・４２・　中国奶牛・２０１０年第３期　牛巴氏杆菌病的诊断及治疗试验　庞天津，邹明，刘焕奇，毕可东　（青岛农业大学动物科技学院，青岛　２６６１０９）　中图分类号：￥８５８．２３文献标识码：Ａ文章编号：１００４—４２６４（２０１０）０３—００４２—０２　摘要：２００９年４月及６月间，荣成市某肉牛场８月龄左右的育肥牛先后两次爆发疫病，均发生在新购买牛后不久。　在流行病学调查的基础上，对采集的病料进行病原分离鉴定，并对病原进行了药敏试验。结果表明，该牛场发病是由　长途运输应激引起，病原分别为多杀性巴氏杆菌和产气巴氏杆菌，此类菌对头孢菌素和土霉素较为敏感，经治疗，　该牛场病情得到控制。　关键词：牛巴氏杆菌；诊断；治疗　

牛巴氏杆菌病是由巴氏杆菌引起牛的一种急性、　热性传染病，主要经消化道传染．其次为呼吸道或伤口　传染　。本病一般呈散发性流行，通常是突然发病，发生　高热和肺炎．有时表现水肿病变．各脏器出血等　。　２００９年４月及６月间．荣成市某肉牛场１００余头８　月龄左右的育肥牛先后两次爆发此病　４月初从莱州购　进４８头，４月中旬开始陆续发病、死亡，截止４月２５日　几乎全群发病，死亡６头，病死率为１２．５％，遂采集病料　进行病原菌分离鉴定及药敏试验　６月初从东北又购进　６Ｏ头．６月中旬发现部分牛开始出现和上批牛相同的症　状．截止６月２２日，１００头育肥牛（中间因病情严重淘汰　２头）中有８０多头发病，死亡３头。经筛选敏感药物．合　理选择用药．该牛场的病情控制得到及时有效控制。　１试验材料与仪器　１．１试验材料　采集该牛场粪便、血液，并取病死牛肺、淋巴结、脾脏　等病变脏器。　１．２主要试剂及培养基　三糖铁琼脂培养基、革兰氏染液、麦康凯琼脂培　养基、营养肉汤、尿素酶培养基、营养琼脂及微量糖发　酵管等　１．３试验仪器　座式自动电热压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器　械厂）。电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限　公司），电热恒温培养箱（上海森信实验仪器有限公司），　超净工作台（安泰公司制造）。　收稿日期：２００９—０８—２６　作者简介：庞天津（１９８４一），男，安徽宿州人，硕士研究生，主要从事奶牛疾　病的研究。　通讯作者：毕可东（１９５７一），男，山东文登人，教授，硕士研究生导师，主要　从事小动物疾病和奶牛主要疾病的防治技术研究。　１．４抗茵药物纸片　青霉素、土霉素、庆大霉素、金霉素、链霉素及头孢　菌素药敏纸片　２试验方法　２．１　临床症状和病理观察　２．１．１临床症状观察　观察病牛精神状态、体表特征、粪便颜色和质地、　尿液颜色以及检测体温、呼吸数和心率等临床特征。并询　问养殖场技术人员病死牛的病程变化情况　２．１．２病理剖检观察　对病死牛进行剖检，观察其可视粘膜、胃肠道、脾脏、　肺脏、血液等病变情况。　２．２细菌的分离纯化和镜检　２．２．１病原菌分离纯化　

