《免疫学检验》教学大纲 课程编码：10272042 课程名称：免疫学检验 英文名称：Immunological detection technique 开课学期：7 学时学分：40/2.5 课程类型：专业课 开课专业：预防医学专业 选用教材：《免疫学检验》 人民卫生出版社 2006年8月第一版 主要参考书：1. 《免疫学检验》 吕世静主编 人民卫生出版社 2003年2月第2版 2. 《临床免疫学和免疫检验》 王兰兰主编 2004年1月第3版 3. 《简明免疫学技术》 朱正美主编 科学出版社 2002年7月第1版 4. 《免疫学常用实验技术》柳忠辉主编 科学出版社 执笔人：黎明兰

一、课程性质、目的与任务 免疫学检验是研究免疫学技术在医学领域中应用的一门学科，是预防医学专业（卫生检验方向）一门重要的专业课。免疫学检测技术因其特异性强、敏感性高、稳定、简便和快速的优势，现已广泛应用于生物学、临床医学、预防医学及其他有关领域。 通过对该课程的学习，掌握各类免疫学检验技术的原理、类型、技术要点、实际应用及方法学评价，更好的为防病治病服务。 二、教学基本要求 1. 掌握免疫学检验常用技术的原理、技术要点、应用及方法学评价。 2. 掌握免疫学检验常用技术的测定方法。 3. 掌握免疫学技术在免疫预防计划免疫、动植物检疫、健康相关产品免疫功能评价中的应用。 4. 了解免疫学技术的最新进展及与其他学科的关系。 三、各章节内容及学时分配

第一章 抗原抗体的纯化（2学时） 教学目的与要求 掌握抗原和抗体纯化方法的基本原理、方法评价和应用。了解抗原抗体各种纯化方法的程序及分离物的选择。 教学内容 第一节 盐析法 一、原理 二、常用中性盐 三、操作步骤 四、影响因素 五、方法评价与应用 第二节 凝胶层析法 一、原理 二、常用凝胶的种类和性质 三、操作步骤 四、方法评价与应用 第三节 离子交换层析 一、原理 二、常用离子交换剂的种类和性质 三、离子交换层析的程序 四、方法评价与应用 第四节 亲和层析法 一、原理 二、亲和层析载体与配基的选择 三、层析条件的选择 四、方法评价与应用

考核要求： 了解 蛋白质提纯方法的程序及条件 掌握 蛋白质提纯方法的原理

第二章 免疫原与特异性抗体的制备（2学时） 教学目的及要求： 掌握人工免疫原的制备方法，免疫血清的制备方法，杂交瘤技术的原理及技术要点。了解可溶性抗原的制备方法及单克隆抗体制备流程及应用。 教学内容： 第一节 免疫原的制备 一、颗粒性抗原的制备 二、可溶性抗原的制备 三、人工免疫原的制备及佐剂 第二节 免疫血清的制备 一、免疫动物的选择 二、确定免疫方案 三、动物采血法 四、免疫血清的分离与保存 第三节 单克隆抗体的制备 一、杂交瘤技术的基本原理 二、单克隆抗体的制备要求 三、单克隆抗体的应用

考核要求： 了解：1.颗粒性抗原、可溶性抗原的制备方法 2.单克隆抗体的制备流程 掌握：1.人工免疫原的制备 2.免疫血清的制备方法 第三章 沉淀反应与凝集反应（2学时） 教学目的及要求： 掌握常用沉淀反应和凝集反应的原理及应用。了解其他凝集技术类型、原理和应用。 教学内容： 第一节 沉淀反应 一、免疫浓度测定 二、双向琼脂扩散试验 三、免疫电泳技术 第二节 凝集反应 一、直接凝集反应 二、间接凝集反应 三、其他凝集技术

考核要求： 了解：免疫浓度测定，其他凝集技术的原理及应用。 掌握：双向琼脂扩散试验、双 免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接血凝试验的原理及应用。

第四章 溶血反应和补体结合试验 教学目的与要求： 掌握溶血反应体系及检测方法。了解补体结合试验的原理、类型、方法和评价。 教学内容： 第一节 溶血反应 一、溶血反应的检测试验 二、血清总补体溶血（CH50）测定。 第二节 补体结合试验 一、 类型与原理 二、 试验方法及影响因素 三、 方法的评价和应用

考核要求： 了解： 补体结合试验的类型、原理、方法评价及应用。 掌握：血清总补体溶血（CH50）测定。

第五章 酶免疫技术（2学时） 教学目的及要求： 掌握固相酶免疫测定的方法类型及原理，ELISA技术要点，了解其他酶免疫技术及应用。 教学内容： 第一节 酶免疫技术的分类 第二节 固相酶免疫测定 一、基本原理 二、方法类型和操作步骤 第三节 ELISA技术要点 一、试剂准备 二、酶标记方法 三、酶标记物的纯化与鉴定 四、最适工作浓度的选择 第四节 其他酶免疫技术 一、斑点-酶联免疫吸附试验 二、斑点酶免疫渗滤试验 三、免疫印记法

