２０１１年第４期（总第１７１期）　

猪２型圆环病毒自家组织灭活苗的研制及其免疫效果观察　

梁俊昌①②许瑞利①②　朱瑞良①　

（①山东农业大学动物科技学院泰安２７１０１８②山东省枣庄市市中区畜牧兽医局）　

摘要本试验通过检测细胞组织培养Ｐｃｖ２灭活疫苗与自家细胞免疫后Ｐｃｖ２抗体水产，结果表明，自家组织灭活苗　

是预防ＰＣＶ２行之有效的办法。　

关键词ＰＣＶ２　自家组织灭活茵免疫　

中图分类号：￥８５２．５　２　文献标识码：Ａ　文章编号；１００７．１７３３（２０１１）０４．００１３．０２　

猪２型圆环病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ　ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ　ｔｙｐｅ　２，ＰＣＶ２）病是　

当今养猪业流行的传染病之一，在现代化规模养猪场　

中，ＰＣＶ２往往与其他疫病混合感染…，发病率呈上升趋　

势。该病的广泛流行和蔓延已给世界各国养猪业的发展　

造成了严重威胁和经济损失［２】０本试验对自家组织苗在某　

些猪场应用的效果进行了测定。　

１材料和方法　

１．１材料　

灭活疫苗．蓝圆二联苗（某高等院校研究所中试产　

品）；自家组织苗：选试验猪场ＰＣＶ２发病猪典型间质性肺　

炎病料，严格按自家组织苗制作程序制作，经０．４％甲醛　

灭活，恒温汽浴振荡培养箱３７￣Ｃ灭活３６ｈ，冷藏备用；圆　

环病毒２型抗体检测试剂盒；美国伯乐公司６８０型全自动　

酶标仪。　

１．２方法与步骤　

１．２．１　分组和预试　４２日龄健康猪４５头，随机分为Ａ、　

Ｂ、Ｃ３组，每组１５头，分３栏饲养，每组按１～１５的顺序逐　

头打耳缺编号，观察７ｄ，无异常，正式试验。　

１．２．２试验前采血和初免试验猪４９日龄，３个组同时逐　

头前腔静脉采血５ｍｌ，随即颈部肌肉注射相应疫苗或生理　（试验ＩＩ组）每头免疫试验用自家组织苗３ｍｌ；Ｃ组（对照组）　

每头注射生理盐水３ｍｌ。所采血样常温析出血清，按分组　

对应编号标记，．２０℃冷冻保存待检。　

１．２＿３　初免抗体检测采血和二免　试验猪７０日龄采血，　

试验组逐头免疫相同种类和剂量的疫苗，对照组仍每头　

注射生理盐水３ｍｌ。所采血样析出血清，编号保存。　

１．２．４二免抗体检测采血试验猪９１日龄，全部试验猪　

逐头前腔静脉采血５ｍｌ，所采血样依上述１．２．２和１．２－３析出　

血清，编号保存。　

１．２．５抗体检测和统计分析把所采血清，逐份ＥＬＩＳＡ检　

测ＰＣＶ２抗体，血清抗体ＯＤ值依分组编号逐头登记。按统　

计学方法比较各组方差及ＯＤ均值差异显著性。　

１．２．６　试验猪群观察　试验开始后，逐日观察各试验组　

和对照组群体的生长、采食、发病情况及外观表现，以　

判断不同疫苗对ＰＣＶ２的免疫效果。　

２结果与分析　

２．１　ＰＣＶ２抗体的检测结果和统计分析　

试验各组不同阶段ＰＣＶ２抗体ＥＬＩＳＡ检测结果表１。为　

从统计学上判断各组免疫前后抗体水平变化是否存在差　

异，对各组不同阶段的抗体水平逐对作成对双样本均值　

盐水：Ａ组（试验Ｉ组）每头免疫试验用蓝圆二联苗３ｍｌ；Ｂ组　分析ｔ检验，检验结果如表２。　

表１　各试验组与对照组免疫的不同阶段ＰＣＶ一２抗体检测结果　

ｌ３　山东畜牧兽医　２０１１年第３２　

表１、表２数据显示：试验Ｉ组经蓝圆二联灭活苗１次免　

疫２１ｄ后，血清抗体阳性率从４０．ｏ０％上升至７９＿３１％，ＯＤ　

均值上升，但与一免前差异不显著。２次免疫２１ｄ后，阳　

性率从７９．３１％上升至１００％，ＯＤ均值进一步上升，且与二　

免前差异极显著。试验ＩＩ组经自家组织苗１次免疫２１ｄ后，　

阳性率从５６．６６％上升至１００％，ＯＤ均值上升，与１免前差　

异极显著。２次免疫２１ｄ后，阳性率仍是１００％，ＯＤ均值继　

续上升，且与２免前差异极显著。　

表２　ＰＣＶ２血清抗体检测结果的统计学检验　

组别　试验Ｉ组　试验ＩＩ组　对照组　

数据系列１　～免前二免前一免前二免前一免前二免前　

数据系列２　二免前二免２１ｄ二免前二免２１ｄ二免前二免２１ｄ　

值１．９６３２　９．３６３２　３．７５０５　８．４５４６　０．８６１２　３．９２７　ｔ　（　．０５）２．０４８４　２．０４８４　２．０４５２　２．０４５２　２．０４５２　２．０４５２　

