Ｏ ＧＤ （ ＝ ０８ ６ ＞ ００ ） Ｔ ｅｅ ｐ ｅｓｏ ｆＰ Ｃ—ｌ ｎ Ｓ Ｄ ｅｅ ｄ ｃｉｅ ｉｎｆ ａ ｔ ｎ ｔｅｔｒｅ ｇｏ ｐ ｆＳ ＲＴ 一 一 Ｐ ．６ ．５ ． ｈ ｘ ｒｓｉｎ ｏ Ｇ ａ ａ ｄ Ｍｎ Ｏ ｗ ｒ ｅ ｌ ｄ ｓｇ ｉｃ ｎｌ ｉ ｈ ｈｅ ｒｕ ｓｏ Ｉ ３ ／ ｎ ｉ ｙ
收 稿 日期 ：０ １ ０ — ８ ２ １－ ４ ０
基 金项 目： 国家 自然科学基金 （ １７ ０ ９ ； ８０ １６ ） 广东 省科技计划项 目（０ ０ ０ ０ ０ ０ ８ ； 东省科技计划项 目（０ ８ ０ ０ ００ ９ ２ １Ｂ ８ ７ １ ０ ）广 ２ ０ Ｂ ８ ７ ３２ ）
作 者 简 介 ： 超 英 ， 士研 究 生 ， 究 方 向 ： 李 硕 研 脑血 管 病 ， ｍａｌ ｌｌ １７ ２ ． ｒ； 通 信 作 者 ： 玲 ， 士 生 导 师 ， 授 ， － ｉ Ｅ— ｉ：ｃｙ １５ ＠１６ｃｎ ｏ 李 博 教 Ｅ ｍａ ｌ
明显 （ Ｐ＜００ ） ．５ 。经预处理后 ＳＲ ３ ／ 组 Ａ Ｐ水 平增加 ， ＩＴ 一 一 Ｔ 且与 Ｖ ｃｏ 组 间差异无统计学意 义（ ｅｔｒ Ｐ＝０８ ６＞００ ） ＳＲ ３ ／ ．６ ． 。 ＩＴ 一 一３ ５
组 细胞 问 Ｐ Ｃ ｌ Ｇ — ａ及 Ｍｎ Ｏ Ｓ Ｄ蛋 白的表 达与 Ｖ ｃ ｒ 对应 的 ３组 比较 明显 下 降 （ ｅｔ 组 ｏ Ｐ＜００ ） Ｈ ｐ Ｏ Ｄ及 Ｏ Ｄ相对 于各 自 ．５ ， ｙ ＋ Ｇ Ｇ
预处 理 中发挥重要 的细胞保护作用 。 关键 词 ： 缺氧预处理 ；ｉｕｎ ； Ｓｒ ｉ３ 过氧化物 酶体增生激活 受体一 ｔ 的共 刺激 因子一 ｃ； ｌＬ锰超 氧化物歧化酶 ；ｉ Ｎ ｓ Ａ干扰 Ｒ 中图分类号 ： ３ Ｒ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：６ ２ ３ ５ （０ ２ ０ — ０ １ ０ １７ — ５ ４ ２ １ ） １ ０ ０ — ７
００ ９ 与 Ｖ ｃｏ 组 （ ． ２±０１０ 相 比， ．０ ） ｅｔ ｒ ０５ ６ ．４ ） 细胞活性下 降更明显 （ Ｐ＜００ ） 经预处 理后 ＳＲ ３ ／ 组 细胞活性增 加 ， ．５ ， ＩＴ一 一 且与 Ｖ ｃｏ ｅｔ ｒ 组 间差异无统计学 意义 （ Ｐ＝０３ １＞００ ） Ｏ Ｄ后 ＳＲ ３ ／ 组 （ ．３ ．１ ．５ 。 Ｇ Ｉ Ｔ 一 一 ０３ ４±００ ６ 与 Ｖ ｃ ｒ （ ．５ ．０ ） ｅｔ 组 ０４ ３±Ｏ０ ５ 相 比， Ｔ ｏ ．１ ） Ａ Ｐ下降更
