植物 乳杆 菌生长条件 的优化
关秀艳 ， 胡梦坤 ， 阳 曹
（ ． 阳产 品 质 量 监 督 检 验 院 ， 阳ห้องสมุดไป่ตู้１０ ２ ；． １ 沈 沈 １ ０３ ２东陵 区动 物 防 疫 监 督 所 ， 阳 １０ ０ ） 沈 １０ ０
摘要 ： 为优化植物乳杆菌在静置条件下 的生长条件 ， 以植 物乳杆菌 为试材 ， 采用摇瓶发酵试 验方法 ， 探讨 发酵温度 、 培养基初始 ｐ Ｈ
值、 接种量对菌体生长的影响。试验结果表明 ， 植物乳杆 菌的最佳培养条件为 ： 起始 ｐ Ｈ值 ７ ￣ ．， ． ７ 培养 温度 ３ ￣ ０℃， 种量 ５ ０ ３ ７４ 接 ％
（／ ， Ｖ Ｖ）发酵 时间 ２ ； 此条 件下 培养 ， ４ｈ 在 活菌数可达 ９４ ｘ ０ ｃ ／ 。培养条件优化后 ， ． １ ｆ ｍＬ ７ ｕ 得到 的活菌数是基础培养基 的 １ ． ８倍。 关键 词 ： 乳酸菌 ； 培养基优化 ； 生长条件 ； Ｓ培养基 ； ＭＲ 培养 温度 ； 接种量
７ ２。 ．
７ 、．， ． ８ 然后按 ２ Ｖ Ｖ 的接种量取 ０ Ｌ ５ ０ ％（ ／ ） ． ｍ 菌液接 ６ 种 培养 ． 液量 为 ３ Ｌ ３ ０ｍＬ三 角 瓶 ． ３ 装 ０ｍ ／ ０ 于 ７℃振 荡培养 ２ ，摇床转速为 １０ｒ ／ ｉ，平板菌落计 ４ｈ ４ ｖｍ ｎ ｅ
数 。每个 处 理做 ３个 重 复 ， 平 均值 。 取
３ ）接 种 量 对 植 物 乳 杆 菌 生 长 的影 响 ：按 １ 、 ％
２Ｍ Ｓ ） Ｒ 液体培养基 （ ０ ０ｍ ）蛋 白胨 ｌ ， １ ０ Ｅ ： ０ｇ磷 酸氢 二钾 ２ｇ 乙酸 钠 ５ｇ柠 檬 酸二 铵 ２ｇ葡 萄糖 ２ ， ， ， ０ ｇ 七 水 硫 酸镁 ０５ ， 肉膏 １ ， 水 硫 酸 锰 ０１ ， ．８ｇ牛 ０ｇ 一 ． ９
值 为 ７ ，于 ３ ． ０ ７℃振荡培养 ２ 。摇床转速为 １０ ４ｈ ４
ｒｖｍｎ 平板 菌 落计 数 。每 个处 理 做 ３ 重 复 ， 平 ｅ／ ｉ， 个 取
均值 。 ４ ）种龄 的确 定 ： 培 养好 的斜 面 ， 接 种环 挑 ３ 取 用 环 接 种 于盛 有 ３ Ｌ无 菌 Ｌ ０ｍ Ｂ液 体 培 养 基 的 ３ ０ ｍ ０ Ｌ
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 ．
１１ 菌种 ．． １
植 物 乳 杆 菌 由沈 阳市 产 品检 验 所试 验
室 筛选保 藏 。
１ ． 培养基 １ Ｌ ．２ １ ） Ｂ斜面培养基 ： 胰蛋 白胨 １ ． 酵 ｇ 母提 取 物 ０５ｇＮ Ｃ ， 馏 水 １０ｍ ｐ ． ， ａ Ｉ１ｇ蒸 ０ Ｌ，Ｈ值 ７０ ．—
转接 于 新鲜 试管 斜 面 ，置于 ３ ７℃培养 １ 。在 培养 ４ｈ 好 的斜 面 上 加入 ５ｍＬ无 菌 生理 盐 水 。 接 种 环将 菌 用 苔 轻轻 刮 下 ． 荡 ， 菌 倾 注 于另 一 盛有 ２ 振 无 ５ｍＬ无 菌 生理 盐水 的 ３０ｍＬ三角 瓶 （ ０ 盛有 数粒 玻璃 珠 ） 。然 中 后在 摇 床 上 以 １０ｒｖｍｉ 荡 ２ ｉ， ４ ／ ｎ振 ｅ ０ｍｎ 制成 均匀 菌 悬液 ， ４℃保 存备 用 。
