桦褐孔菌多糖提取工艺
桦褐孔菌多糖提取工艺 桦褐孔菌是一种生活在寒带的木腐菌,
引起白桦、银桦、榆树、赤杨的白腐,桦褐孔菌菌丝能耐-40。C的低
温,是极耐寒的种类。是一种民间要用真菌。主要分布在北半球 北
纬45~50。C的地区,俄罗斯、中国黑龙江、吉林省长白山均有发现。
桦褐孔菌(lnonotusobliquus)是90年代新兴的一种食药兼用菌,富
含多种生物活性成份。目前,国外关于桦褐孔菌多糖免疫活性的研究
不多,而国内尚未见这方面的报道。本文以桦褐孔菌子实体为材料提
取粗多糖,研究不同因素对多糖浸提的得率和纯度的影响,最终通过
正交确定了最佳多糖提取条件。
1.材料与方法: 1.1供试材料: 野生桦褐孔菌菌核;95%乙
醇;无水乙醇;丙醇;浓硫酸; 6%苯酚;葡萄糖
1.2主要仪器: UV-1800紫外分光光度计;真空干燥箱;高速水
平离心机;恒温水浴锅;索氏提取器;分析天平;烧杯;移液管
1.3试验方法:
1.3.1桦褐孔菌脱脂 取桦褐孔菌200g,将其放入索氏提取器中,
加入300ml石油醚,对其今天脱脂,时间为2h
1.3.2 热水浸提发 取脱脂后的桦褐孔菌15g,将其分为三组,
分别加入100ml、150ml、200ml的蒸馏水,放于90℃的恒温水浴锅
中用热水抽提3次,每次2h,过滤,合并3次滤液减压浓缩,浓缩
至原体积的1/10。再加入3倍量的95%的乙醇溶液,置于4℃冰箱中
静置24h,4000r/min离心5min,弃上清,取沉淀。依次用无水乙醇、
无水乙醚进行洗涤,再次离心,将沉淀放入干燥器中进行干燥,称重,
用标准曲线计算粗糖含量.
1.3.3碱液提取法 取热水浸提后的桦褐孔菌2g,加入15-30倍量
的水,在一定温度下提取2-6h,离心,收集上清液,用1mol/L HCL
中和提取液,适当浓缩,加入约4倍浓缩体积的95%乙醇,0℃静置
过夜,过滤、沉淀物放入60℃的烘箱得到碱提桦褐孔菌多糖.
1.3.4 标准曲线的绘制 配制0.1mol/ml的葡萄糖溶液,取10支事
关,加入一定量梯度的葡萄糖溶液,加入2.5ml浓硫酸,使其生成糖
醛,然后加入苯酚生成橙黄色化合物,用分光光度计绘制曲线.