静置染色2-3分钟，去除花药壁残留杂质， 置于低倍镜下观察，粗略判断分裂期，若小穗 过老，则往下取材，反之则往上取。
材料合适后盖上盖玻片，使染液刚好布满 载玻片与盖玻片之间成一薄层 。
用滤纸吸去盖片周围染料，然后在酒精灯下 轻微加热，以利于进一步着色和染色体分散，在 盖玻片上覆以吸水纸用拇指适当加压。
• 变异类型丰富染色体较大，且数目较少
（2n＝20），便于观察。
• 玉米易于种植管理，取材方便。
花粉发育过程
小孢子显微结构图
减数分裂示意图
• 实验药品与器具
药品：醋酸洋红， 45％醋酸， 卡诺固定液（95％乙醇冰醋酸=3:1）。
器具：显微镜，载玻片，盖玻片，酒精灯， 镊子，刀片等。
• 实验方法与步骤
玉米花粉母细胞染色体的减数分裂
• 减数分裂 前期Ⅱ和中期Ⅱ
花粉母细胞呈现二分体形式，不同之处为核内 染色体状态不一样，散乱/赤道板处整齐排列．
• 减数分裂 后期Ⅱ
分别在两个细胞内的着丝粒分裂，染色单体移向 两极．
• 减数分裂 末期Ⅱ
细胞呈现为四分体形式，又称为四分孢子，每一 个细胞进一步发育为成熟花粉粒．
实验安排
1、玉米花粉母细胞涂抹制片 2、根尖压片 3、大麦染色体的核型分析 4、植物DNA的提取 5 水稻胚的组织培养
玉米花粉母细胞 涂抹制片
2010.5.26
玉米花粉母细胞涂抹制片
• 实验目的
学习和熟悉植物花粉母细胞染色体制片 技术。 通过实验加深对植物的减数分裂和植物 雄配子体形成过程的认识。
若细胞质染色过深，可以在盖片一侧添加45 ％醋酸，另一侧用滤纸吸，减轻细胞质染色。
有两点需要注意： 1、盖上盖玻片后，不要再次移动盖玻片。 2、加热时要均匀受热，勿使染料沸腾。
4. 镜检
查找花粉母细胞减数分裂各时期的分列相。
制片流程图
选取合适小花 取出花药，滴加染液，挤出花粉 压片后，酒精灯微微烘烤 显微镜下镜检
减数分裂 前期Ⅰ
细
偶
ห้องสมุดไป่ตู้
线
线
期
期
粗
终
线
变
期
期
减减 数数 分分 裂裂 中后 期期 ⅠⅠ
减数分裂后期Ⅰ
实验报告
画出显微镜下观察到的染色体状 态，每人需画出两个不同时期花粉 母细胞的染色体。
思考题：简要说明减数分裂和有丝 分裂的区别和联系。
减数分裂 前期Ⅰ［细线期和终变期—较大的核仁存在］
减数分裂 前期Ⅱ 减数分裂 末期Ⅰ
• 实验材料
玉米杂合易位株正在进行减数 分裂中的雄穗。
玉米花粉细胞减数分裂通常发生 在雄穗尖端露出前5-10天，但是 雄穗仍旧被叶鞘包卷，当包裹处 开始变得松软膨大时，花粉母细 胞开始减数分裂；除此之外还要 考虑雄穗的大小，小花长短和颜 色等因素。
• 玉米是一年生的禾本科植物，雌雄花序同 株而异花，交配手续简便，一个果穗可产 生大量的种子后代。
1.取材
玉米的最后一片叶露出叶尖时， 形成大喇叭口的一周前，当喇 叭口下部开始出现松软膨大的 时候，用刀片破叶取出其中花 序检查，材料要求尚未变黄， 变黄则其中均为花粉粒，在小 而绿的花药中才有处于减数分 裂的细胞。
2. 固定
将收集材料去除太老和太嫩的小穗，置于卡 诺固定液中24小时保存，固定液的量不少于材 料体积的5倍。
如果需要长期保存，可以将材料保存至70 ％乙醇中存放在冰箱里。
固定作用：迅速杀死材料的活细胞，使染色体 核蛋白变形，以保持染色体固有的形态。
3. 制片
用镊子从固定瓶中取出1-2条雄穗分支，选 取合适部位的小花，夹出1-2个花药，置于载玻 片上，滴加少量醋酸洋红，截断花药，并反复 地轻轻挤压花药，使花粉母细胞溢出。