注 :带“3 ”为必需氨基酸 。
213 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉中的游离氨基酸含量
见表 3。
214 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉与陆上动物胶原蛋白的
பைடு நூலகம்
鳞比鱼皮高出近 24%。两者比较的结果说明以鱼鳞 制取的胶原蛋白粉在质量上并不低于鱼皮制取的胶 原蛋白粉 。
表 4 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉与陆上动物 胶原蛋白的氨基酸组成比较
日立 L - 8800氨基酸自动分析仪 , S1C110111 型电 热恒温鼓风干燥箱 , L - D4 - 2 型离心机 , UV - 2100 型 分光光度计等 。
112 分析方法
11211 蛋白质的测定 采用半微量凯氏定氮法 。 11212 氨基酸的测定 样品用 6mo l /L 盐酸 110℃水 解 24h,经脱酸 、过滤处理 ,氨基酸自动分析仪测定 。 11213 游离氨基酸的测定 样品直接加 水超 声溶 解 、过滤 ,氨基酸自动分析仪测定 。 11214 酸溶蛋白质的测定 精确称取样品 110g (精 确至 010001g)加 10mL 15%三氯醋酸溶液摇匀 ,超声 10m in, 4000 r /m in离心 10m in,取上清液 ,用凯氏定氮 法测定酸溶蛋白质含量 。 11215 羟脯氨酸的测定 参照 GB9695123方法 ,样品 采用 0175%氯化亚锡 、6mo l /L 盐酸 5mL 真空封口 , 118 ±2℃水解 24h,用对二甲氨基苯甲醛显色 , 558nm 测定吸收度 。 11216 色氨酸的测定 参照《保健食品化学及其检 测技术 》0125%氢氧化钠溶解 ,对二甲氨基苯甲醛显 色 , 600nm 比色测定 。 11217 多肽的测定 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉经 15% 的三氯醋酸超声溶解处理 ,被酶解的胶原蛋白已成 为肽链或游离氨基酸 ,其分子质量比胶原蛋白的分 子质量要小得多 ,并且易被三氯醋酸溶液溶解 ,而那 些未被酶解的胶原蛋白难溶于三氯醋酸溶液 ,通过 离心胶原蛋白沉淀于底部 ,多肽和游离氨基酸则溶 解在上清液中 ,因此测定上清液中的蛋白质 (又称为 酸溶蛋白 ,由多肽和游离氨基酸组成 )含量以及游离 氨基酸含量 ,就可以计算出鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉中 的多肽含量 。
氨酸 、羟脯氨酸 、丙氨酸明显高于鱼皮胶原蛋白粉 ,
我国是渔业大国 ,随着渔业养殖技术的提高 ,淡
特别是与胶原蛋白功能密切相关的羟脯氨酸含量鱼 水养殖鱼类的产量增加很快 ,鱼类加工将产生大量
2007年第 10期 215
食品工业科技 S cience and Technology of Food Industry
关键词 :纳他霉素 ,酸牛奶 ,反相高效液相色谱法 Ab s tra c t: R P - H PLC m e thod of d e te rm ina tion of na tam yc in in
yog hu rt w a s d e ve lop e d 1The s am p le w a s s ep a ra te d a t room tem p e ra tu re on a O D S - 2 c o lum n ( 250m m × 416m m , 5μm ) e lu te d a t a flow ra te of 110 m L /m in w ith a m ob ile p ha s e of 1L (01053m o l/L NH4 A c + 01025m o l/L N H4 CL ) - A c e ton itrile ( 70 ∶ 30, V /V ) + 5m L Te tra hyd rofu ra n1N a tam yc in w a s d e te c te d a nd q ua n tifie d b y the a b s o rb a nc e a t 302 nm 1Th is m e thod is s im p le , a c c u ra te , h ig h ly sp e c ific a nd re lia b le fo r the d e te rm ina tion of na tam yc in1 Ke y wo rd s: na tam yc in; yog hu rt; R P - H PLC 中图分类号 : TS25217 文献标识码 : A 文 章 编 号 : 1002- 0306 ( 2007) 10- 0216- 03
食品工业科技 S cience and Technology of Food Industry
食品营养
淡水鱼皮鱼鳞胶原蛋白粉的成分比较
周彦钢 ,贾建萍 ,孙丽华 (浙江省医学科学院保健食品研究所 ,浙江杭州 310012)
摘 要 :对淡水鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉的成分进行了分析比较 : 两 者的氨基酸总量 、蛋白质 、酸溶蛋白 、多肽 、游离氨基酸含 量基本接近 ,鱼鳞胶原蛋白粉的羟脯氨酸含量 、矿物质含 量高于鱼皮胶原蛋白粉 。
分析检测
RP - HPLC法测定酸牛奶中纳他霉素含量
姜金斗 ,杨金宝 (国家乳制品质量监督检验中心 ,黑龙江哈尔滨 150086)