菌生 长所 需 的碳 源和 氮源 。 物乳 杆 菌是 一类 化 能异 植 氧 型乳 酸 菌 ，不 同 的发 酵 工艺 对 其 生 长 有 不 同 的影 响 。本试 验对 其发 酵 温度 、 养 基初始 ｐ 培 Ｈ值 、 种量 接
做 了研 究 。 旨在 获得 植 物乳 杆菌 在 静置 条件 下 的最 优 化 培 养基 ， 以利 于其 增 殖 。
收 稿 日期 ：０ ０ ０ — ３ ２ １— ９ １
三角 瓶 中 ，置摇 床上 ３ ７℃、４ ｖｍｎ振 荡培 养 １ １０ｒ ／ ｉ ｅ ２ ｈ 。用移 液 器按 ５ ％的接种 量 接 种 于 Ｌ Ｂ发 酵液 中 ． 调 ｐ Ｈ值 为 ７０ 于 同样 条件 振 荡 培养 ， ３ｈ取 样 １次 ， ．， 每
中 图 分 类 号 ：Ｓ ５ ． Ｔ ２ ２１ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ４ １６ （０ １ ｌ ｏ ０ — ３ １７ — １ １ １ ） — ｏ ９ ０ ２ Ｏ
乳 酸 菌 的分 离 培养 、 胆 固醇作 用 机理研 究 和 乳 降
１２ 试 验 方法 ．
酸菌发酵剂 的制备都需要 良好的培养基 ， 以使乳酸菌 得 到 大量 增 殖 ．从 而确 保 乳 酸 菌 在经 过 低 温 离 心浓
１ ． 培养奈件的确定 １ 培养温度对植物乳杆菌 ．２ ２ ） 生长 的影 响 ： ２ Ｖ Ｖ） 按 ％（ ／ 的接种 量 ， 个处 理 做 ３个 每
重复 ， 取平 均值 。 ２ ）初始 ｐ Ｈ值对 植 物乳 杆菌 生长 的影 响 ： 将基 础 培 养 基 的 初 始 ｐ 值 分 别 调 整 为 ５５ ６ 、．、．、 Ｈ ．、． ６５７０ ０
第 １ 总第 １ ９期 期 ９
２１ ０ １年 １月
农业 科技 与装 备
Ａｇ ｉｕ ｔ ａ Ｓ ｉ ｎ ｅ Ｔｅ ｈｎ ｌ ｙ ｎ ｕｉ ｅ ｔ ｒｃ ｌｕｒｌ ｃｅ ｃ ＆ ｃ ｏ ｏｇ ａ ｄ Ｅｑ ｐｍ ｎ
．
ＮＯ１Ｔ ｔ ．９ ． Ｏａ ＮＯ１ ９ ｌ Ｊｎ ２ １ ａ ． ０ １
ｇ ，酵母 提取 物 ５ｇ ，吐温 ８ ｍ ， ２ １ ｉ ０ １ Ｌ １ １ｏ ５ｒ ｎ灭 Ｃ， ａ
菌
２ ３ ４ ５ ６ Ｖ Ｖ） ％、％、％、％、％（ ／ 的接种 量将 菌液 接 人 到基 础 培 养 基 中 ， 液量 为 ３ Ｌ ３０ｍＬ三 角 瓶 ， ｐ 装 ０ｍ ／０ 调 Ｈ
缩 、 温喷雾 干燥 或 冷冻 干燥 等处 理 后有 足够 的活 菌 低 数 。目前 ， 于使 用 ＭＲ 关 Ｓ培 养基 培养 乳 酸菌 的报 道很
多 。 明此 培 养 基应 用 广 泛 ， 表 因此 不 再 讨 论 植 物乳 酸
１ ． 茵 悬液 的 制备 ．１ ２
将 植 物 乳 杆 菌从 保 存 的 斜 面