．将病料无菌接种于血琼脂培养基上．于３７℃恒温培　养箱中培养２４ｈ．观察细菌生长情况、菌落特征。然后挑　取可疑菌落再接种于血琼脂培养基上进行纯化．将纯　培养细菌接种于麦康凯培养基上．３７℃恒温培养２４ｈ．　观察记录其生长情况。　２．２．２镜检　挑取可疑菌落，革兰氏染色、镜检。　２＿３　细菌的生化鉴定　２＿３．１糖发酵　将待检菌株分别接种在蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、　甘露醇、尿素、枸橼酸微量发酵生化管中，于３７℃恒温　培养４８ｈ．观察记录结果。　２．３．２尿素酶试验　将待检菌种做穿刺划线．接种于尿素酶斜面培养　基中，３７ｑＣ恒温培养２４ｈ，观察记录结果。若培养基由黄　色变为红色则为阳性，否则为阴性。　中国奶牛・２０１０年第３期　・４３・　２－３．３　三糖铁试验　将待检细菌穿刺接种于三糖铁（ＴＳＩ）琼脂中，３７ｏ【＝　恒温培养２４ｈ。观察记录结果。　２．４药敏试验　２．４．１菌液的制备　挑取血琼脂培养基上的３～５个菌落，加入无菌的　盛有２￣３ｍＬ营养肉汤的离心管中。３７℃恒温培养１２ｈ，　备用　２．４．２药敏试验　参照有关资料介绍方法进行同。取上述菌液０．１ｍＬ　于血琼脂平板上，涂匀，室温干燥５ｍｉｎ，将药敏纸片置　于培养基表面。３７℃恒温培养１２ｈ，观察记录结果。　２．５药物治疗试验　根据药敏试验结果对牛群进行药物治疗．并记录治　疗效果　３结果　３．１临床症状　患牛突然发病，体温升高，达４１～４２℃，精神沉郁，　食欲、饮欲不振，反刍次数减少；鼻镜干燥，呼吸困难，　由鼻孔流出大量粘性液体；有的带有血色，粪便成稀糊　状并混有血液。有的粪便排泄物中带有大块坏死脱落的　肠粘膜。病牛努责频繁，有里急后重的表现。有的病牛　眼睛红肿、流泪，酷似感冒，当地兽医按感冒和肠炎进　行治疗近一周，结果不但没有抑制病情发展，反而出现　死亡病例增多的现象。　３．２病理剖检　病死牛剖检发现．全身淋巴结肿大、出血．气管内　有大量泡沫样粘液，肺脏充血、出血、瘀血，呈大理石样，　胸腔和心包积液；肝脏肿大，胆汁潴留，呈墨绿色；大网　膜和肠系膜上有大面积弥漫性点状、片状出血，真胃和　十二指肠粘膜水肿、增厚、出血，结肠呈紫红色，有的发　生坏死　３．３细菌分离结果　３．３．１细菌分离　从所采集病料中共分离出３株巴氏杆菌．从淋巴结　中分离到的菌株定为ｌ号菌．从粪便中分离到的菌株定　位为２号菌，从肺分离到的菌株定为３号菌。　细菌在血琼脂平板上生长良好，菌落呈淡灰色、圆形、　湿润、露珠样小菌落，无溶血现象。在麦康凯培养基上１　号细菌不生长，２号、３号细菌生长良好且菌落边缘整　齐表面光滑。　３－３．２染色镜检　细菌染色呈革兰氏阴性，单个存在，两端钝圆，两极　浓染　３．４生化试验结果　对所分离出的３株巴氏杆菌进行生化试验鉴定．　其中１号菌株蔗糖、尿素、葡萄糖、甘露醇发酵试验为　阳性，乳糖、枸橼酸、麦芽糖发酵试验、三糖铁试验、尿素　酶试验均为阴性。２号、３号菌株蔗糖、尿素、乳糖、麦芽　糖、葡萄糖、甘露醇发酵试验为阳性，三糖铁试验和尿　素酶试验为阳性，甘露糖、枸橼酸发酵试验为阴性。根据　各试验结果可以推断出ｌ号为多杀性巴氏杆菌，２号、　３号为产气性巴氏杆菌　３．５药敏试验结果　通过药敏试验可知．多杀性巴氏杆菌和产气性巴　氏杆菌对头孢菌素和土霉素较为敏感　药敏试验结果　见表１。　表１　不同药物对巴氏杆菌的抑菌圈　单位：ｃｍ　菌株　土霉素庆大霉素青霉素金霉素链霉素头孢菌素　多杀性巴氏杆菌　３．１３　２．３０　２．１２　２．１５　２．Ｏ５　３．８５　产气性巴氏杆菌　２．９５　ｌ＿５０　１．０５　０．９０　２．６５　２．８４　