ｅ ａｕ ｔｄ ｕ ｉ ｇ Ａ Ｐ Ｆ ｕ ｒ ｍｅ ｒ ｓ ｙ Ｋｉ Ｔ ｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆＳ Ｒ ３， Ｐｅｏ ｉｏ ｒ ｌ ｅ ａ ｏ — ｃｉ ａｅ ｅ ｅ ｔｒ ｃ ａ ｔ ａｏ 一 ｖ ｌ ａｅ ｓｎ Ｔ ｌ ｏ ｏ ｔ ｃ Ａｓ ａ ｔ ｉ ． ｈ ｘ ｒ ｓｉ ｎ ｏ Ｉ Ｔ ｒ ｘ ｓ ｍｅ ｐ ｏ ｉ ｒ ｔ ｒａ ｔ ｔｄ ｒ ｃ ｐ ｏ 一 ｏ ｅｉ ｔ ｒ １ ｆ ｖ ｖ
ｇ ｌ ２ ａ ｏ ．ｏ ｃ ｚ１ ＠ｙ ｈ ｏ 版 ） 医
第３ ３卷
ｂ ｔ ｅｅ ｎｒａｅ ｙ ＋ Ｇ ｓｅｔｅｙＰ＜００ ） ｒｓｌｎ ｏｓ ｎ ｃｎ ｉｅｅ ｃ ｅ ｅｎＳＲ ３ ／ ｎ ｅｔｒｎＨ ｐ ｕ ｗ ｒ ｉｃｅｓｄｉ Ｈ ｐ Ｏ Ｄｒ ｐ ｃｖｌ（ ｎ ｅ ｉ ．５ ． ｅｕ ｉｇ ｎｎ ｇｉ ａ ｔ ｆ ｒｎ ｅ ｔ ｅ Ｉ Ｔ 一 一ａｄＶ ｃｏ ｉ ｙ ＋ ｔ ｉ ｉ ｆ ｉ ｄｆ ｂｗ
定细胞活性 。Ａ Ｐ荧 光检测试剂 盒测定胞 内的 Ａ Ｐ水平 。Ｗｅｔ ｎＢｏ 法测定各组 细胞 内 ＳＲ ３ 过氧化物 酶体增生 激活受 Ｔ Ｔ ｓ ｒ ｌｔ ｅ ＩＴ 、
体一 的共刺 激 因子 一仅 Ｐ Ｃ １ ， 超 氧化 物歧 化 酶 （ ｎＯ ） １ （Ｇ 一 ）锰 Ｍ Ｓ Ｄ 的蛋 白表达 水 平 。 【 果 】 Ｇ 结 Ｏ Ｄ后 Ｓ Ｔ 一一 （． ０± Ｉ ３／ 组 ０ ３ Ｒ ４
摘
要 ： 目的 】探 讨基 因干扰 Ｓｔｉ （ＩＴ ） 【 ｉ ｎ ＳＲ ３ 后对缺 氧预处理 的影 响。【 法 】 ｒ ３ ｕ 方 使用 空 白载 体 ｐ Ｃ Ｉ— Ｆ Ｇ ＳＬ Ｇ Ｐ进行 预实
验， 筛选 适合 的感 染复 数 （ Ｉ 。正 式实 验使用 ｐ Ｃ Ｉ— Ｕ ＳＲ ３转染 Ｐ １ ＭＯ ） Ｇ ＳＬ Ｐ Ｒ— Ｉ Ｔ ｃ ２细胞 。成 功构建 空 白载体 （ｍｐｙｖｃ ｒ及 ｅ ｔ ｅｔ ） ｏ ＳＲ ３ ／ 稳定 细胞株后 ， 两种细胞分别 分为对照组 （ｏｔ １； ＩＴ 一一 将 ｃｎｒ ）缺氧 预处理＋ 氧组 （ ｙ ＋ Ｇ ； 纯缺氧 组 （ Ｇ ； Ｔ 测 ｏ 缺 Ｈ ｐ Ｏ Ｄ）单 Ｏ Ｄ） Ｍ１ ｒ
ｏ ｉｎ ｍｅ Ｊａ ｇ ｎ ２ ０ ０，Ｃ ｉａ ． ｅｋｎ ｎｖ ｒｉ ｈ ｎ ｈ ｎＨｏｐｔｌ ｈ ｎｈ ｎ５ ３ ，Ｃｈｎ ；４ Ｄｅ ａｔ ｎ ｆ ｆ ａ ｇ ｎ， ｉｎ ｍｅ ５ ９ ３ Ｊ ｈｎ ；３ Ｐ ｉｉｇＵ ｉｅｓｔ Ｓ ｅ ｚ ｅ ｓ ｉ ，Ｓ ｅ ｚ ｅ ０ ６ ｙ ａ １ ８ ｉａ ． ｐ ｒｍｅ ｔｏ
