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第三章生化习题答案

一 选择题
1—5:④ ③ ② ③ ②
二填空题
1.一个带负电荷的蛋白质可牢固地结合到阴离子交换剂上,因此需要一种比上样缓冲液的pH 更 低 或/和离子强度更 大 的缓冲液,才能将此蛋白质洗脱下来。

2.聚丙烯酰胺凝胶电泳是鉴定蛋白质______均一性(或纯度)_____ ____最简便而有效的方法。

三 解释名词 (略)
四 问答计算
1~3, 答案略
4, 凝胶过滤层析中,蛋白质分子通过凝胶柱的速度不直接取决于分子的质量,而是它的斯托克半径; 层析柱中的填料凝胶是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下来速度慢,而大分子物质却被排阻在外部,下来的速度快,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。

聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白分子迁移速率与分子的电荷及形状无关,而直接取决于分子质量。

凝胶电泳中,大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径分离胶时,受阻滞的程度不同而表现出不同的迁移率,这就是分子筛效应。

蛋白质进入同一孔径的分离胶后,分子小且为球状的蛋白质分子所受阻力小,移动快,走在前面;反之,则阻力大,移动慢,走在后面,从而通过凝胶的分子筛作用将各种蛋白质分成各自的区带
5, 13000
6, 过氧化氢酶,血清清蛋白,胰凝乳蛋白酶原,肌红蛋白,细胞色素c
7, a 正极,b 负极,正极,c 负极,不动,正极
8,计算二肽Lys −Asp 的等电点。

(5分)
(+3''COOH NH p 8.01,p 2.81K K αα--==,+3''n COOH NH p 10.58,p 4.45K K βε--==)
答:pI=
+3''COOH NH p p 2K K βα--+=8.01 4.45 6.232
+= 9,为何各种不同蛋白质的等电点并不一样?为什么把蛋白质溶液调到等电点会产生沉淀?(5分)
答:组成蛋白质的氨基酸序列不同,空间结构不同。

破坏了蛋白质胶体溶液的稳定因素:表面具有同性电荷。

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