注：抑菌直径ｄ≥２．８ｃｍ为高敏感，２．０ｅｍ￣ｄ＜２．８ｅｒａ为中度敏感；ｄ＜２．０ｅｍ　为低度敏感．ｄ＝０为不敏感。　

３．６治疗　根据药敏试验结果．第一次发病后，采用头孢菌素　１００ｍｇ／ｋｇ体重（总量不能超过４ｇ）进行治疗连用５ｄ，　效果较好．但第二次发病时．再次使用头孢菌素就不能　控制病情．遂改用盐酸土霉素８０　０００ＩＵ／ｋｇ体重治疗．　连用５ｄ．对于病情严重的牛用葡萄糖静脉注射进行补液．　经治疗．除病情严重的１头牛死亡外，其余全部治愈而　且再无新病例发生　４讨论　牛巴氏杆菌病是一种常见多发的烈性热性传染病．　对养牛业危害非常严重。巴氏杆菌为条件病原菌，一些　诱发因素如营养不良、寄生虫感染、长途运输、饲养管　理条件不良等都可促进本病发生　。该牛场分别于２００９　年４月和６月购进两批牛。都是在购买后不久发病．探究　其发病原因．可能是在长途运输过程中，机体处于长时　间的应激状态．神经系统和内分泌系统功能紊乱引起机　体营养物质大量消耗，机体免疫力下降．从而导致该病　的发生　邢玫等就曾报道过运输应激能导致牛场暴发　巴氏杆菌病。此外．在饲养过程中，养殖户要特别注意　环境卫生．及时进行环境消毒　目前．许多地方兽医盲目使用广谱抗菌药以致使　巴氏杆菌产生了广泛的耐药性。因此，在临床治疗时．　应先进行药敏试验．不仅能及时有效地治疗疾病而且能　最大限度减少耐药性的产生　多杀性巴氏杆菌致病率高，病死率也高，在防治过　程中应以预防为主。对发病死亡牛深埋消毒。被污染的　用具、厩舍等彻底清扫消毒；对发病牛和疑似病立即隔　离进行治疗。健康牛要做好认真观察，同群牛和周围牛　・４４・　中国奶牛・２０１０年第３期　脑黄金牛奶的营养学研究进展　赵瑞。张金生，杨金波　（华南农业大学畜牧系，广州　５１０６４２）　中图分类号：Ｓ８—１　文献标识码：Ａ文章编号：１００４—４２６４（２０１０）０３—００４４—０４　摘要：本文论述了牛乳中ＤＨＡ和ＥＰＡ的可能来源，以及通过营养调控技术来增加牛乳中ＤＨＡ和ＥＰＡ含量的方法。　关键词：牛奶；ＤＨＡ；ＥＰＡ；来源；营养调控　

二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）是　（１）一３系多不饱和脂肪酸，俗称脑黄金，对人类健康有着　特殊的作用和影响．如预防心血管疾病、抑制肿瘤生长、　抗炎和抑制过敏反应、促进脑和视网膜的形成以及延缓　脑的衰老等功能　而牛奶作为人们日常生活中营养丰　富的全价食品．其乳脂中丰富的月桂酸、豆蔻酸和棕榈　酸等饱和脂肪酸可间接导致动脉粥样硬化、冠心病等发　病率升高Ⅲ．危害人类健康　在如今奶业低迷的情况下　国内许多企业都把眼光投向了利润较高的高端牛奶．　在此情况下．如果能够生产并推出一种可以结合ＤＨＡ和　ＥＰＡ及牛奶优点的“天然的富含ＤＨＡ和ＥＰＡ的高端　功能牛奶”．将会具有很大的开发价值和市场前景，在国　外市场上脑黄金牛奶的生产已经有了１０多年历史。为此，　本文对近些年来通过营养调控技术来提高牛奶中ＤＨＡ　收稿Ｅｔ期：２０１０—０１—２０　进行紧急预防注射：加强饲养管理，增强牛体抵抗力［８１。　参考文献　［１】Ｃａｒｔｅｒ，Ｇ．Ｒ．，Ａｍ［Ｊ］．Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．，１９５５，（１６）：４８１－４８４．　【２】郭大和，郑明，潘松年．我国多杀性巴氏杆菌荚膜抗原的血清学鉴定ｌＪ］．畜牧兽　医学报，１９７９，１０（２）：６７—７８．　【３】闫海．牦牛巴氏杆菌病的调查与防治【Ｊ］．甘肃畜牧兽医，２００７，３７（１）：３３—３４．　【４］张立成．高原牦牛巴氏杆菌病流行特点与分析［Ｊ］．中国兽医杂志，２００７，４３（７）：４６．　『５１　Ｈｅｄｄｌｅｓｔ０ｎ　Ｋ．Ｌ’Ｒｅｂｅｒｓ　Ｐ．Ａ．Ｆｏｗｌ　ｃｈｏｌｅｒａ：ＣＩＯＳ８一ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｔｕｒｋｅｙｓ　和ＥＰＡ含量的研究进展进行了详细的阐述．以期对生　产有所帮助　１　牛乳中ＤＨＡ和ＥＰＡ的可能来源　一般情况下．乳中的脂肪酸约有５０％是由瘤胃发酵　产物乙酸和Ｂ一羟丁酸在经乙酰辅酶Ａ羧化酶（ＡＣＣ）　和脂肪酸合成酶（ＦＡＳ）途径重新合成：４０％　５０％直接从　日粮中摄取：由体内脂肪提供的不足１０％。　１．１　日粮中的ＤＨＡ和ＥＰＡ在瘤胃中逃脱了瘤胃微生　物的氢化作用　日粮脂肪进入瘤胃后很快被水解为游离脂肪酸．　不饱和脂肪酸在瘤胃微生物的作用下逐级氢化．直至完　全饱和。不过大多数研究认为．日粮中仍有部分不饱和　脂肪酸未被氢化而进入后面的消化道。Ｂｉｃｋｅｒｓｔａｆｆｅ等［２１　的研究表明日粮中油酸、亚油酸和亚麻酸在泌乳期山羊　瘤胃中有９０％被氢化。Ｗｕ等［３１报道也表明．４４％～７９％　的油酸、６３％～７９％的亚油酸和７８％～９０％的亚麻酸在瘤