Ｏ ｙｅ —ｌｃｓ ｄｐｉ ｔ ｎ（ ｙ ＋ Ｇ ａ ｄＯ Ｄｒｓｅｔ ｅ ． Ｉａｓｙｗ ｓ ｓｄｆｒｅｔ ｇ ｈ ｅ ｓ ｉ ｉｔ． ｈ Ｔ ｖｌ ａ ｘｇｎｇ ｏｅ ｅ ｒ ａ ｏ Ｈ ｐ Ｏ Ｄ） ｎ Ｇ ｐｃｉ ｌ ＭＴ＂ ｓ ａ ｅ ｓｎ ｅｃｌ ａ ｌｙ Ｔ ｅＡ Ｐｌ ｅ ｗ ｓ ｕ ｖｉ ｅ ｖｙ ａ ｕ ｏｔ ｉ ｔ ｌｖ ｂ ｉ ｅ
００ ） Ａ ｅ Ｇ ．５ ． ｆ ｒ Ｄ，Ｔ ｅＡ Ｐｌｖｌｄ ｃｅｓｄｍ ｒ ｉ ＳＲ ３ ／ ｏ ａｅ ｉ ｅｔｒ ０３ ４±００ ６ｖ ．５ ｔ Ｏ ｈ Ｔ ｅ ｅｒａｅ ｏｅ ｎ Ｉ Ｔ 一 一ｃｍｐｒｄｗｔ Ｖ ｃｏ （ ．３ ｅ ｓ ｈ ．０ ｓ ４ ３±００ ５ Ｐ ００ ） ０ ．１ ， ＜ ．１ ，
ＭＴ ａ ｅ ｅｒａｅ ｏｅｉ ＳＲ ３ ／ ｏ ｐ ｒｄｗｔ Ｖ ｃｏ Ｏ４ ０±Ｏ０ ９ｖ ． ２４Ｏ１０ Ｐ＜００ ） ｂ ｔ ｅｅ ｎｒａｅ Ｔｖｌ ｓｄｃｅｓｄｍ ｒ ｎ ＩＴ 一 一ｃｍ ａｅ ｉ ｅｔｒ（．３ ｕ ｈ ．０ ｓ ５ － ．４ ， Ｏ６ ．１ ， ｕ ｒ ｃｅ ｓｄｉ ｗ ｉ ｎ Ｈ ｐ＋Ｏ Ｄ ｒｓｅｔ ｅ Ｐ＜Ｏ０ ） ｒｓｌｎ ｏｓ ｎｆ ａｔ ｉｅｅ ｃ ｅ ｅｎＳＲ ３ ／ ｎ ｅｔ ｙ ＋ Ｇ Ｐ＝０３ １ ｙ Ｇ ｐ ｃｖｌ ｅ ｉ ｙ（ ． ， ｅｕｔ ｇｉ ｎ ｇｉｃｎ ｆ ｒｎ ｅ ｔ ｅ ＩＴ 一 一ａｄＶ ｃ ｒｎＨ ｐ Ｏ Ｄ（ ５ ｉ ｎ ｉ ｉ ｄ ｂｗ ｏｉ ．１ ＞
（ ．ｅ ａ ｍ ｎ ｅ ｒｌ ｙ Ｆｒ ｆｌ ｔｄＨ ｓｉ ｌ Ｓ ｎＹ ｔ ｅ ｎｖｒｉ ， ｕ ｎｚｏ ０ ０ Ｃ ｉ ； ． ｈ ｅ ｔ ｌ ｏｐｔｌ １ ｐｒ ｅ ｔｆ ｕｏ ｇ ， ｉ ｔ ｆｉ ｅ ｏｐｔ ， ｕ ａ ＳｎＵ ｉ ｓｙ Ｇ ａ ｇｈｕ５ ０ ８ ， ｈｎ ２ Ｔ ｅＣ ｎ ａ Ｈ ｓｉ Ｄ ｔ ｏＮ ｏ ｓＡ ｉａ ａ — ｅ ｔ １ ａ ｒ ａ
ｆ ｒ ｌｅ ｐ ｒ ｎ ｓ Ｃ ｌ ｒ ｎ ｆｅ ｅ ｔ ｍｐ ｙ ｖ ｃ ｏｓ ｏ Ｉ ３ Ｒ ｏ ｍａ ｘ ｅ ｉ ｍｅ ｔ． ｅ ｌ ｔ ｓ ｔ ｄ ｗｉ ｅ ｔ ｅ ｔｒ ｒ Ｓ ＲＴ 一 ＮＡｉＬ ｗｅ ｅ ｄ ｖｄ ｄ ｉｔ ｏ ｔ １ ｈ ｐ ｘ ｃ ｐ ｅ ｏ ｄ ｔ ｎ ｎ ＋ ｓ ａ ｅ ｈ — Ｖ ｒ ｉ ｉ ｅ ｎ ｏ ｃ ｎ ｒ ． ｙ ｏ ｉ ｒ ｃ ｎ ｉ ｏ ｉ ｇ ｏ ｉ
