s nest (that is N2Acetylneuraminic acid) is free from the combination of the state of glycoprotein sialic acid.
High performance liquid chromatography. Is used to detect the sialic acid as evaluation index. The optimized
9
3
3
2
9. 80
T1
30. 37
30. 54
32. 24 T = 92. 36
T2
31. 66
31. 12
30. 14 C = 947. 82
T3
30. 33
30. 70
29. 98
X- 1
10. 12
X- 2
10. 55
X- 3
10. 11
10. 18 10. 37 10. 23
10. 75 10. 05 9. 99
Study on the determination of sialic acid in edible bird′s nest
J IANG Shui2hong , ZHA Sheng2hua , XIE Li2fen , ZHANG Hong ( Beijing Tongrentang Health Pharmaceutical Co. , Ltd. , Beijing 100085 , China)
[ 2 ] Farokhzad O C ,Cheng J J ,Teply B A , et al . Targeted nanoparticle2ap2 tamer bioconjugates for cancer chemothe2 rapy in vivo[J ] . Proc Natl A2 cad Sci USA ,2006 ,103 (16) :631526320.
显著
图 1 唾液酸对照品溶液 (A) 和样品溶液 (B) 的色谱图 Fig. 1 Chromatograms of the N2Acetylneuraminic acid reference solution(A) and the sample solution(B)
中国生化药物杂志 Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2009 年第 30 卷第 5 期
395. [4 ] 戴永援 ,陈宝安 ,王雪梅 ,等. 磁性纳米四氧化三铁及纳米金协
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中国生化药物杂志 Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2009 年第 30 卷第 5 期
315
间的分子机制 ,有待于进一步研究 。 参考文献 :
[1 ] Alexiou C H ,Schmid R ,Jurgons R ,et al . Targeted tumor therapy with “magnetic drug targeting”:Therapeutic efficacy of ferrofluid bound mi2 toxantrone[J ] . Lecture Notes in Physics ,2002 ,594 :2332251.
滤膜过滤 ,即得 。按三因素三水平 L9 (34) 设计正交
试验 ,方案见表 1 ,结果见表 2～3 ,以唾液酸的含量
为指标进行比较 。唾液酸的含量测定 ,以峰面积按
外标法计算 。唾液酸对照品浓度为 0. 20 mg/ mL 。
色谱图见图 1 。
表 1 因素水平表
Tab. gnetic nanoparticle of Fe3O4 loaded with adriamycin and tetrandrine in K562/ AO2 leukemic cells [J ] . Int J Nanomed ,2008 ,3 (2) :2772 286. [ 6 ] Ferry K V , Hamilton T C ,Johnson S W. Increased nucleotide excision repair in cisplatin2resistant orarian cancer cells : Role of ERCCI2XPF [J ] . Biochem Pharmacol ,2000 ,60 (9) :130521313.
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2. 6 重复性试验
粗粉 ,精密称取 100. 0 mg ,置 100 mL 具塞锥形瓶中 ,
准确加入不同浓度 (0. 5 % ,1. 0 % ,2. 0 %) 、不同体积
(40 ,60 ,80 mL) 的磷酸 ,称定重量 ,于沸水中水解不
同时间 (20 ,30 ,40 min) ,时时摇动避免样品粉末挂
壁 ,冷却至室温 ,补足减失重量 ,摇匀后 ,用 0. 45μm
表 3 方差分析表
Tab. 3 Variance analytical table
因素 SS
df
MS
F
F0. 05 (2 ,2) 显著性
1 0. 38 2 0. 19 19. 72 19. 00 显著
2 0. 06 2 0. 03 3. 09 3 1. 06 2 0. 53 54. 78 误差 0. 02 2 0. 01
317
液的用量为非显著性因素 。因此确定的最佳条件 于 0 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 h 测 定 其 峰 面 积 , 其 RSD 为
为 :用 1. 0 %磷酸 60. 0 mL ,水解 20 min (底物用量约 0. 72 % ,表明该样品液至少在 10 h 内稳定 。
为 100. 0 mg) 。
Key words : edible bird′s nest ; sialic acid ( N2Acetylneuraminic acid) ; high performance liquid chro2
matography
燕窝是雨燕科动物金丝燕及同属多种金丝燕用
收稿日期 : 2009206202 作者 简 介 : 姜 水 红 ( 19682) , 江 西 人 , 执 业 药 师 , Tel : 0102 82894433 ,E2mail :jiangsh863 @163. com。
Abstract :Purpose To study on the determination method of the content of sialic acid in edible bird′s nest ( EBN) ,so as to establish EBN quality standard. Methods After acid hydrolysis ,the sialic acid in the bird′
2. 1 色谱条件
色谱柱为
Waters
Atlanti
s
T○R
3
(4.
6
mm
×150
mm
,5
μm) ,流动相为乙腈2水 (40∶60) ,流速为 1. 0 mL/ min ,
检测波长为 192 nm ,进样体积为 20μL 。
2. 2 样品溶液的处理
将燕窝干燥至含水量在 15 %以下 ,研磨粉碎成
因 素 水平 A (磷酸溶液浓度) B (磷酸溶液用量) C(水解时间)
/%
/ mL
/ min
1
0. 5
40
20
2
1. 0
60
30
3
2. 0
80
40
用直观分析法和方差分析法优选最佳水解条件
为 A2B2C1 ,影响显著性为 C > A > B ,即水解时间为 最显著的影响因素 ,其次为磷酸溶液的浓度 ,磷酸溶
clusion This method has the advantages of good stability ,high sensitivity , simple operation ,etc. It can accu2 rately detect the content of the sialic acid in bird′s nest .
1 仪器和试药 Waters 2695 高效液相色谱仪 (包括 Waters 2489
紫外检测器) ; 唾液酸 ( N2Acetylneuraminic acid) 对照 品 (纯度 ≥99 %) 购自 Sigma 公司 ;磷酸为分析纯 ,水 为超纯水 。
燕窝为马来西亚白燕盏 ,本公司提供 。
2 方法与结果
燕窝中唾液酸含量测定方法的研究
姜水红 , 查圣华 , 谢丽芬 , 张 宏
(北京同仁堂健康药业股份有限公司 , 北京 100085)
摘 要 :目的 研究燕窝中唾液酸含量的测定方法 ,制定燕窝的质量标准 。方法 燕窝经过磷酸水解 ,其中的唾 液酸 (即 N2乙酰神经氨酸) 从唾液酸糖蛋白的结合状态游离出来 ,用高效液相色谱法进行检测 ,以唾液酸含量作为 评价指标 ,通过三因素三水平正交试验 ,优选出最佳的水解条件 。结果 唾液酸浓度在 20～330μg/ mL 范围内线性 良好 ,平均回收率为 98. 4 % , RSD 为 1. 02 % ( n = 6) 。结论 此法具有稳定性及重复性好 、灵敏度高 、操作简单等特 点 ,能够准确地检测出燕窝中的唾液酸含量 。 关键词 : 燕窝 ; 唾液酸 ( N2乙酰神经氨酸) ; 高效液相色谱法 中图分类号 :R927. 2 文献标识码 :A 文章编号 :100521678 (2009) 0520315203