远志对糖尿病周围神经病变大鼠尾部感觉神经传导速度和坐骨神经

醛糖还原酶活性的影响

赵晓丽马洪伟1陈志宏1（承德医学院附属医院神经内科，河北承德067000）

〔摘要〕目的观察远志对糖尿病周围神经病变（DPN）大鼠尾部感觉神经传导速度（SNCV）和坐骨神经醛糖还原酶（AR）活性的作用。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为3组（n=12）：正常对照组、DPN模型组和远志治疗组，DPN模型组和远志治疗组大鼠均采用腹腔注射链脲佐菌

素的方法建立DPN模型，以尾部SNCV＜30m/s作为DPN成模标准；待DPN模型成功建立后，DPN模型组大鼠不再做任何处理，远志治疗组大鼠给

予远志（2.7g生药/kg/d）灌胃6w。分别检测各组大鼠血糖、尾部SNCV和坐骨神经AR活性。结果与正常对照组大鼠比较，DPN模型大鼠的血

糖、坐骨神经AR活性明显升高，尾部SNCV明显降低（P＜0.01）；与DPN模型组大鼠比较，远志治疗组大鼠的血糖、坐骨神经AR活性明显降低，尾

部SNCV明显升高（P＜0.01）。结论远志可明显降低DPN大鼠坐骨神经AR活性、逆转DPN大鼠尾部SNCV减慢，对DPN时周围神经损伤具有明

显的改善作用。

〔关键词〕远志；糖尿病周围神经病变；坐骨神经；感觉神经传导速度；醛糖还原酶〔中图分类号〕R587.2〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2012）21-4683-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.21.035

EffectsofPolygalaonCaudalsensenerveconductionvelocityandaldosereductaseactivityofsciaticnerveofDPNratsZHAOXiao-Li，MAHong-Wei，CHENZhi-Hong.DepartmentofNeurology，theAffiliatedHospitalofChengdeMedicalCollege，Chengde067000，Hebei，China

【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofPolygalaoncaudalsensenerveconductionvelocity（SNCV）andaldosereductase（AR）activityofsciaticnerveofdiabeticperipheralneuropathy（DPN）rats.Methods36maleWistarratswererandomlydividedinto3groupswith12ratsineachgroup：normal，DPNmodelandPolygalatreatmentgroups.TheratsinDPNmodelandPolygalatreatmentgroupswereestablishedDPNanimalmodelbyintraperitonealinjectionofstreptozotocin，andSNCV＜30m/swastakenasstandard.AftertheDPNratsmodelweresuccessfullyestablished，theratsinDPNmodelgroupwerenotgivenmorehandling，theratsinPolygalatreatmentgroupwerelavagedwithPolygala（2.7g·kg－1·d－1）for6weeks.Thebloodglucose，caudalSNCVandARactivityofsciaticnerveofratsineachgroupwererespectivelydetected.ResultsComparedwithratsinnormalcontrolgroup，thebloodglucoseandARactivityofsciaticnerveofratsinDPNmodelgroupwereincreasedobviously，caudalSNCVdecreasedobviously（P＜0.01）.ComparedwithratsinDPNmod-elgroup，thebloodglucoseandARactivityofsciaticnerveofratsinPolygalatreatmentgroupweredecreasedobviously，caudalSNCVin-creasedobviously（P＜0.01）.ConclusionsPolygalacanobviouslydecreasetheARactivityofsciaticnerveofDPNratsandpreventde-scendingofcaudalSNCVofDPNrats.SoPolygalacouldimproveperipheralnerveinjuryapparentlyduringDPN.【Keywords】Polygala；Peripheralnerveinjury；Sciaticnerve；Sensenerveconductionvelocity；Aldosereductase

