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2 NDV强化实验
HCV接种PK细胞等不产生CPE，但是在 接种HCV以后，再加入NDV，则可出现 CPE，可用于猪瘟的诊断。
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3 免疫组织化学染色
可用于检测组织内的猪瘟病毒抗原， 具体的操作方法与FA相似，但必须注意 非特异反应。具体是切片、以HRP标记 的抗HCV的单抗进行反应，加入DAB显色。
具体实验先合成cDNA，后进行扩增。从BVDV样品 中，能扩出326bp的片段，从猪瘟病料中，能扩增出 252bp的片段。 但以上方法不能区分HCV的野毒和疫苗毒。
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四、防疫技术
常用疫苗 1、猪瘟兔化弱毒细胞苗 2、猪瘟兔化弱毒苗（ST细胞） 3、猪瘟兔化弱毒组织苗（兔脾淋组织） 新型疫苗 1、亚单位疫苗 2、重组活载体疫苗
我国自上世纪59年代起，通过疫苗接种，猪瘟 得到有效控制
பைடு நூலகம்
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近年来，猪瘟的流行特点发生了很大变化，流行形式已 从平凡发生的大流行转为周期性、波浪式的地方流行， 通常3-4年一个周期
“带毒母猪”和慢性及持续性感染的仔猪是该病持续不 断的主要原因
在猪瘟高风险地区，该病每年以低发病率延续下来，在 流行间隔期内，有5%以上种猪场出现血清学 “阳性猪”
2 采样 扁桃体是采样的首选部位，其是HCV最早繁殖的部 位。其次是脾、肾和回肠远端。病程长的病例，回 肠样品常为阳性。
3 病毒分离 采用常规的方法。
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（二）诊断
1 直接免疫荧光 是检测HCV抗原最常用的方法。通常检测扁桃体、
淋巴结等部位的抗原。FA简单、快速、可靠。很多国 家将其作为消灭猪瘟规划的法定诊断方法。
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低毒力毒株引起猪瘟的特点
其引起的无症状、非典型、慢性感染的比例高，该类 毒株感染的种猪向外排毒不易察觉
低毒力毒株有缓慢传遍猪群的倾向，病的经过很少引 起警觉
由低毒力毒株引起的“带毒母猪综合征”在猪瘟传播 中起重要作用，其生产外观似健康的仔猪或弱仔，该 类猪先天感染或免疫耐受，数周或月内向外排毒
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中等毒力毒株感染母猪后，初期常不引起注意， 但病毒可通过子宫传给胎儿，通常导致母猪流 产、死胎、木乃伊胎或产弱胎，出生不久后死 亡。
母猪生产时，大量排毒，在感染其他猪。
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三、常用诊断方法
（一）病原分离
1 易感细胞 猪肾细胞、牛睾丸细胞是培养猪瘟病毒常用的细胞。
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PPT教学课件
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第三讲 猪瘟诊断及防疫技术
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一、猪瘟概述
是一种急性、热性和高度接触传染的病毒性传染病。 其特征为发病急、高热稽留、小血管壁变性、全身泛 发性小点出血、脾梗死。
OIE将起其列为A类传染病，是国际的重要检疫对象。
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二、流行动态及特点
1833年首次发现于美国Ohio，1903年证实其 病原为病毒，目前遍布全球
7鉴别PCR 军需大学研制出诊断猪瘟的PCR方法，并可以同时鉴 别牛病毒性腹泻病毒。
引物：P1 是BVDV的特异引物 AGGCCTAGGGAACAAATC P2是HCV的特异引物 AAACGGAGGGACTAGCCGT
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P3是 BVDV和HCV的共同引物 TGCCATGTACAGCAGAGA
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6 PCR
根据CSFV 保护性抗原E2蛋白基因，设计引物，可 扩增380bp的特异片段，用于该病毒的PCR检测
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CSFV分离株E2蛋白 基因PCR检测结果
M：DL2000；1：PRRSV阳性对照；2：检测样品；3：阴性对照
CSFV：2308200/b12p/10
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4 猪瘟病毒与牛黏膜病病毒的鉴别诊断
猪瘟病毒与牛黏膜病病毒有共同的 保护性抗原，可用抗HCV的特异单抗进 行区分。
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5 区分HCV疫苗毒和野毒感染
中国兽药监察所已经研制出区分疫苗毒和野毒的单 抗，应用ELISA可以区分以上感染。
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