多酚类化合物介绍:
多酚类化合物是指同一苯环上有若干个酚性羟基的一类化合物。
植物多酚具有抗菌、消炎、抗血栓、抗病毒、抗癌和扩张血管等生理作用。
一些多酚类化合物及其衍生物具有较好的清除自由基的作用,因此是一类良好的天然抗氧化剂。
自然界植物中发现的具有抗氧化性的酚酸化合物主要有原儿茶酸、沒食子酸(山茱萸)、3-羟基苯乙酸、如绿原酸(金银花)、阿魏酸(当归)、咖啡酸、迷迭香酸(紫苏)、介子酸(蜂胶)等。
绿茶中所含多酚类的儿茶酚具有抗氧化作用,其活性优于相同浓度的а-生育酚,是人工合成抗氧化剂BHT(二丁基羟基甲苯)、BHA(丁基羟基茴香醚)的4~6倍,若与维生素C和维生素E配合还具有增效作用。
白藜芦醇以及沒食子酸和从葡萄籽及松树皮提取物中发现的原花青素等多酚物质也被证实有很强的抗氧化性,且已被证实强于某些抗氧化维生素。
清热解毒类中草药中总多酚的测定——Folin-Ciocalteu比色法[
1.1 实验材料
栀子、龙胆草和板蓝根购于贵阳三桥药材批发市场;射干产自贵州施秉牛大场GAP药材基地;黄柏、头花蓼分别产自习水和雷山。
1.2 试剂
亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,乙醇(均为分析纯)
1.3仪器
101-1A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);A200S型电子天平
(Made in Germany);循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);KDM型控温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司);UV2300分光光度计(上海天美科学仪器有限公司);FZ102型微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。
1.4实验原理
Folin-Ciocalteu比色法原理是基于Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化,自身被还原生成蓝色的化合物,颜色的深浅跟多酚的含量呈正相关。
2.分析步骤
⑴多酚的提取
购买药材,清洗后晾干,将其放入微型植物粉碎机中粉碎,即得到相应的中药材粉末。
精密称取粉碎均匀的试样2.5g于250ml圆底烧瓶中,加溶剂(95%乙醇/水)100ml加热回流1小时,抽滤,滤渣再加溶剂(95%乙醇/水)100ml 再回流1小时,抽滤。
将两次滤液合并之后定容至250ml即得待测试样。
⑵供试液的制备
取稀释液0.5mL至25mL棕色容量瓶中,加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml;再加5%碳酸钠溶液15.0ml,摇匀,加水稀释至刻度,静置2h,在波长760nm处测定吸光度。
⑶标准曲线的绘制
配制没食子酸标准品0.05mg/ml,分别准确吸取没食子溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml置于一系列25ml棕色容量瓶中,加Folin-Ciocalteu试剂1.0ml;再加5%碳酸钠溶液15.0ml,摇匀,加水稀释至刻度,静置2h,在波长760nm处测定标准系列及试样的吸光度并绘制标准曲线,试样吸光度与标准曲线比较定量或代
入标准回归方程求出含量。
Fig2-3.Stangard cure of Gallic acid 12
3c v v x M v ⨯⨯=⨯
式中:
X ——样品中总多酚含量mg/g ;
C ——校准曲线总多酚的浓度mg/ml ; V 1——-稀释体积ml ;
V 2——样品溶液的体积ml ; V 3——取样体积ml ;
M ——样品质量g 。
计算结果保留三位有效数字。