基金项目：河北省教育厅项目（2008407；2009404）

1承德医学院人体解剖学教研室

通讯作者：陈志宏（1971-），女，博士，教授，硕士生导师，主要从事解剖

学研究。

第一作者：赵晓丽（1964-），女，副主任护师，主要从事神经电生理学

研究。糖尿病周围神经病变（DPN）是糖尿病最常见的慢性并发

症之一，发病率高达47%～91%〔1〕。DPN可累及感觉神经、运

动神经和自主神经，但以感觉神经最为常见〔2〕。虽然治疗DPN

的药物种类繁多，但目前尚无确切有效的治疗药物，通常在控

制饮食、应用降糖药的基础上对症治疗。部分患者严格控制血

糖并不能使神经功能完全改善，且短期内控制血糖与改善DPN

临床症状并不平行；同时，降糖药物在降低血糖的同时会产生

较多的毒副作用〔3，4〕。为此，本研究观察了中药远志对DPN大

鼠尾部感觉神经传导速度（SNCV）和坐骨神经醛糖还原酶

（AR）活性的影响，为临床探寻有效、且毒副作用小的治疗DPN

的药物提供实验基础。1材料与方法

1.1试剂与药品远志水煎液，中药远志（Polygala）浸泡、水

煎、浓缩获得，生药1g/ml。链脲佐菌素（STZ），美国Sigma公

司；血糖检测试剂盒，保定长城临床试剂有限公司（批号：

20090511）；BCA蛋白定量试剂盒，北京索莱宝生物科技有限

公司。

1.2实验动物分组成年雄性Wistar大鼠36只，体重180～

220g，购自河北医科大学实验动物中心（合格证号：905075）。

大鼠随机分为3组（n=12）：正常对照组、DPN模型组和远志治

疗组。正常对照组大鼠常规饲养，不做任何处理。DPN模型组

和远志治疗组大鼠连续腹腔注射2%STZ（25mg/kg，3d），1w

后以血糖≥16.7mmol/L作为糖尿病成模标准。成功建立糖尿

病模型后，DPN模型组和远志治疗组大鼠继续饲养6w，以大鼠

尾部SNCV＜30m/s作为DPN成模标准；成功建立DPN大鼠

模型后，DPN模型组大鼠不再做任何处理，远志治疗组大鼠给

予远志（2.7g生药·kg－1·d－1）灌胃6w。

1.3检测血糖各组大鼠用药结束后禁食12h以上，4%水

合氯醛腹腔注射麻醉，经内眦于眶后静脉丛采血，离心后收集血清，采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。

1.4检测大鼠尾部SNCV大鼠俯卧位固定，分别用温水、

75%乙醇清洁大鼠尾部皮肤，电极放置方式为一对刺激电极

（负极位于正极近心侧）插入大鼠尾部皮下，然后依次插入记录

电极Ⅰ和记录电极Ⅱ，记录电极Ⅰ在刺激电极负极近心侧3cm

处，记录电极Ⅱ在记录电极Ⅰ近心侧4cm处，再将参考电极

Ⅰ、Ⅱ分别插入距记录电极Ⅰ、Ⅱ近心侧0.5cm处皮下，最后

将接地电极插入刺激电极负极与记录电极Ⅰ之间。采用

RM6240C型多道生理信号处理系统测定各组大鼠尾部SNCV，

重复刺激3次，间隔30s，取平均值。尾部SNCV（m/s）=两记

录电极之间的距离/动作电位潜伏期时间差。

1.5测定坐骨神经AR活性大鼠断头处死，迅速分离双侧

坐骨神经（膝关节上方坐骨神经干，约4cm），入液氮保存。参

照文献的方法检测坐骨神经AR活性。

1.6统计分析数据以x±s表示，应用SPSS11.5软件，组间

比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验。

2结果

2.1各组大鼠血糖水平各组大鼠血糖DPN模型组大鼠的

血糖明显高于正常对照组（P＜0.01）；远志治疗组大鼠的血糖

明显低于模型组（P＜0.01）。见表1。

2.2各组大鼠尾部SNCV与正常对照组大鼠比较，DPN模

型组大鼠尾部SNCV明显降低（P＜0.01）；与模型组大鼠比较，

远志治疗组大鼠尾部SNCV明显升高（P＜0.01）。见表1。

2.3各组大鼠坐骨神经AR活性与正常对照组大鼠比较，

DPN模型组大鼠坐骨神经AR活性明显升高（P＜0.01）；与模

型组大鼠比较，远志治疗组大鼠坐骨神经AR活性明显降低

（P＜0.01）。见表1。

表1各组大鼠血糖、尾部SNCV和坐骨神经

AR活性（x±s，n=12）

组别血糖（mmol/L）SNCV（m/s）AR（U/mg）

正常对照组7.53±1.311）36.57±2.081）0.2645±0.19131）DPN模型组25.40±4.2227.45±1.161.0695±0.1811远志治疗组17.20±4.561）33.20±1.091）0.6266±0.16331）

与DPN模型组比较：1）P＜0.01

3讨论

随着糖尿病发病率的逐年上升，建立理想的动物模型对于

深入研究DPN具有十分重要的意义。目前尚无理想的DPN动

物模型，研究DPN主要采用糖尿病动物模型。已有实验证实，

糖尿病大鼠成模后1～2个月就可观察到与人类DPN相似的改

变〔5，6〕。神经传导速度减慢是糖尿病出现神经病变的一个敏感

指标，也是研究实验性DPN最常用的指标。DPN时，一般感觉

神经较运动神经先受累，因此SNCV减慢可作为DPN早期诊断

的指标〔7〕。有临床资料显示〔8〕，部分糖尿病患者虽然未出现

DPN的临床表现，但电生理检查就可发现神经传导速度减慢。

DPN与胰岛素分泌不足及糖代谢紊乱密切相关，一般认为

高血糖是DPN发病的首发因素，而葡萄糖多元醇代谢通路紊乱是DPN发生的重要发病机制之一。多元醇代谢通路有两个

关键酶，即AR和山梨醇脱氢酶，AR催化葡萄糖转化成山梨

醇，山梨醇脱氢酶催化山梨醇转化为果糖。糖尿病时，长期高

血糖状态可使葡萄糖多元醇代谢通路紊乱，导致AR活性增

强，致使神经细胞内山梨醇和果糖大量蓄积，继而引起神经细

胞渗透压增高，Na+-K+-ATP酶活性下降，导致细胞肿胀、变

性，生理功能受损，轴索萎缩，神经纤维节段性脱髓鞘〔9〕。另

外，AR过度活化导致其辅助因子NADPH大量消耗，从而抑制

谷胱甘肽的产生，使细胞对自由基的易感性增加，导致周围神

经氧化应激〔10〕；进而，导致神经纤维神经营养因子表达减少，

影响轴浆运输，导致神经病变〔11〕。有研究证实，不论是在体动

物实验还是体外细胞培养，AR抑制剂不仅可以延缓SNCV的