二、凝血检验标本收集和预处理
1. 抽血注意事项
（1）抽血管首选优质塑料管；
（2）定量抽血完毕，立即将标本轻柔颠倒混匀5次， 避免剧烈摇动；
（3）许多专家建议抽血的第一管血不用作血栓试验，
尽量选第二管。
2. 抗凝剂问题
（1）世界卫生组织/美国临床和实验室标准协会 （WHO/CLSI）都推荐使用0.109mol/L枸橼酸钠（3.2% Na3C6H5O7﹒2H2O）作为凝血检验的抗凝剂；
3. 冷冻血浆解冻应放置37℃水浴条件，并轻轻摇动 4～5分钟，分析前轻柔地颠倒混匀。室温放置自 然解冻是不可取的，因室温放置会有冷沉淀形成， Ⅷ:C和vWF会减少，并有纤维蛋白原析出。冷冻过 的血浆不能再次冷冻。
内源凝血途径 XII 检查 APTT
XI
IX
VIII
X
Xa
V
II 凝血酶原
I (FIB)
Ca2+ , PL
X
Ca2+ , PL
V
II
37℃
I
Fibrin
Measure Clotting Time
Normal Range 9-14 sec
I
I
在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶和 钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使 纤维蛋白原与转变为纤维蛋白。观察血浆 凝固所需的时间即为凝血酶原时间。 CA1500仪器法判断终点采用光学法，即当 纤维蛋白原转变为纤维蛋白时，经光照后 产生的散射光发生变化，仪器判读终点。
凝血仪的检测原理 及应用
（一） 凝血常规（常规凝血功能筛选组合）
1. 凝血常规1（6项）： PT、APTT、TT、Fib-C、D-二聚体、AT-Ⅲ
适合于：干部病房、ICU病房、呼吸内科、消化内科 、血液内科、产科、肿瘤科、心内科、肾内科和术后出血 患者等，以及其它科室60岁以上高危人群。
2. 凝血常规2（4项）： PT、APTT、TT、Fib-C 适合于：一般手术患者。
Sampling
X
X
Trisodium
IX
Citrate IX
VIII
VIII
VII
VII
V
V
IV
without IV
III
without III
II
II
Extrinsic System 外在系统
III PL
IV
Tissue Factor Phospholipid
Calcium（Ca2+ ）
VII III
（二） DIC筛选试验组合： PT、APTT、TT、Fib-C、D-二聚体、FDP、
AT-Ⅲ
（三）血友病组合： PT、APTT、TT、Ⅷ:C、Ⅸ:C、Ⅷ抑制物检查
（四） 凝血因子全套检查： PT、APTT、TT、Fib-C、Ⅱ:C、Ⅶ:C、Ⅷ：C、 Ⅸ:C、Ⅹ:C、Ⅺ：C
（五）药物性出血的监测
1. 口服华法林治疗监测组合：PT
1. 延长
（1）见于先天性外源凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ）缺乏症和低/无FIB血症，凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ轻微减少，PT的延长幅度也不大，Ⅱ因子减少病人，其 PT经常在正常范围； （2）口服抗凝药，如华法令等； （3）维生素K缺乏症； （4）DIC及原发性纤溶症； （5）肝脏疾病； （6）血中有抗凝物质（狼疮抗凝物、抗磷脂抗体、肝素、 FDP以及抗Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、 Ⅹ 的抗体）。
Fib-C 1.67g/L，TT 22.9s，与临床不符。
（2）
0.2
0.00185×（100-56.2）
计算后应抽血2.5ml，结果（正确）为：
PT 13.9s，PT-INR 1.30，APTT36.2s，
Fib-C 1.70g/L，TT 19.7s，与临床相符。
（二） 离心问题
1. 血栓试验使用的血浆为PPP； 2. 一般要求2000～2500g/min（3000r/min ），离 心时间为10min左右，转速N（转/分）与“g”的转 换关系：g=11.18×10-7×半径（mm）×N（转/分）；
（2）一般选用1份抗凝剂+9份静脉血—当Hct 25%～55%时；
（3）若Hct ＜25%或＞55%时，抗凝剂的用量=0.00185× 全血量×[1- Hct] ×100；
病例：真性红细胞增多症患者，Hct 0.562
（1）1：9比例抗凝结果（错误）：
PT 19.2s，PT-INR 1.78，APTT 62.1s，
组织因子途径
VII +
TF 组织因子
TFPI
外源凝血途径 检查 PT
IIa（凝血酶）
共同途径途径 检查 TT
Ia (凝块)
三、凝血酶原时间测定（PT）
（一）检 测 原 理
in Blood血液中 in Plasma血浆中
PT Reagent
without
XIII
XIII
XII
XII
XI
Blood XI
外源性的Ⅶ因子在组织因子的结合下既可激活Ⅹ因 子，又可激活内源性的第Ⅸ因子，从而打破了内源 与外源的界限。
Ⅻ因子缺乏时并不引起出血，这说明第Ⅺ因子并不 一定只被Ⅻ因子激活，现已证明Ⅺ本身具有自身激 活作用。
凝血酶（Ⅱ因子）也可激活Ⅺ因子，原来认为只有 Ⅻ因子才能激活Ⅺ因子。
TF被激活并与Ⅶ因子结合后会被一种组织因子途 径抑制物（TFPI）所抑制；后者已成为一种新型 抗凝剂。
2. 普通肝素治疗监测组合： TT、APTT、AT-Ⅲ
3. 溶栓药物治疗（SK、UK、t-PA）监测组合： PT、APTT、D-二聚体、TT、Fib-C、FDP
止血血栓
出血
正常
血栓形成
第一阶段：凝血酶原激活物形成 第二阶段：凝血酶形成 第三阶段：纤维蛋白形成
内源性凝血途径：Ⅷ，Ⅸ，Ⅺ，Ⅻ 外源性凝血途径：Ⅲ，Ⅶ 共同凝血途径：Ⅰ，Ⅱ，Ⅴ，Ⅹ，ⅩⅢ
3. 离心温度室温即可，但不可超过25℃，4℃离心 条件应该提倡。
（三） 即时试验标本的要求
1. 标本尽可能在4小时内完成；
2. 筛查试验和一些因子测定时，应避免将标本长时 间室温放置；
3. Ⅶ因子测定时，标本要避免冷藏。
1. 建议将标本保存在-70℃以下条件，凝血因子至 少可稳定6个月；
2. 短期保存可在-35℃条件，-20℃条件通常是不理 想的；
2 .缩短 （1）血栓前状态和血栓性疾病； （2）见于先天性V因子增多； （3）长期口服避孕药； （4）使用重组的Ⅶ因子治疗时； （5）标本放置在2～8℃， Ⅶ因子冷激活发生，使PT缩短。
3.口服抗凝剂的检测 PT和PT-INR是监测口服抗凝剂的常用指标，中国人PT-