（３）调节培养基的酸碱性至pH5.8
由于培养基的pH值直接影响到培养物对离 子的吸收，因而过酸或过碱都对植物材料 的生长有很大影响。此外，琼脂培养基的 pH值还影响到凝固情况。所以，当培养基 配制好后应立即进行pH值的调整。最好用 酸度计测试，既快又准，如无条件也可用 精密pH试纸。培养基若偏酸时用lmol· L-1 NaOH来调节，偏碱则可用lmol· L-1 HCl来 调节。一般来说，当pH值高于6.0时，培 养基将会变硬；pH值低于5.0时，琼脂不能 很好地凝固。
（４）培养基的分装
配制好的培养基要趁培养容器加注量占其容积 的1/4～1/3为宜，果酱瓶每瓶20～30ml， 太多既浪费培养基，又减少了培养材料的 生长空间；太少又会因营养不良影响生长。 培养基分装完后，用封口膜封严瓶口，并 用橡皮筋扎紧。
5 马铃薯试管苗快速繁殖培养基 的配方设计及配制体积
培养基配方设计：（1）根据培养的目的选 择一种培养基为基本培养基。（2）确定培 养基中各种激素的浓度及相对比例 配方： MS基本培养基＋0.7％琼脂＋3％蔗 糖 配制体积：每小组配制0.5L
6 马铃薯试管苗快速繁殖 培养基的配制流程
6.2 培养基的配制步骤
（１）根据需要配制的培养基的量称好所 需的琼脂（0.７～0.８％），撕碎后放入 医用口杯中，加入适量的蒸馏水（估计加 入母液后不超过配制总量）置于电磁炉上 加热溶解，边加热边用玻棒搅动。
（２）待琼脂完全溶解后，加入规定用量 的母液（可事先取好放于一烧杯中），再 加入规定用量的蔗糖，继续加温并不断搅 拌，待琼脂煮透后端离火源，根据培养基 配方及培养基体积加入所需要的生长调节 物质，最后加蒸馏水至所需体积。
3 主要实验用具和仪器
冰箱、普通天平、三角瓶、果酱瓶、移液 管、量筒、烧杯、容量瓶、玻璃棒、医用 口杯、精密pH试纸（pH5.4~7.0）、药勺、 称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、棉线、 电炉、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉等。
4 药品和试剂
MS培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调 节物质、蒸馏水、1mol· L-1HCl、 1mol· L-1NaOH
6 接种工具准备
分别取枪状镊子2把、眼科手术剪和手术刀 各1把，用牛皮纸和橡皮圈包扎成一套；每 套培养皿内放入合适滤纸2～3张，用牛皮 纸和橡皮圈包扎成一套；然后和培养基一 起统一灭菌。
作业
详细写出马铃薯试管苗快速繁殖培养 基配制的流程及在培养基配制的各环 节应注意的事项。
6.1 药品及用具的准备 6.1.1 MS培养基母液的准备
配制培养基时先将事先配制贮存的母液按 顺序放好，并检查这些母液是否已变色或 产生沉淀或产生结晶，已失效的就不要取 用。 MS培养基母液包括大量元素母液、 微量元素母液、铁盐母液、有机物母液。
6.1.2 用具用品的准备
将洁净的各种用具如三角瓶、果酱瓶、量 筒、烧杯、吸管、玻璃棒、医用口杯、精 密pH试纸、封口膜、橡皮筋、电炉等准备 好放在指定的位置。再将蒸馏水、琼脂、 蔗糖、生长调节物质、1mol· L-1NaOH、 1mol· L-1HCl准备好。
培养基灭菌注意的问题：
（1）灭菌前检查锅内是否有足够的水；
（2）装锅不可过满； （3）培养基消毒灭菌时间不宜过长，也不 可超过灭菌锅规定的压力范围；否则，培 养基中的蔗糖、有机物质，特别是维生素 类物质就会分解，导致培养基变质、变色， 甚至难以凝固。
培养基灭菌注意的问题：
（4）当灭菌完成后，应切断电源或热源， 待灭菌锅内气压接近“0”时，方可打开放 气阀，拧开灭菌锅盖取出培养基。切勿为 急于取出培养基而打开放气阀放气，否则 锅内气压下降太快会引起减压沸腾，导致 灭菌锅内各容器中的培养基溢出，造成浪 费或污染，甚至烫伤工作人员。
实验1-2 马铃薯试管苗快速 繁殖培养基的配制
1 实验目的
通过本次实验，使学生掌握配制培养基的 步骤，能熟练准确配制培养基，并能根据 实验目的设计适合的培养基配方。
2 实验原理
将事先配制好的培养基母液按一定比例稀 释至浓度为培养基中规定的使用浓度，再 加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等，制备 成符合要求的培养基。
（５）培养基的灭菌
培养基分装后应立即置于高压蒸气灭菌锅内 进行灭菌。消毒灭菌时，压力表读数约为 1.06kgf·cm-2或0.105 MPa （可在 0.105 ～ 0.12MPa间，但不得超过0.14 MPa），温度121℃时保持15～30 min左右即 可。
（５）培养基的灭菌
为了保证灭菌彻底，在蒸气灭菌锅增压前应 先将灭菌锅内的冷空气放尽。排净冷空气的 办法有两种： （1）可以事前打开灭菌锅放气阀，煮沸， 待大量热蒸气排出后再关闭； （2）也可采用先关闭放气阀，待压力升到 约0.04 MPa，温度超过108℃时打开放气阀 排出空气，待压力表指针回到0时再关闭放 气阀。