Dalian Institute ofChemical Physics, Chinese Academy ofSciences, Dalian 116023, China)
Abstract: In order to enrich the source of alginate degrading enzyme producing strains, using alginate as the sole carbon source, the strain with high degradation ability to alginate was screened from the rotten kelp collected from Changxing Island. The strain was identified by morphological obser­ vation, physiological and biochemical tests and molecular biological technique. The results indicated that strain E-10 with high degradation ability to alginate was screened and identified as Rheinheimera aquimaris, and the activity of alginate degrading enzyme was 14 U/L. Key words： alginate; alginate degrading strain; screening; identification
摘 要:为了丰富褐藻胶降解酶产生菌的来源，该研究以褐藻胶为唯一碳源，从长兴岛采集的腐烂海带中筛选能够高效降解褐藻胶
的菌株，并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明，经筛选和鉴定获得一株能够era aquimaris)，编号为E-10,其产褐藻胶降解酶活力为14 U/L。
收稿日期：2018-11-16
修回日期：2019-03-05
基金项目:国家重点研发计戈0项目(2017YFD0201300)；陕西省重点研发计戈0项目:硒化魔芋低聚糖制备及功能食品开发(2017TSCXL-NY-02-05)；
褐藻胶又称藻酸、海藻酸钠，是一些大型藻类的细胞
壁、细胞间质的主要组成成分叫褐藻胶是由B-D-甘露糖醛 酸(0-D-mannuronate, M)和 a-厶古洛糖醛酸(a-L-guluronate， G)两种糖醛酸残基通过0-1,4糖苷键相互连接而成的线性
高分子聚合物叫依据海藻种类、藻体组织部位、生态环境、 季节等的不同,M和G单体的含量比也具有差异孔褐藻胶 及其衍生物的独特理化性质，如良好的凝胶特性和稳定性， 使其被广泛应用于食品、纺织和化工等领域叫但天然褐藻 胶为分子质量较大的高聚物，黏度高、难溶于水，限制了 褐藻胶的应用。褐藻胶寡糖作为一种功能性寡糖,不仅解 决了天然褐藻胶应用上的瓶颈问题，且其具有多种生物活 性，如免疫调节［5］、抗凝血、抗高血脂冋、抗氧化凹等，也可 以作为一种植物生长调节剂，应用于绿色农业110-111«因此， 如何有效获得褐藻胶的降解产物一褐藻寡糖势在必行。
研究报告
中国酿造
2019年第38卷第5期
总第327期
• 63 •
褐藻胶降解酶产生菌的筛选与鉴定
李 倩I，2，李悝悝2,张付云1*
(1.大连海洋大学食品科学与工程学院，辽宁大连116023;2.中国科学院大连化学物理研究所天然产物与糖工程研究组 大连市糖类农用制剂工程研究中心，辽宁 大连116023)
关键词:褐藻胶;褐藻胶降解菌;筛选;鉴定
中图分类号：Q939
文章编号：0254-5071 (2019)05-0063-04
doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2019.05.013
引文格式:李倩，李悝悝,张付云•褐藻胶降解酶产生菌的筛选与鉴定［J］•中国酿造,2019,38(5)： 63-66.
Screening and identification of alginate degrading enzyme producing strain
LI Qian1, 2, LI Kuikui2, ZHANG Fuyun1*
(l.Department ofFood Scien^ce and Engineering, Dalian Ocean University, Dalian 116023, China; 2.Dalian Engineering Research Center ofCarbohydrate Agricultural Preparation, Natural Products and Glyco-Biotechnology,
目前，褐藻寡糖的制备方法有物理法、化学法和生物 酶法［21。常用的物理法包括辐射、热降解和超声等,但此类
方法不能将天然褐藻胶完全降解，且操作繁琐、价格昂贵, 容易造成资源浪费。化学法以酸降解为主,但该方法降解 条件难以控制，耗时长且产物品质较差，可能对褐藻胶还 原端造成一定程度的破坏，进而影响降解产物即褐藻寡糖 的生物活性；同时大量化学试剂的应用造成环境污染。生
物酶法是采用褐藻胶降解酶通过0-消去反应断裂褐藻胶
的糖苷键，产生的新还原端为饱和糖醛酸盐，该方法专一 性强、效率高、反应温和、可控性强，不会对环境造成污染， 且能为后续研究寡糖活性化学结构提供信息，并满足不同 用途的需要11，故酶法降解逐步成为优先选择的方法。
褐藻胶降解酶来源广泛［131,在细菌、真菌中均有发现［141， 其中，海洋来源的微生物是褐藻胶裂解酶的重要来源。由 于现阶段报道的微生物来源的褐藻胶降解酶中，仍然存在 酶活力低、作用位点单一等缺点［15-161«因此，筛选能够降解褐 藻胶的新菌株，对发掘具有潜在产业化价值的褐藻胶裂解 酶具有重要意义。本研究从大连长兴岛采集的腐烂海带样