质检中心实验室方法
烟用接装纸、内衬纸和卷烟条与盒包装纸 甲醛的测定
高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了烟用接装纸、内衬纸和卷烟条与盒包装纸中甲醛的测定方法——高效液相色
谱法。

本标准适用于烟用接装纸、内衬纸和卷烟条与盒包装纸中甲醛的测定。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

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于本文件。

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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
YC/T 207-2006 卷烟条与盒包装纸中挥发性有机化合物的测定顶空－气相色谱法
YC 171-2008 烟用接装纸
YC 264-2008 烟用内衬纸
3 原理
用水萃取样品中的甲醛，通过2，4-二硝基苯肼衍生形成甲醛腙后，用高效液相色谱仪/二
极管阵列检测器测定，外标法定量。

4 试剂
除特别要求外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T 6682中一级水的要求。

4.1 试剂
4.1.1 蒸馏水，符合GB/T 6682中一级水的要求
4.1.2 乙腈（色谱纯）。

4.1.3 磷酸（色谱纯，质量分数85%）。

4.1.4 2,4-二硝基苯肼（纯度大于97%）。

4.1.5 衍生化试剂：称取0.1 g 2,4-二硝基苯肼（4.1.4）于1000 mL棕色容量瓶中，加入6mL
磷酸（4.1.3），乙腈（4.1.2）定容。

4.1.6 甲醛-2，4-二硝基苯腙（标准品，浓度1.0mg/mL，分子式：C7H6N4O4，分子量：210.15）。

4.2 标准溶液
用移液枪准确移取0.5mL 1.0mg/mL甲醛-2，4-二硝基苯腙（4.1.5）至50mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第1级标准溶液。

取第1级标准溶液20.00 mL加入50 mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第2级标准溶液。

取第2级标准溶液20.00 mL加入50 mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第3级标准溶液。

取第3级标准溶液20.00 mL加入50 mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第4级标准溶液。

取第4级标准溶液20.00 mL加入50 mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第5级标准溶液。

取第5级标准溶液20.00 mL加入50 mL容量瓶中，乙腈（4.1.1）定容，定为第6级标准溶液。

各级标准溶液浓度示例如表1，各级标准溶液浓度须根据标准品标定浓度具体计算。

标准溶液贮存于0℃～4℃条件下，有效期3个月。

取用时放置于常温下，达到常温后方可使用。

表1 工作标准溶液系列
系列标准溶液 1 2 3 4 5 6
甲醛腙浓度
10.000 4.000 1.600 0.640 0.256 0.102
（mg/L）
相当于甲醛浓度
1.4290.5710.2290.09140.0366 0.0146
（mg/L）
5 材料与仪器
5.1 恒温水浴振荡仪。

5.2 微膜过滤器：配0.45μm有机微膜。

5.3 液相色谱分析柱型号：C18反相色谱柱；规格：5μm，4.6mm×250 mm。

5.4 高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。

5.5 活塞式移液枪：1000 μL。

5.6 容量瓶：1000mL，100mL，50 mL。

5.7 移液管：50 mL。

5.8 具塞三角瓶：100mL。

6 分析步骤
6.1 抽样
烟用接装纸按照YC 171-2008的规定进行抽样；烟用内衬纸按照YC 264-2008的规定进行抽样；卷烟条与盒包装纸按照YC/T 207-2006的规定进行抽样。

6.2 样品前处理
将试样进行裁剪，烟用接装纸的裁剪方式按照YC 171-2008的规定进行，即准确裁切长200 mm，宽40 mm的接装纸样品（应包含一个单边）；烟用内衬纸的裁剪方式按照YC 264-2008的规定进行，即裁剪面积约170cm2（即相当于普通卷烟软盒包装所采用的内衬纸面积）；卷烟条与盒包装纸的裁剪方式按照YC/T 207-2006的规定进行，即对硬盒包装纸，参照印刷压痕准确裁取主包装面，面积为22.0 cm × 5.5 cm，对软盒包装纸，取一张软盒包装纸，面积为15.5 cm ×10.0 cm，对条包装纸，在包装正面中央区域，准确裁取22.0 cm × 5.5 cm的样品。

将裁剪后的样品置于天平上称量，精确至0.1 mg，并以剪刀将样品剪成1-2cm2的碎片，将碎片置于100 mL具塞三角瓶（5.8）中，准确加入50 mL水（4.1.1），80℃恒温水浴120 min，过滤并用适当体积的水洗脱至100ml容量瓶中并准确定容，准确移取1.0mL定容液于10mL容量瓶中，加入4mL衍生化试剂（4.1.5）后用乙腈（4.1.2）定容，放置15min进行衍生化。

然后用0.45μm 有机滤膜过滤，滤液待高效液相色谱分析。

若所测试样甲醛浓度超出标准曲线范围，则作适当倍数的稀释后进行测定。

6.2空白实验
不加样品，重复6.1步骤，进行HPLC分析。

6.3 仪器条件
6.3.1 柱温：30℃。

6.3.2 流速：1.5mL/min。

6.3.3 进样量：10µL。

6.3.4检测波长：352.0nm。

6.3.5 流动相：A为水（4.1.1），B为乙腈（4.1.2）。

6.3.6 梯度洗脱程序：见表2。

表2 梯度洗脱程序
时间 (min) 流动相A （%） 流动相B （%） 0.00 70 30 5.00 10 90 15.00 10 90 16.00 70 30 20.00
70
30
6.4 标准工作曲线绘制
分别取标准工作溶液（4.2）进HPLC分析，根据标准工作溶液的浓度及甲醛响应峰面积，作甲醛的标准工作曲线，工作曲线线性相关系数R 2
>0.99。

每次试验均应制作标准曲线，每20次样品测定后应加入一个中等浓度的标准溶液，如果测得的值与原值相差超过3%，则应重新进行标准曲线的制作。

6.5 样品测定
按照仪器测试条件测定样品（6.2），由保留时间定性，外标法定量；每个样品重复测定两次。

同时每批样品做一组空白。

7 结果的计算与表述
样品中甲醛的含量按式（1）进行计算：
(1)
式中：
X—试样中甲醛的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； C—由标准曲线得出的甲醛浓度，单位为毫克每升（mg/L）； C 0—由标准曲线得出的空白值，单位为毫克每升（mg/L）； V—萃取液体积，单位为毫升（mL）； m—试料质量，单位为克（g）；
∫—试样溶液的稀释因子。

以两次平行测定的平均值为最终测定结果，精确至 0.1mg/kg。

两次平行测量结果的相对平均偏差应小于10%。

8 回收率、检出限和定量限
本方法的回收率、检出限和定量限结果见表3。

表3 方法的回收率、检出限和定量限结果
(
)m
V C C X ∫
××−=
化合物 回收率
（%）
检出限
（mg/kg）
定量限
（mg/kg）
甲醛 91.0～105.7 1.4 4.6 9 试验报告
试验报告应说明：
——识别被测试样需要的所有信息；
——参照本标准所使用的试验方法；
——测定结果，包括各单次测定结果及其平均值；
——与本标准规定的分析步骤的差异；
——在试验中观察到的异常现象；
——试验日期；
——测定人员。

附录A （资料性附录） 色谱图示例
A.1 标准溶液色谱图
标准溶液色谱图如图A.1
所示。

图A.1 标准溶液色谱图
A.2 试样衍生液色谱图
试样衍生液色谱图如图A.2所示。

图A.2 衍生液色谱图
HCHO-DNPH。