·论　著·氨茶碱缓释片的人体生物等效性研究谷大建,王本杰,李宏建[摘　要]　目的:研究氨茶碱缓释片试验制剂和市售参比制剂在20名健康男性志愿者体内的药动学和相对生物利用度,并进行生物等效性评价。

方法:根据双交叉试验方法口服单剂量200mg 的两种氨茶碱缓释片,采用HP LC 法测定血浆中茶碱的浓度。

结果:口服单剂量200mg 试验制剂后,t 1/2、t max 、c max 、A U C 0～36、A UC 0～∞分别为(9.13±1.94)h 、(3.95±0.56)h 、(3.66±0.70)μg /ml 、(41.01±7.33)μg ·h ·ml -1和(44.29±8.60)μg ·h ·ml -1;参比制剂为(9.85±1.79)h 、(4.10±0.53)h 、(2.69±0.37)μg /ml 、(39.36±6.24)μg ·h ·ml -1和(43.32±7.36)μg ·h ·ml -1。

氨茶碱缓释片试验制剂相对生物利用度为(105±16.7)%。

结论:试验制剂和参比制剂具有生物等效性。

[关键词]　氨茶碱;迟效制剂;生物等效性;药代动力学;色谱法,高压液相[中图分类号]　R 969,R 974.3 [文献标识码]　A [文章编号]　1671-2838(2010)03-0208-04Bioequivalence of aminophylline sustained -release tablets in healthy volunteersG U Dajian 1,WA N G Benjie 2,LI Ho ng jian 1(1.Depar tme nt of Pharmacy ,Q ianfo shan H ospital of Shandong P rovince ,Ji 'nan 250014,China ;2.Depa rtment of Phar macy ,Q ilu Ho spital affiliated to Shandong U niver sity ,Ji 'nan 250012,China )[ABSTRACT ]　Objective :T o study the pha rmaco kine tics and re lativ e bio availability of test and reference aminophylline sus -tained -release table ts in 20healthy vo lunteers ,and to evalua te the bio equivalence be tw een the two prepara tions .Methods :A sing le o ral do se o f 200mg of tw o kinds of aminophy lline sustained -release tablets w as given accor ding to a crossove r desig n .T he plasma co ncentration of theophy lline w as determined by HP LC method .Results :A fter the single o ral do se of 200mg o f aminophy lline sustained -release tablets ,the t 1/2,t max ,c max ,A UC 0-36and A U C 0-∞of the test tablets we re (9.13±1.94)h ,(3.95±0.56)h ,(3.66±0.70)μg /ml ,(41.01±7.33)μg ·h ·ml -1and (44.29±8.60)μg ·h ·ml -1,respec tively .Fo r the reference table ts ,the pa rameters were (9.85±1.79)h ,(4.10±0.53)h ,(2.69±0.37)μg /m l ,(39.36±6.24)μg ·h ·ml -1and (43.32±7.36)μg ·h ·m l -1,respectively .T he relative bioavailability of the test aminophy lline sustained -release tablets was (105±16.7)%.C onclusion :T he te st and reference amino phy lline sustained -release tablets are bioequivale nt .[KEY WORDS ]　aminophy lline ;delay ed -acting preparations ;bioequivalence ;pharmaco kinetics ;chroma to g raphy ,high pres -sure liquid[P ha rm Care Res ,2010,10(3):208-211]作者简介　谷大建(男),副主任药师.E -mail :whg dj @126.co m作者单位　250014济南,山东省千佛山医院药剂科(谷大建,李宏建);250012济南,山东大学齐鲁医院药学部(王本杰) 氨茶碱为茶碱与乙二胺的复盐,其药理作用主要来自茶碱。

氨茶碱是临床上常用的平喘药,治疗支气管哮喘疗效较好。

近年来对茶碱的药理学研究表明,其临床治疗作用仅需较低的血浆浓度,表现为茶碱血浆浓度尚未达到扩张支气管所需要的水平即可显示显著的抗哮喘作用,故茶碱的有效治疗浓度现已重新确定为5～10m g /L [1]。