ｃｎ ｏ组 均上 调 （ ｏｔｌ ｒ Ｐ＜０ ５ ， ． ）且预 处理 组 的上 调更 明显 （ Ｏ Ｄ组 比较 ， ０ 与 Ｇ Ｐ＜０ ５ 结 论 】 ． ）【 ０ 干扰 ＳＲ ３基 因后 Ｐ Ｃ １ ＩＴ Ｇ 一仅及
Ｍｎ Ｏ Ｓ Ｄ的表达下降 ，Ｉ Ｔ ＳＲ ３为预处理或 缺氧处理上 调 Ｐ Ｃ １ Ｇ 一 及 Ｍｎ Ｏ Ｓ Ｄ的其 中一条途 径 ， 干扰 ＳＲ ３后其他 的途径仍然 在 ＩＴ
基础研 究 ・
基因干扰 Ｓｒ ｉ３ ｉ ｕｎ 后对缺氧预处理的影响 ｔ
李超 英 ， 胡 一 俊 ， 赵 嘉 ， 王 莹 ， 陶 玉倩 ， 李 玲
（． １中山大学 附属 第一医 院神经 内科 ， 广东 广州 ５ ０ ８ ；． １０ ０ ２江门市 中心 医院 ， 广东 江 门 ５ ９ ３ ； ． ｉ ｌ 医院神经 内科 ， ２ ０ ０ ３深￣ｌ； ：大 ｌ 广东 深圳 ５ ８ ３ ；． １０ ６ ４中山大学附属第二 医院神经 内科 ， 广东 广州 ）
第 ３ ３卷
２１ ０ ２年
・
第 １ 期
１ 月
中山大学学报 （ 医学科学版 ）
Ｊ Ｕ Ｎ ＦＳ Ｎ Ｙ ＴＳ Ｎ Ｕ ＩＥ ＳＴ ＭＥ ＩＡ Ｃ Ｅ Ｃ Ｓ Ｏ Ｒ ＡＬＯ Ｕ Ａ —Ｅ ＮＶ Ｒ ＩＹ（ Ｄ Ｃ ＬＳ ＩＮ Ｅ ）
Ｖｏ ．３ Ｎｏ． １ ３ １
Ｊｎ ２ ２ ａ ． Ｏ１
Ｎ ｕｏｏ ， ｅｏ ｄＡ ｌ ｔ ｏｐｔｌ Ｓ ｎＹ ｔ ｅ ｎｖｒｔ， ｕ ｎｚｏ １ １０ Ｃ ｉａ ｅｒｌｇ Ｓｃｎ ｆ ｉｅ Ｈ ｓｉ ， ｕ ａ Ｓ ｎＵ ｉｅｓｙ Ｇ ａｇｈ ｕ５ ０ ２ ， ｈｎ ） ｙ ｉ ａｄ ａ — ｉ
Ａ ｓ ａｔ【 ｂ ｃｖ】 ｏｉ ｅｉ ｔｔ ｆｃｏ Ｓ ｕ ３（ＩＴ ）ｏ ｙｏｉ ｐ ｃｎｉ ｎ ｇ（ ｙ ） ｉ ｓ ｅｅ ｎｃｅ ｂｔ ｃ： Ｏ ｊ ｔｅ Ｔ ｖ ｔａ ｅｅｅｔｆ ｉ ｉ Ｓ ３ ｎｈｐｘ ｒ ｏｄｉ ｉ Ｈ ｐ ｗｔ ｉ ｇｎ ｏｋｄ ｒ ｅｉ ｎ ｓｇ ｅ ｈ ｆ ｒ ｎ ｔ Ｒ ｃ ｅ ｔ ｎ ｏ ｈｔ ｋ ｄｗ ． Ｍ ｔ ｄ】 Ｅ ｐ ｅｔｓ（Ｇ Ｓ —Ｆ ）ｗｒ ｕ ｄｔ ｓ ｅｔｈ ｕａｌ Ｍ Ｉ Ｇ Ｓ —Ｕ －ＩＴ 一 ｃ ｒ ｗｒ ｕ ｄｉ ｏ ｎ 【 ｅ ｏｓ ｍ ｔ ｖｃ ｒ ｐ Ｃ Ｉ Ｇ Ｐ ｅ ｓ ｅ ｃ ｔ ｓｉｂ Ｏ．ｐ Ｃ Ｉ Ｐ ＲＳＲ ３ ｖ ｔ ｓ ｅ ｓ ｈ ｙ ｏ Ｌ ｅ ｅ ｏ ｌ ｅ ｔ ｅ Ｌ ｅ ｏ ｅ ｅ ｎ