摘 要 :目的 :建立测定酸牛奶中纳他霉素含量的反相高效液相色 谱法 。样品用甲醇萃取并沉淀蛋白质后进样 , 用 ODS- 2 (250mm ×416mm , 5μm ) 色谱柱分离 , 流速为 110mL /m in, 流动 相 : 01053mol/L 乙 酸 铵 与 01025mol/L 氯 化 铵 的 缓 冲 液 ∶乙腈为 70∶30 (体积比 ) 1L + 5mL 四氢呋喃 ,紫外检测波 长 302nm , RSD 为 0115% ( n = 10 ) ,标准曲线 r = 019962, 平均回收率分别为 9615% 。结论 : 本法具有操作简单 、快 速测定 、灵敏度高 、专属性好和准确性好等优点 。
胶原蛋白是一种重要的功能性蛋白质 ,它与细 胞增生 、分化 、运动 、免疫 、关节润滑 、伤口愈合等密 切相关 ,已被广泛应用于食品 、保健食品 、化妆品 、医 药等领域 , 市 场需 求量 越来 越大 , 人 们开 始寻 求 安 全 、卫生 、无害的胶原蛋白原料来源 。随着我国水产 养殖业的发展 ,淡水鱼产量的增多 ,人们利用鱼类加 工的下脚料 ,如鱼鳞 、鱼皮等来制取胶原蛋白粉已开 拓了一条新的胶原蛋白原料来源 [1 ] 。浙江湖州珍露 生物制品有限公司利用草鱼 、鲤鱼的鱼皮 、鱼鳞为原 料 ,采用生物酶工程技术分别制成鱼皮胶原蛋白粉 和鱼鳞胶原蛋白粉 ,我们对两者主要成分进行了分 析比较 ,为产品的开发利用提供科学依据 。
丝氨酸 -
010839
甘氨酸 012458 011880
胱氨酸 311710 219804
3 赖氨酸 012865 012371
游离氨基酸总量 713173 619293
注 :带“3 ”为必需氨基酸 。
212 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉的氨基酸组成
见表 2。
表 2 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉的氨基酸组成 ( g /100g)
氨基酸
鱼皮
鱼鳞
天门冬氨酸 丝氨酸 甘氨酸 胱氨酸
3 甲硫氨酸 3 亮氨酸
3 苯丙氨酸 组氨酸 脯氨酸 羟脯氨酸 3 苏氨酸 谷氨酸 丙氨酸 3 缬氨酸
3 异亮氨酸 酪氨酸 赖氨酸 精氨酸 3 色氨酸
氨基酸总量 必需氨基酸
EAA /AA
610771 315120 2019984 013756 113612 311279 118606 018052 1217755 10147 218961 1016797 917767 212994 113015 017522 313001 816512 010418 9015922 1611886 17183%
矿物质 0150 0176
酸溶蛋白 75120 77130
羟脯氨酸 10147 121981
氨基酸总量 90155 92197
表 3 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉中的游离氨基酸含量 ( g/100g)
氨基酸 鱼皮 鱼鳞
谷氨酸 012548 012144
丙氨酸 011019
-
酪氨酸 312573 217250
将鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白与陆生动物胶原蛋白的 组成比较 ,从表 4可见 ,除甘氨酸低于动物胶原蛋白 外 ,其余氨基酸的含量基本接近 ,无明显差异 ,并且 鱼鳞胶原蛋白的羟脯氨酸略高于动物胶原蛋白 。
蛋白质 、多肽 、游离氨基酸三大组分分析的结果
氨基酸组成比较
见表 4。 鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉的组分分析结果显示 ,两 者的组成成分及含量基本一致 ,含有 18 种氨基酸及 7种必需氨基酸 ,色氨基酸含量微乎其微 ,按理论分 析胶原蛋 白不 含有 色氨 酸 , 可能 是实 验 误差 所致 。 氨基酸分析的组成结构显示有着典型的胶原蛋白组
1 材料与方法
111 材料与设备
淡水鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉 分别以草鱼 、鲤鱼的
收稿日期 : 2007- 03- 24 作者简介 :周彦钢 (1955- ) ,男 ,高级实验师 ,从事食品 、保健食品研究
开发工作 。
214 2007年第 10期
鱼皮 、鱼鳞为原料 ,经脱脂 、酶解 、过滤分离 、脱色 、浓 缩 、喷雾干燥等工序制成 ,外观呈白色粉末状 ; L -羟脯 氨酸 、色氨酸 、亚硝酸钠 、氯氨 T、氯化亚锡 、盐酸 、氢氧 化钠 、柠檬酸 、乙酸钠 、正丙醇 、异丙醇 、高氯酸 、对二甲 氨基苯甲醛 、三氯醋酸等 均为分析纯级 。
表明 :鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉主要由这三种结构的成 分组成 ,以多肽类成分为主 ,约占 70% ,此外是少量 的蛋白质和游离氨基酸 ,分别占 16%、7%。因此 ,用 酶法制取的鱼皮 、鱼鳞胶原蛋白粉实际上是以胶原 蛋白肽为主的含有少量胶原蛋白和游离氨基酸的混 合物 ,绝大部分胶原蛋白已在蛋白酶的作用下变成 长短不一的肽段和少量游离氨基酸 。现代生物代谢
成 [2 ] ,以甘氨酸的含量最高 ,约占氨基酸总量的 1 /4, 谷氨酸 、丙氨酸 、脯氨酸次之 ,约占氨基酸总量的 1 /8 ～1 /7,羟脯氨酸约占总量的 1 /8,必需氨基酸占 17% 以上 。值得一提的是鱼鳞胶原蛋白粉的甘氨酸 、脯