原料
储存 环境
•检查冷柜或冷库的温度 记录，酶类试剂2-8度， 标准物质-20度
设备
•生化仪定期测试记录 •分光光度计定期计量 •电导率仪定期计量 •分装设备清洗记录
免疫类产品基本原理
Elisa反应的基本原理（酶标仪、发光仪等） 将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里，洗涤一 次；②加待测抗原，如两者是特异的，则发生结合，然后把多余 抗体洗除；③加入与待测抗原呈特异反映的酶联抗体（二抗）， 使形成“夹心”；④加入该酶的底物，若看到有色的酶解产物产 生，说明在孔壁上存在相应的抗原。
免疫类产品质量技术风险点分析
• 辣根过氧化物酶 • 过氧化物酶（HRP）广泛分布于植物中，辣根中含量最高，从
辣根中提取的称辣根过氧化物酶（HRP），酶蛋白和辅基的最 大吸收光谱分别为275nm和403nm。 • 酶的纯度以RZ表示：RZ=OD403/OD275 • 纯酶的RZ多在3.0以上，最高为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗 酶，非酶蛋白约占 75%，不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用 于标记。（检查进货检验记录或生产过程记录）
标• 校准准液液个个数数浓的度校原准因曲线线性好并通过坐标零点的
，可采用一个校准液；线性好但不通过坐标零点， 应使用两个校准液；对于校准曲线呈非线性者，必 须使用两个以上校准液。每一个校准液都要有一个 合适的浓度。
• 吸光度
600
0
300
0
5 8 10
浓
生化类产品基本原理
氧化反应: 还原反应：
生化类产品质量风险点分析
生• 生化化分类析仪产反应品的一基般称本为生方化试法剂
• 两点法、终点法、速率法、比浊法 • 两点法： • 测定酶反应开始后某一时间内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量以求取酶反应
初速度的方法。 • 终点法： • 通过测定酶反应开始到反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量，以求出酶活
力的方法，亦称平衡法。 • 速率法： • 是指连续测定(每15秒~1分钟监测一次)酶反应过程中某一反应产物或 • 底物的浓度随时间的变化来求出酶反应的初速度的方法，即连续监测法。 • 透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目。
• I类：微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）、样本处理用产 品，如溶血剂、稀释液、染色液等。
体外诊断产品的类别 • 体外诊断专业分类:生化、免疫、分子生物学、微生物、体液等,临床使用超过千种。
• 生化：生物化学反应或免疫反应(生化仪的项目），酶类、糖类、脂类、蛋白、无机元素 、肝功能、肾功等指标。
• 两点法： 苦味酸法测定肌酐采用此法
• 速率法对于酶活性测定，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱 氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代谢物 酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等，也可用连 续监测法。（7个酶加葡萄糖、尿素）
• 免疫比浊法载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗“O”、类风湿因子，以及血清中 的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。(蛋白）
生化类产品说明书 生化分析仪说明书除法规相关规定外，还至少包括： • 适用机型 • 反应温度（37度） • 主波长、次波长 • 孵育时间（终点法或两点法） • 延迟时间（连续监测法）、连续监测时间在延迟时间之后即开始，一般 为60～120s不少于4个吸光度检测点（3个吸光度变化值）； • 加样量 • 校准液个数（非线性必须两个以上）等。
生化类产品质量技术风险点分析
生产记录中应包括试剂用水的电导率、PH值及微生物检验记录 酶反应
水（PH）
离子
微生物电导率培养基 Nhomakorabea温度
温控 系统
生化类产品质量风险点分析
•每批是否留样 •留样检验记录，根据标 准 •留样检验真实性，检查 企业文件规定检验周期
留样
•辅酶空白吸光度 •水同上 •纯物质（底物）检查纯 度标识，或色谱的检测 结果记录
生化类产品基本方法 • 终点法常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法 ）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法 ）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化 酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定 法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）。
• 标志物（AFP、PSA、HPV）
• 基因（唐氏、小儿耳聋、遗传缺陷 基因BRCA1）。
• 蛋白、微量元素（白蛋白、Ca);
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体• 体外外诊诊断根断据风产险分品3类的： 类别
• III类：致病性病原体抗原、抗体以及核酸、人类基因检测、肿瘤标志 物、血型、组织配型、变态反应（过敏原）等；
• II类：除III、I类，如：蛋白质、糖类、酯类、酶类、维生素、无机离 子、激素等；
原材料(辅酶I )（进货检验记录或生产记录中，应包括辅酶空白吸 光度的检验记录，且不同的类别符合下述特点） 还原性辅酶I主要用于下降反应，当还原性辅酶I质量出现问题时， 试剂的空白吸光度降低，导致试剂测量结果的不确定度变大，测 量的灵敏度也随之降低，测量线性范围变小。 氧化性辅酶I主要用于上升反应，当氧化性辅酶I质量出现问题时， 试剂的空白吸光度升高，导致试剂测量结果的不确定度变大，测 量的灵敏度也随之降低，测量线性范围变小。
• 免疫：抗原与抗体相结合的特异性反应，传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型 鉴定等。
• 分子诊断：分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化，主要用于 肝炎、性病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等检测。
体外诊断产品的类别 • 微生物：通过培养鉴别细菌等微生物的方法。
• 血液学：通过电阻抗、激光和高能电磁波等技术检测血液中血细胞的数量和分 类的方法。
体外诊断产品的生产监管
北京市医疗器械检验所
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主要内容
• 体外诊断产品的种类 • 体外诊断产品生产的基本原理
• 生化类产品 • 免疫类产品 • 分子类和血液类
• 溯源性问题
体外诊断作用“医生的眼睛” • 预测和诊断功能，如：
• 疗效和健康监测，如：
• 血细胞
• 代谢物（血糖）
• 抗体（肝炎、艾滋、IGE）