药物急性半数致死量（LD50）的测定
附子急性毒性测定
国贸 2011092180 卢强
一、目的：
1.了解药物半数致死量(LD50)测定的原理和意义.
2.通过实验掌握附子 LD50 的测定方法,步骤和计算过程.
二、原理：
急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药后所产生的毒性反应和死亡情况。药物毒
性的大小，常用动物的致死量来表示，致死量的测定常以半数致死量为标准(LD50)。LD50
是指在一群动物中能使半数动物死亡的剂量。由于实验动物的抽样误差，药物的致死量对数
值大多在50％质反应的上下呈正态分布。在这样的质反应中药物剂量和质反应间呈S型曲
线，S型曲线的两端处较平，而在50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药物剂量稍有
变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地反映药物毒
性的大小。
LD50的测定方法很多，例如目测机率单位法、加权机率单位法（Bliss氏法）、寇氏法
（Karber氏法）及序贯法等，其中Bliss氏法最常用。此法要求剂量按等比级数排列，每组
小鼠数相等（不应太少，一般10-20只），剂量范围接近或等于0%-100%死亡率之间，一般
分5-8个剂量组。
三、 实验材料
动物：KM小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供。
器材：电子秤，小鼠鼠笼，1 ml注射器，5号针头，计时器，Bliss统计法软件包。
药品与试剂：附子浸提液(1g/mL)、蒸馏水。
四、 方法与步骤
（一）预备实验
1、探索剂量范围： 先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（Dm及Dn）。按
1：0.7的比例向上、向下调整剂量，由此找出上下限剂量。
2、确定组数，计算各组剂量：
一般分5-8个剂量组。配制等比稀释药液系列，使每只小鼠给药容量相等，一般为
0.3mL/10g。按比例配出不同剂量的附子提取液。
（二）正式实验
1、分组编号：称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别用苦味酸做好标记。再按
确定组数（4组）分层随机分组，使各组平均体重及性别分布尽可能一致，每组4只小鼠（2
只雄性，2只雌性）。
2、给药：按照预实验确定的等比稀释的比例，配制不同浓度的附子浸提液给予各组小
鼠灌胃。
3、观察记录：观察给药后40min内小鼠毒性反应，记录每组小鼠死亡数量，计算每组
死亡率（死亡率以小数表示）。
4. 计算LD50及95%可信限。
五、实验结果：

组别 动物数 剂量g/10g(d) Logd(X) 死亡数 死亡率（P）
1 4 2.88 Log2.88 4
1

2 4 1.93 4
1

3 4 1.37 2
0.5

4 4 0.94 1 0.25
Totle 16 7.12 Log2.88 11 ΣP=2.75
公式: LD50=log-1 [Xm-i(ΣP-0.5)]
Xm：最大剂量组剂量的对数值
i：相邻两组剂量（d）对数值之差，或相邻两组高剂量与低剂量之比的对数。
P：各组动物的死亡率，用小数表示。
ΣP：为各组动物死亡率的总和。
n：每组动物数。
六、 讨论

注意：
1、1.验的过程中药物的配比存在误差，可能影响实验效果。
2、本实验为定量药物效价测定，要求较高的准确性，在实验过程中要求实验者做到准确无
误。
3. 动物种类、体重范围、给药途径、实验观察时间等因素对LD50的测定结果都有影响，
在报告结果时都应加以注明。