“高温条件下不同日粮对肉牛养分消化代谢的影响”
研究方案
实验目的：研究在高温条件下不同日粮配方对锦江黄牛养分消化代谢的影响。
试验方法：
1、材料与方法
1.1 实验动物及分组设计10头12月龄，300kg左右的锦江黄牛，按体重、年龄等相似的原则分成两个组别，分别为日粮1组，日粮2组，每组5头。
1.2 试验时间及地点
本实验于2011年8月11日-2010年8月18日在江西省高安裕丰农牧有限公司完成，其中分预试期4天，正式期4天。
1.3消化代谢试验
全收粪法、全收尿法。
收集各组实验牛连续4天的粪便，各组选取3头收集连续4天的尿液。
1.3.1 饲料的采集与制备
在试验期间随机五次采集试验用的6种混合精料各200 g，每组的混在一起各1000g，带回实验室用烘箱65摄氏度烘干，制成半干样品，经40目粉碎后努封保存。
在试验过程中试验牛吃的每批稻草采集干草500 g，带回实验室用烘箱65摄氏度烘干，制成半干样品，经40目粉碎后努封保存。
在正试期的每天早上分别收集各试验牛的全部剩料，称重后放入已编号样品袋中，阴干后常温保存，其余步骤同上。
1.3.2粪尿的采集与制备
粪样的收集：每头牛每天24小时的粪样随时收集（每天收集的时间段为早上晨饲时到第二天晨饲前止），每次收集的粪便放入各自编好号的塑料桶中并及时盖好桶盖，防止混入其它杂物。
尿样的收集：收集尿液用中国农大莫放团队改进发明的收尿装置进行收集，每头牛每天24小时的尿样全部收集（每天收集的时间段为早上晨饲时到翌日晨饲前止），尿样通过集尿袋全部用导管导入集尿壶中。
粪样的保存与制备：消化代谢试验的每头牛每天收集的全部粪便称总重并做好记录，称重完之后把粪便拌均匀。
取50g入装一斤蜂蜜的广口塑料瓶中，加入浓度为10%的H2SO425ml，固定鲜粪中的氮，4。
C下保存；取250g，晒干，回潮，待实验结束后带回实验室后烘箱65。
C烘干，测定初水分，制成风干粪样，把同一头牛4天粪样在粉碎机中粉碎拌均匀，以备分析。
尿样的保存与制备：尿液准确称量记录，并用量筒准确测定其体积。
用6~8层粗纱布过滤，量取每头牛每天排尿总量的1/10左右置于矿泉水瓶中，按每100ml 尿液加入10%的H2SO410ml，瓶口用2到3层塑料薄膜包好，再拧紧瓶盖，达到密
闭的效果，置于-20。
C下保存。
待实验结束后，带回实验室测定尿中营养物质含量。
（然后搅拌均匀，取总尿量的1%作为尿样，放入瓶中，加入一定量的硫酸固氮和防腐，放入冰箱内保存。
实验结束，将试验期内的尿样常温下解冻、混匀后取样测定尿中的氮、能量、钙磷等含量。
）
1.4测定的指标与方法
1.4.1 牛舍环境温湿度记录
试验期间在试验牛群的中间和两端与牛体等高处(距地面约1.5 m)挂温湿度表，记录07:00、14:00及20:00的温度和相对湿度。
根据Drackley等方法计算牛舍环境温湿指数(temperature humidity index, THI)，THI=td-(0.55-0.55RH )× (td-58)，其中td为华氏温度，RH为相对湿度(td=T*9/5+32)。
当牛舍THI<72时表示无热应激；72≤THI≤79时为轻度热应激；79<THI≤88时为高度热应激；THI>88时为重度热应激。
1.4.2饲料及粪样的常规指标检测与方法：
干物质（DM）、CP、有机物（OM）、ADF、NDF、NFE根据杨胜（1993）描述的方法测定。
尿中总氮量得测定，吸取3 ml尿液样注入凯氏烧瓶中，加入10 ml浓硫酸和2 ml10%的硫酸铜溶液，烧灼混合液，直至液体呈淡蓝色或无色，而后继续烧灼约1h，冷却，其它步骤同初蛋白的测定。
饲养样品、粪样以风干物形式采用全自动氧氮侧热议进行测定总能、粪能，尿样取10 ml与以知能值的塑料袋50。
C烘干后再测。
部分指标的计算方法
养分表观代谢率=（饲料中某养分含量-粪尿中某养分含量）/饲料中某养分含量食入总能(MJ/d)=试验牛每日饲喂总能量—剩料总能量
消化能(MJ/d)=食入总能—粪能
代谢能(MJ/d)=食入总能—粪能—尿能—甲烷能
总能消化率(%)=(消化能/食入总能)*100
总能代谢率(%)=(代谢能/食入总能) *100
消化能代谢率(%)=(代谢能/消化能) *100
进食氮(g)=食入氮=(试验牛每日饲喂总蛋白—剩料总蛋白)/6.25
可消化氮(g)=食入氮—粪氮
沉积氮(g)=消化氮—尿氮
氮表观消化率(%)=(可消化氮/进食氮) *100
试验准备材料：
1、10%的H2SO4 10L，买个10L的油壶。
（2瓶就可以了）
2、一斤蜂蜜的广口塑料瓶10个。
3、塑料桶10个，装粪便的放在垃圾桶的垃圾袋80个；牢固的垃圾袋60个；封口袋装大号的一袋。
4、20L油壶8个。
5、温度湿度计1个。
6、台秤两个，一个称料，一个称粪便。
（实验室借）10kg和5kg，精确到g。
7、自行车轮胎8个。
8、大注射器10个。
9、浓硫酸2瓶。
10、矿泉水瓶24个
11、油性MARK三支笔，标签纸10张.
尿的处理采用导尿管收集尿液，即全收尿法。
每日9时左右将一天内收集的尿准确称重并记录。
然后搅拌均匀，取总尿量的1%左右作为尿样，放入瓶中，加入一定量的硫酸固氮和防腐，放入冰箱内保存。
实验结束，将试验期内的尿样常温下解冻、混匀后取样测定尿中的氮、能量、钙磷含量。