细菌(PGPR).用异步培养法在马铃薯葡萄糖培养基(PDA)及西瓜皮法蔗糖培养基(WSA)上测定它们对西瓜枯萎病菌的拮抗作用,分离纯化得到一株抗性最强的拮抗菌B8.经理化分析和分类学鉴定,B8对西瓜枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、炭疽病菌均有较强的抗性,尤其对甜瓜枯萎病菌的拮抗作用最为显著.B8合成铁载体的有关实验表明,它合成铁载体的能力较强,在缺铁培养基上,测定了B8合成铁载体的动态曲线.3.学位论文高虹假单孢菌JKD-2抗植物病原菌及促进植物生长的机制1998该实验室筛选到的假单孢菌JKD-2(Pseudomonas,JKD-2)对稻瘟菌及瓜类枯萎病菌具有极强抗性.该文对它的几种主要拮抗机理作了研究.从甘油培养基培养的JKD-2菌液中得到的乙酸乙酯粗提物对稻瘟菌有明显的抑菌效果,经薄层层析后理到两种有显著抑菌作用的抗生素,同时检测了它们的紫外光谱及红外光谱.在蔗糖-L-天冬酰胺(SA)培养基中,确定了JKD-2菌培养的最佳pH值,选取铬奥醇(CAS)分析液的适宜浓度,测定了JKD-2菌的生长曲线及铁载体分泌特征.通过铁载体抑菌实验结果显示,JKD-2菌分泌的铁载体能抑制稻温菌的繁殖.JKD-2菌除了可利用以上两种抑制稻温菌的方式促进植物生物生长外,研究人员研究了它的另一种直接促生机制.JKD-2菌能在ACC为唯一氮源的培养基上生长,表明它可以分泌ACC脱氨酶,降解ACC,生成无机氮,供自向生长并抑制乙烯的产生,从而促进植物生长.鉴于以上结果,研究人员认为JKD-2菌是一株极为有效的PGPR.4.外文期刊Tank N.Saraf M Enhancement of plant growth and decontamination of nickel-spiked soilusing PGPR.Phytoremediation i.e. the use of plants to adsorb, accumulate or detoxify contaminants is an emerging area of interest. A viable technology needs optimum biomass production in metal contaminated soil. Five strains of microbes were selected after testing their potential as plant growth promoters, on the basis of their phosphate solubilization ability, IAA, siderophore and HCN production and biocontrol potentials. They were examined for growth in synthetic medium supplemented with nickel and their MIC (2 mM) was determined. These isolates were also able to grow and produce siderophores in presence of heavy metals like Ni, Zn and Cd. A positive response of bacterial inoculants was observed in chickpea plants towards toxic effect of nickel present in soil at different concentration (0, 1 and 2 mM). Bacterial inoculants enhanced fresh and dry weight of plants even at 2 mM nickel concentration. Pot experiments indicated that presence of nickel at upto 1 mM enhanced plant growth compared to uninoculated nickel free plants. The accumulation of nickel/plant was just 50% in Pseudomonas inoculated plants as compared to uninoculated plants with 2 mM nickel concentration along with increased biomass. The results suggest the use of these PGPR to enhance plant growth in nickel-spiked land and remediate nickel from contaminated sites.5.学位论文姜勇比较16SrDNA序列的同源性鉴定PGPR菌株及其AFC物质的分离纯化研究2000对M18抑菌物质基础作了初步的分析研究.M18的代谢产物经有机提取和薄层层析,分离纯化出化学物质--R5,经高压液相色谱进一步获得含有纯度达99％以上的有机物.经生物测定表明,对黄瓜枯萎菌有强烈的抑制作用.根据该有机物的紫外、红外光谱特征以及利用液质联用仪测定,可初步将该有机物定为PCA(羟基吩嗪).利用Tn5转座突变M18,得到一株突变体,它能分泌一种物质,抵消PCA的作用.除了分泌PCA外,还通过分泌铁载体抑制植物病原菌,利用本文链接：/Periodical_ahnykx201010027.aspx授权使用：牟肖光(wflynxy)，授权号：d0536ab7-c3b2-4dd5-8b5b-9e65010ea369下载时间：2011年1月8日。