２０１２年３月２０日第２ｌ卷第６期 Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．６，Ｍａｒｃｈ ２０，２０１２ 中圉茄
Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ・药物鉴定・ Ｄｒｕｇ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
高效液相色谱法测定烟酸占替诺片的含量及有关物质
王发，杜珊，周至云
（陕西省食品药品检验所，陕西西安 ７１００６１）
摘要：目的建立测定烟酸占替诺片含量及有关物质的高效液相色谱法。方法采用钻石ｃ ｓ枉（１５０ ｍｍ ｘ４．６ ｍｍ，５ ｂｔｍ），以０．１％三乙
胺溶液（用冰醋酸调节ｐＨ至３．３）一甲醇（９５：５）为流动相，流速为１．０ ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长为２６７ ｎｍ，柱温为３５℃。结果烟酸占替诺
质量浓度在９．９４～９９４ ｍｇ／Ｌ范围内与峰面积呈良好线性关系，线性回归方程为Ｙ＝３２ ０２４．５ 一７１ ０４６．０，ｒ＝１．０００，方法回收率为
９９．４％（ｎ＝９），ＲＳＤ为０．２％。茶碱质量浓度在０．３３～３３ ｍｇ／Ｌ范围内与峰面积呈良好线性关系，线性回归方程为Ｙ：５９ ０６９．９Ｘ一
２ ５９５．２，ｒ＝１．０００，方法回收率为９９．０％（ｎ＝９），ＲＳＤ为１．３％。结论所用方法简便准确，专属性强，可用于其产品的质量控制。
关键词：高效液相色谱法；烟酸占替诺片；含量；有关物质
中图分类号：Ｒ９２７．２；１１９７２ ．４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１２）０６—００３９—０２
ＨＰＬＣ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｘａｎｔｈｉｎｏｌ Ｎｉｃｏｔｉｎａｔｅ Ｔａｂｌｅｔｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ
Ｗａｎｇ Ｆａ，Ｄｕ Ｓｈａｎ，Ｚｈｏｕ Ｚｈｉｙｕｎ
ｌ Ｓｈａａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉ。ａｎ．Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ ７１００６１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｘａｎｔｈｉｎｏｌ Ｎｉｃｏｔｉｎａｔｅ Ｔａｂｌｅｔｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ａｄｏｐｔｅｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｒｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ：ｔｈｅ Ｃｔ ｓ（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｔｚｍ）ｃｏｌｕｍｎ，ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ
０．１％ｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｐＨ ３．３ ａｄｊｕｓｔｅｄ ｂｙ ｇｌａｃｉａｌ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ）ｍｅｔｈａｎｏｌ（９５：５）ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ａｔ １．０ ｍＬ／ｍｉｎ；ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔ
ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ａｔ ２６７ ｎｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｘａｎｔｈｉｎｏｌ ｎｉｃｏｔｉｎａｔｅ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎ—
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ ｏｆ ９．９４—９９４ ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ Ｙ＝３２ ０２４．５Ｘ一７１ ０４６．０（ｒ＝１．０００）．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９．４％（ｎ＝９），
ＲＳＤ：０．２％．Ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ ａｌｓｏ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．３３—３３ ｍｇ／Ｌ．ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｗａｓ Ｙ：５９
０６９．９Ｘ一２ ５９５．２（ｒ＝１．０００）．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９．０％（ｎ＝９），ＲＳＤ：１．３％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ｗｉｔｈ ｓｔｒｏｎｇ
ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｘａｎｔｈｉｎｏｌ Ｎｉｃｏｔｉｎａｔｅ Ｔａｂｌｅｔｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；Ｘａｎｔｈｉｎｏｌ Ｎｉｃｏｔｉｎａｔｅ Ｔａｂｌｅｔｓ；ｃｏｎｔｅｎｔ；ｒｅｌａｔｅｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ
烟酸占替诺片为外周血管扩张药，用于治疗缺血性脑血管疾
病及其后遗症，亦用于治疗血栓闭塞性脉管炎、静脉炎等。原标准
采用紫外分光光度法 测定其含量，笔者参考文献［２—６］，建立
了可同时测定烟酸占替诺片含量和有关物质的高效液相色谱法，
现报道如下。
１仪器与试药
Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ＨＴ高效液相色谱仪，Ｗａｔｅｒｓ ２４７８紫外检测
器；ＵＶ一２５５０型紫外分光光度计；ＢＢＳ一２２４Ｓ型电子分析天平
（赛多利斯）。烟酸占替诺对照品（中国药品生物制品检定所，批号
为１００３５６—２０１００２，含量９９．７％）；茶碱对照品（中国药品生物制
品检定所，批号为１００１２１—１９９９０３）；烟酸占替诺片（西安秦巴药
业有限公司，规格为１００ ｍｇ，批号为１００５０１０１，１００５０２０１，
１００５０３０１）；冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司）为分析纯，甲
醇、三乙胺（美国天地公司）为色谱纯，纯化水。
２ 方法与结果
２ １ 色谱条件
色谱柱：钻石Ｃ—ｓ柱（１５０ ｍｍ ｘ４．６ ｍｍ，５ ｍ）；流动相：０．１％
三乙胺溶液（用冰醋酸调节ｐＨ至３．３）一甲醇（９５：５）；检测波
表３ 控制茵验证试验结果
时，在文中的检验量、检验条件下，美洛昔康无抑菌活性，或抑菌
活性被充分消除到可忽略不计的程度，方法适用于该品种的微生
物限度检查。 长：２６７ ｎｍ；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：３５℃。
２ ２ 溶液制各
精密称取茶碱对照品１３．２Ｏｍｇ，置２００ｍＬ量瓶中，用流动相
溶解并定容至刻度，作为茶碱对照品贮备液。精密称取烟酸占替
诺对照品９９．７０ ｍｇ（折纯品为９９．４０ ｍｇ），置１００ ｍＬ量瓶中，精
密加入茶碱对照品贮备液５０ ｍＬ，用流动相溶解并定容至刻度，
作为茶碱和烟酸占替诺混合对照品贮备液。取样品２０片，精密称
定，研细，精密称适量（约相当于烟酸占替诺１００ ｍｇ），置１００ ｍＬ
量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为
供试品贮备液。精密量取供试品贮备液５ ｍＬ，置５０ ｍＬ量瓶中，
用流动相稀释到刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶
液３ ｍＬ，置１００ ｍＬ量瓶中，用流动相稀释到刻度，摇匀，作为有
关物质对照溶液（Ｏ．３％自身对照）。
２．３ 方法学考察
线性关系考察：分别精密量取混合对照品贮备液适量，用流
动相稀释制成烟酸占替诺质量浓度分别为９．９４，４９．７０，９９．４０，
４９７．Ｏ０，９９４．Ｏ０ ｍｇ／Ｌ（对应茶碱质量浓度分别为０．３３，１．６５，
３．３０，１６．５０，３３．Ｏ０ ｍｇ／Ｌ）的对照品溶液。分别精密量取上述溶液
在进行美洛昔康微生物限度检查时，检验方法对微生物检出
有无影响尚不确定。根据２０１０年版《中国药典（二部）》要求，当建
立产品的微生物限度检查法时，应对所采用方法进行验证，以确
保方法的可行性和最终检验结果的可靠性。因此，本试验为美洛
昔康微生物检验方法的建立提供了实验室依据。
参考文献：
［１］国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）［Ｍ】．北京：中国医药
科技出版社，２０１０：附录１０７一附录１１６．
（收稿日期：２０１１—０７—０４）