考核要求： 了解：其他酶免疫技术的原理及应用 掌握：1.双抗体夹心法和间接法的原理 2.ELISA法的技术要点

第六章 荧光免疫技术（1学时） 教学目的及要求： 掌握荧光抗体技术的原理、技术方法及应用。了解荧光抗体的制备方法及荧光免疫显微技术。 教学内容： 第一节 荧光现象 第二节 荧光抗体技术 一、基本原理 二、荧光抗体技术方法 三、荧光抗体的制备 四、荧光免疫显微技术 五、应用

考核要求： 了解：荧光抗体的制备及荧光免疫显微技术 掌握：荧光抗体技术的基本原理及技术方法。

第七章 放射免疫技术（1学时） 教学目的与要求： 掌握放射免疫测定的原理、方法、评价及应用。了解免疫放射测定试验。 教学内容： 第一节 放射免疫测定 一、原理 二、测定方法 三、方法评价 四、应用 第二节 免疫放射测定 一、原理 二、技术类型 三、技术要点

考核要点： 了解：免疫放射测定的原理、技术类型及技术要点。 掌握：放射免疫测定的原理、测定方法及应用。

第八章 金免疫技术（2学时） 教学目的及要求： 掌握金免疫测定技术的原理、技术类型及应用。了解胶体金和免疫金的特性与制备。了解金免疫组化技术的方法。 教学内容： 第一节 胶体金与免疫金的制备 一、胶体金的特性及其制备 二、免疫金的特性及其制备 第二节 金免疫测定技术 一、斑点金免疫渗滤试验 二、斑点金免疫层析试验 第三节 金免疫组织化学技术 一、免疫金光镜染色技术 二、免疫金电镜染色技术

考核要求： 了解：1.胶体金、免疫金的特性及制备方法。 2.免疫金（银）光镜染色技术的原理及方法。 掌握：斑点金免疫渗滤试验与斑点金免疫层析试验的原理、技术类型及方法。

第九章免疫细胞检测技术（3学时） 教学目的与要求： 掌握免疫细胞分离纯化技术及评价免疫功能的相关试验原理、方法、结果判定。

教学内容： 第一节 免疫细胞的分离与纯化 一、血液标本的采集 二、外周血液中白细胞的分离 三、外周血液中单个核细胞的分离 四、淋巴细胞及其亚群的分离纯化 五、吞噬细胞的分离 六、淋巴细胞的保存及活力测定。 第二节 T淋巴细胞的检测 一、 T淋巴细胞表面标志的检测 二、 T淋巴细胞受体的检测 三、 T淋巴细胞功能的检测 第三节 B淋巴细胞的检测 一、 B淋巴细胞表面抗原的检测 二、 B淋巴细胞表面受体的检测 三、 B淋巴细胞功能的体外检测 第四节 自然杀伤细胞的检测 一、 概述 二、 NK细胞活性检测 三、 测定NK细胞活性的卫生学意义 第五节 吞噬细胞功能的检测 一、 巨噬细胞吞噬功能的检测 二、 巨噬细胞吞噬功能检测的卫生学意义

考核要求： 了解：1.了解T淋巴细胞表面标志的检测方法及卫生学意义的评价。 2.了解T淋巴细胞E受体和IL-2受体的检测方法。 3.了解B淋巴细胞Sm2g受体及Fc受体的检测方法。 掌握：1.外周血液中单个核细胞、淋巴细胞及亚群分离纯化方法，淋巴细胞保存及活力测定方法。 2.T淋巴细胞功能检测方法。 3.B淋巴细胞功能检测的体外实验 。 4. NK细胞活性检测方法及卫生学意义。 5. 噬细胞功能的检测方法及卫生学意义。

第十章免疫球蛋白测定（1学时） 教学目的及要求： 掌握免疫球蛋白定量测定的方法参考值及应用评价。了解免疫球蛋白定量的医学意义。 教学内容： 第一节 免疫球蛋白定量的检测方法 一、常用检测方法。 二、参考值 第二节 免疫球蛋白定量检测方法学评价及应用 第三节 免疫球蛋白定量临床意义 一、血清Ig定量临床意义。 二、尿微量Ig定量临床意义。 三、脑脊液Ig定量临床意义。

考核要求： 了解：血清Ig、尿微量Ig、脑脊液Ig定量检测的临床意义。