1光谱仪器
红外光谱又称分子振动转动光谱，属分子吸 收光谱。
红外光谱仪：仪器组成：光源，吸收池，单 色器，检测器以及记录显示装置。
T(%)
2色谱仪器
HPLC
色 谱 泵 及 控 制 器 数 据 处 理 及 控 制 色 谱 柱 检 测 器
W a t e r s 4 8 6
进 样 器
实验条件的选择：
薄层色谱
薄层色谱的实验成本低、流动
相的更换与选择方便、薄层扫描仪 的使用效率高。另外，它提供色彩 丰富、直观易认的可见光或荧光色 谱图像，尤其适合日常分析检验和 现场检验。选择薄层扫描法对中药 进行指纹图谱质量控制具有广阔的 应用前景。
实验仪器
CAMAG Linomat 5 半自动点样仪 CAMAG 数码摄像系统
平面色谱
Planar Chromatography
液相色谱
Liquid Chromatography (LC)
气相色谱
Gas Chromatography (GC)
薄层色谱
Thin Layer Chromatography (TLC)
毛细管电泳
Capillary Electrophoresis（CE）
1、色谱柱的选择： C18反相柱（ ODS柱）、C8反相柱、正相分配色 谱柱(氨基柱等）。
2、流动相的选择：反相键合相为例 （1）部分含水溶剂：以水为基础溶剂，再加入一定量可与水互溶
的有机极性调节剂（如甲醇、乙腈等）。甲醇-水、乙腈-水系统。 适用于中等极性、弱极性的药物。
（2）缓冲溶液：适用于可溶于水并具可解离特性的药物（弱酸、 弱碱、蛋白质、肽类等）。常用缓冲液：磷酸盐、醋酸盐等。
（3）非水溶剂：用于非极性物质。
洗脱方式：
（1）等度洗脱：在同一分析周期内流动相的组成保持恒定。适用于 组分数较少、性质差别不大的样品。
（2）梯度洗脱：在同一分析周期内程序控制流动相的组成（溶剂极 性、pH值等）
适用于组分数多、性质差别大的复杂混合物样品。
检测器：
（1）紫外检测器（UV）：应用最普遍。 灵敏度高、噪音低、线性范围宽等优点。只能用于检测有
●可在同板同时分析多达18个样品， 时效高
●所用的是正相展开剂，其组成变 化灵活，可适应多种成分的分离
●离线操作，即可直观比较图谱， 又可扫描得到轮廓图和处理数据
●占机时间短
●展距局限在 10cm~20cm ，‘柱效’ 相对较低，对复杂组分 不提高分离度则难以提 取指纹特征的药材受到 限制。
●开放系统，对环境温 度、相对湿度要求较高
紫外分光光度计：主要由光源、单色器、样 品池（吸收池）、检测器及放大器和记录显 示系统所组成。
钨灯丝适宜使用的范围是 360nm~1000nm；
氢灯或氘灯适宜使用的范围是 150nm~360nm。
通常在紫外分光光度计中，装置有紫外 光源-氘灯及可见光源-卤钨灯，只需切换光 源，就可以用来用来测定可见吸收光谱。因 此也称为紫外-可见分光光度计。
气相色谱仪允许的条件下可以气化而不分解的物质，都可以用 气相色谱法测定。主要用于挥发油的分析
fingerprints for some herbal medicinest Top part: (苍术挥发油); Lower part: (厚Chromatography (TLC)
紫外吸收的药物。 可变波长型 、二极管阵列检测器（色谱、紫外光谱图）
（2）蒸发光散射检测器（ELSD）：通用型检测器。 主要用于糖类、生物碱类、三萜类、甾提类等挥发性低
的物质。灵敏度稍低，流动相中不能含缓冲盐。 （3）示差折光检测器（RID）：通用型，利用组分与流动相折射率 之差进行检测。（用于糖类物质）
反相高效液相色谱 (RP-HPLC)
Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography
●适用范围广 ●分离性能好 ●分析速度快 ●流动相选择范围宽
对较为复杂的色谱实 验条件要求比较苛刻，由 此带来不同实验室之间重 现性的难度增大
●灵敏度高
●色谱柱可多次重复使用
2）分子结构更为精细的表征：通过IR谱的波数位置、波峰 数目及强度确定分子基团、分子结构；
光谱法
Abs
4000
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3000
2000
1000
¦Ã/cm -1
不同丹参粉末的红外图谱
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0
色谱法
柱色谱
Column Chromatography
●具有色彩参数，可获得色彩丰富 的色谱图像，直观性强；同时辅以 功能团显色剂还可提示成分的类别， 提高鉴别的专属性。
TLC
主要内容
第一节 常用指纹图谱研究的方法与技术 第二节 指纹图谱研究常用的仪器与设备
第二节 指纹图谱研究常用的仪器与设备
1光谱仪器 2色谱仪器 3联用色谱仪器
1光谱仪器
●流出组分可以收集
●采用多种检测器，可同时获 取保留值信息和化合物的光谱、 值谱信息
Gas Chromatography (GC)(气相色谱)
气相色谱法（gas chromatography 简称GC）是色谱法的一 种。色谱法中有两个相，一个相是流动相，另一个相是固定相。如 果用液体作流动相，就叫液相色谱，用气体作流动相，就叫气相色 谱。
近红外(泛频）
(0.75~2.5 m)
13158~4000/cm-1
中红外(振动区)
(2.5~25 m)
4000~400/cm-1
远红外(转动区)
(25-1000 m)
400~10/cm-1
分区及波长范围
倍频 分子振动转动 （常用区）
分子转动 跃迁类型
红外光谱特点
1）应用范围广：除单原子分子及单核分子外，几乎所有有 机物均有红外吸收；
第二章 中药指纹图谱研究方法学
主要内容
第一节 常用指纹图谱研究的方法与技术 第二节 指纹图谱研究常用的仪器与设备
第一节 常用指纹图谱研究的方法与技术
1光谱法（红外、紫外光谱） 信息量少、少用
2色谱法（兼具分离、检测功能） 信息量大、多用
紫外光谱指纹图谱
红外光区划分
红外光谱
(0.75~1000m)
CAMAG Scanner3 薄层色谱扫描仪
TLCS-3D-FP在监控药材质量方面的应用