ｔ∞（　．０１）２．７６３３　２．７６３３　２．７５６４　２．７５６４　２．７５６４　２．７５６４　差异显著性水平ＩｔＩ　ｏ２５　Ｉｔｌ＞ｔ０　ｏ０５　Ｉｔ１＞ｔｏ　０ｏ５　Ｉｔｌ＞ｔ０　００ｓ　ＩｔＩ　＿０２５　Ｉｔ【＞ｔ０　００５　Ｐ（１ｔｌ＞ｔｏ￣）０．０７２９　４．０３Ｘ１０‘　。０．０００８　２．５７Ｘ１０‘’０．３９６２　０．００８４　

差异显著性　不显著极显著极显著极显著不显著极显著　

２个试验组分别经２次蓝圆二联苗和自家组织苗免疫　

后，血清ＰＣＶ２抗体水平都能有效上升。虽然从统计学角　

度，试验Ｉ组一免２１ｄ后与一免前血清抗体水平对比，差异　

不显著，但其抗体阳性率及ＯＤ均值都有明显提高或上升　

（ＯＤ均值由０．１５３上升至０．３０６２），且Ｐ（１ｔｌ＞　）＝Ｏ．０７２９，已　

经很接近Ｈｏ的拒绝域（０．０２５），尚不能据此否认该组一免　

２１ｄ后血清抗体水平显著上升。要确知抗体是否显著上　

升，仍需进一步试验数据。　

对照组经１次注射生理盐水２１ｄ后，血清抗体阳性率　

从７０％下降至５６．６７％，ＯＤ均值下降，但与１次注射生理盐　

水前差异不显著。２次注射生理盐水２１ｄ后，抗体阳性率　

进～步下降Ｎ５３．３３％，但ＯＤ均值却有所上升，且与２次　

注射生理盐水前差异极显著。不能把这一抗体水平显著　

上升归因于注射生理盐水。因ＯＤ均值上升的同时，抗体　

阳性率却进一步下降，ＯＤ均值的上升，不是总体普遍上　

升的结果，而是个别样本超常上升的影响。这种结果，　

可能与个别试验样本ＰＣＶ２自然感染有关。　

２．２免疫效果观察　

试验ＩＩ组（自家组织苗免疫组）猪群从初次免疫开始，　

到２Ｏ周龄，生长一直正常，与该场正常猪无异。试验Ｉ组　

（蓝圆二联苗组）和对照组（生理盐水组）从ｌ２周龄开始，逐　

渐表现出与该场未使用自家组织苗免疫以前猪群散发性　

ＰＣＶ２流行期间完全相同的症状。直到１５周龄补注射自家　

组织苗，ｌ７周龄加强免疫１次；并在每次注射苗前３ｄ开　

ｌ４　始，连续７ｄ饲料中添加抗生素协助预防和治疗，猪群才　

开始逐步恢复正常。　

３讨论　

试验结果表明，在市场未有免疫效果确切的ＰＣＶ２疫　

苗销售以前，采集自场病猪典型间质性肺炎病料制作自　

家组织苗，仍是预防ＰＣＶ２行之有效的办法。猪群经细胞　

培养ａｃｖ２￣作的灭活苗免疫后，ＰＣＶ２抗体显著上升，但　

不能有效预防ＰＣＶ２发病。说明ＰＣＶ２的结构蛋白抗体，不　

能有效预防ＰＣＶ２发病。自家组织苗中含有ＰＣＶ２与其他病　

原或有机微粒融合体这～可能性外，还可能有以下２种原　

因：　（１）ＰＣＶ２寄生靶细胞问题。ＰＣＶ２与ＨＩＶ（爱滋病毒）　

具有很大的相似性，都是在免疫细胞内寄生和复制。ＨＩＶ　

疫苗之所以２Ｏ多年至今仍未研制成功，除了因为ＨＩＶ存在　

频繁变异外，还因为它寄生在人体免疫细胞，其中和抗　

体无法有效突破免疫细胞固有的免疫屏障，中和在细胞　

内寄生的ＨＩＶ。传统疫苗通过激发免疫细胞的免疫方式，　

对ＨＩＶ免疫没有任何效果　。（２）病毒。细胞系统分泌　

蛋白对病毒的免疫作用：已有的研究证实，昆虫的杆状　

病毒．昆虫细胞系统，可高水平表达外源蛋白～多角体蛋　

白，这些蛋白覆盖并保护着核体内的病毒粒子。通过提　

纯这种蛋白，可对动物产生一定的免疫源性。使用间质　

性肺炎病料制作自家组织苗之所以能较好地预防ＰＣＶ２发　

病，也可能因为ＰＣＶ２感染肺泡细胞后，刺激肺泡细胞产　

生某种分泌蛋白，这种分泌蛋白对ＰＣＶ２具有某种保护作　

用，或者促进其在机体内复制。机体经这种分泌蛋白免　

疫后，能有效中和这种分泌蛋白　】，从而抑制Ｐｃｖ２在机　

体内复制，或使ＰＣＶ２在机体内失去保护屏障，无法在细　

胞内生存，使ＰＣＶ２不发病。　

参考文献　

【ｌ】孙艳明，赵德明．猪圆环病毒分子生物学研究进展　．中国畜牧　

兽医，２００６，３３（７）：６２—６４．　

［２】陈艳红，郭鑫，赵荣茂，等．我国规模化猪场主要繁殖障碍性病毒病的　

血清学调查［Ｊ］．中国兽医杂志，２００７，４３（６）：３３—３５．　

【３］胡兰银，张骞，肖建锋等．引起猪发病死亡主要疫病的病原学调查　

［Ｊ］．畜禽业，２００７，３２（１２）：１５—１７．　

【４］邱艳红，吴峻华，叶玮等．福州市猪圆环病毒（ＰＣＶ－２）￣清学调查　

．中国兽医杂志，２００５，４１（８）：２６－２７．　

（收稿日期：２０１１　３＿２３）