为了克服茶碱普通剂型口服吸收峰浓度高而引起的不良反应,国内外已有多种茶碱缓释制剂上市。

氨茶碱缓释片口服吸收缓慢,有效血药浓度在体内维持时间较长,从而较持久地发挥作用。

本研究对氨茶碱缓释片试验制剂进行人体相对生物利用度研究,为新药报批和临床应用提供理论依据。

1　材　料Waters 2695高效液相色谱仪、Empow er 数据采集系统和Waters 2996紫外检测器(美国Waters公司);XW -80A 型涡旋混合器(上海精科实业有限公司);Abott 高速离心机(美国雅培公司);PK514BP 超声清洗器(德国Bandel 公司);梅特勒-托利多AX -205Delta Range 电子天平(瑞士梅特勒公司)。

氨茶碱缓释片试验制剂(规格:0.1g /片,山西亚宝药业集团有限公司,批号070625),氨茶碱缓释片参比制剂(规格:0.1g /片,吉林精优长白山药业有限公司,批号070801);茶碱对照品(美国New Je rsey 公司,批号A0244736);咖啡因(山东新华制药厂,批号04103581)。

甲醇(色谱纯,美国J .T .Baker 公司,批号E33E38);娃哈哈纯净水(杭州娃·208·药学服务与研究　Pharm C are Res 2010Ju n ;10(3)谷大建,等.氨茶碱缓释片的人体生物等效性研究哈哈集团有限公司)。

空白血浆由山东大学齐鲁医院血库提供。

2　方法和结果2.1　志愿者选择和试验设计　本研究得到山东大学齐鲁医院伦理委员会批准,所有志愿者均签署知情同意书。

健康男性志愿者20名均为在校大学生,平均年龄(23.2±1.6)岁,体重(71.3±5.7)kg ,于试验前统一行血、尿常规及肝、肾功能检查。

所有志愿者体格检查,肝、肾功能等实验室检查正常,无急、慢性疾病及家族遗传病史,试验前2周内无用药史,3个月内未参加其他新药临床试验。

采用单剂量两周期双交叉试验。

受试者按体重配对后,随机分为两组,编号为1～20。

志愿者于试验前一天22:00后禁食,试验当日晨抽取空白血样后,立即空腹口服试验制剂或参比制剂200mg ,200ml 温开水送服。

于服药后1、2、3、4、4.5、5、5.5、6、7、8、12、24、36h 取肘静脉血4ml ,5.0×103r /min 离心5min (离心半径9.8cm ),取血浆分双份于-20℃贮存,备测。

周期间清洗期为一周。

第二周期服药剂量、取血时程、留样方法同第一周期。

2.2　色谱条件　AGT Venusil XBP -C 18色谱柱(150mm ×3.9m m ,4.6μm );流动相:水-甲醇(80∶20);流速1.0ml /min ;进样量20μl ;柱温28℃;检测波长270nm 。

在本研究建立的色谱条件下,茶碱和内标保留时间分别约为6.7min 和9.8min 。

如图1所示,血浆中的内源性物质对样品系统分离与定量分析没有干扰。

图1　血浆中氨茶碱缓释片的HPLC 谱图Figure 1　HPLC photograms of aminophylline sustatined -release tablets in plasmaA :空白血浆;B :2μg /ml 茶碱对照品+内标咖啡因;C :空白血浆+茶碱对照品+内标咖啡因;D :1号志愿者口服试验制剂3h 后血浆样品+内标咖啡因;1:茶碱;2:咖啡因2.3　血浆样品预处理2.3.1　溶液的配制　(1)内标溶液:精密称取咖啡因25.7m g ,置于25m l 容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配成浓度为1mg /ml 的母液。

精密吸取1m l 母液,置25ml 容量瓶中,用流动相稀释并定容至刻度,得浓度为40μg /ml 的内标溶液。

(2)对照品溶液:精密称取茶碱对照品25.2m g ,置于25m l 容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配成浓度为1mg /m l 的茶碱储备液,再用流动相稀释得到浓度为100、10、1μg /m l 系列标准储备液。

(3)样品溶液:取空白血浆适量,加入一定体积的标准储备液配制系列浓度的标准样品溶液。

2.3.2　血浆样品预处理　取血浆300μl ,加内标(40μg /m l 咖啡因溶液)20μl ,加甲醇600μl ,涡旋振荡2min ,1.008×104r /min (离心半径9.8cm )离心5min ,移取上清液100μl 进样,进样量为20μl 。