江苏农业科学２００８年第４期　．．．——２５７．－－——　
柚皮中柚皮苷提取工艺研究　
闻永举，申秀丽，易艳萍　
（宜春学院，江西宜春３３６０００）　

摘要：为建立柚皮中柚皮苷的提取工艺，采用正交试验法，以柚皮苷含量为指标，对氢氧化钙溶液用量、提取　
温度、浸提次数、浸提取时间进行优选。结果表明，８倍量的１％氢氧化钙、９０℃、提取３次、每次４０　ｍｉｎ为最佳提　
取工艺，该工艺方法简单，成本低，重复性好，能够用于工业化生产。　
关键词：柚皮；柚皮苷；提取工艺；正交试验　
中图分类号：ＴＳ２５５　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２—１３０２（２００８）０４—０２５７—０２　

柚子是我国江西、福建、浙江等东南沿海地区的　
大宗水果，其果皮中含有丰富生物类黄酮和果　
胶¨　ｊ。柚皮苷占其总黄酮类物质的８０％，具有抗　
菌、抗炎、抗病毒等作用　－４＿。柚皮苷经碱液开环、　
加氢还原生成的二氢查尔酮，是一种优良的甜味　
剂　４ｊ，市场需求非常广阔。因为柚皮苷含有大量的　
果胶，而且柚皮苷在水中还具有一定的溶解度，很难　
用碱提酸沉法来提取柚皮中的柚皮苷。关于柚皮中　
柚皮苷的提取工艺目前主要有水提取　和乙醇提　
取＿６　ｊ，碱水提取尚未见报道。为探求一种更为合　
理、收率更高、更为经济的提取工艺，我们进行了碱　
水提取工艺研究。　

１材料与仪器　
１．１仪器与药品　
ＳＹ一８０００高效液相色谱仪［北京北分瑞利分析　
仪器（集团）有限责任公司生产］，ｕＶ紫外检测器、　ＢＳ２２４Ｓ电子分析天平（赛多利斯公司生产），ＲＥ一　２００ｏ型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂生产），恒　温干燥箱（上海跃进医疗器材厂生产），玻璃层析　柱、大孔吸附树脂（天津市南开大学化工厂生产）。　柚皮苷对照品由中国药品生物制品检定所生产。甲　醇为色谱醇，水为重蒸水，冰醋酸、氢氧化钙、盐酸均　为分析纯。　１．２试验材料　柚皮为新鲜柚子剥皮干燥备用。　收稿日期：２００８—０２—２５　作者简介：闻永举（１９７９一），男，河南信阳人，硕士研究生，讲师，从　事天然产物活性成分及新药开发研究。Ｔｅｌ：（０７９５）３２０１９８５；　Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｅｎｙｏｎｇｊｕｊｕｊｕ＠１６３．ｃｏｍ。　２试验方法与结果　２．１　色谱条件　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　ＯＤＳ　Ｃ１８柱（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５　ｍ，　大连伊利特科学仪器公司生产）。流动相为甲醇一　冰醋酸一水（３５：４：６１），流速为１　ｍｌ／ｍｉｎ，柱温３０　℃。检测波长２８３　ｎｍ。。　。　２．２标准曲线制备　Ｊ　精密称取柚皮苷对照品１０　ｍｇ，置１００　ｍｌ容量　瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。　精密吸取对照品溶液５、１０、１５、２０、２５　ｌ，在上述色　谱条件下分别进样，记录峰面积。以峰面积为纵坐　标，以进样量为横坐标进行线性回归，得柚皮苷回归　方程为Ｙ＝３０　０１８．４＋６３９　６７６．５ｘ，线性范围０．５—　１２．５　ｇ。　２．３提取方法的比较　取柚皮粗粉，过１０目筛。称取２００　ｇ，按表１中　
方法进行提取，提取液通过１００　ｍｌ大孔吸附树脂柱　
（方法３碱液提取，用纱布预先过滤，滤液放冷，再　
进行过滤，滤液加盐酸调ｐＨ值为４），以盐酸一镁粉　
反应为外指示剂。流速为１　ＢＶ／ｈ（ＢＶ表示柱床体　
积，下同），先用２　ＢＶ水洗脱，再以７５％乙醇解吸　
附，收集７　ＢＶ　７５％乙醇洗脱液，回收乙醇，调整浓缩　
液与生药量为２：１，冷处放置，析出结晶，过滤，用　
少量水洗，干燥。　

表１　３种提取方法对柚皮苷的提取结果（ｎ＝３）　
试验方法　ｏｏ柚爱｛　取　

８倍量水，８５℃提取３次　
２５倍量８０％乙醇，９Ｏ℃提取１次　
８倍量１％氢氧化钙，８５℃提取３次　

４．１　
４．６　
５．３　

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２５８．．．——　江苏农业科学２００８年第４期　
精密称取水提、醇提、碱提样品的相应结晶品各　
１０　ｍｇ，置１００　ｍｌ容量瓶中，以甲醇定容至刻度。分　
别精密吸取３．０　置于１０玎ｌｌ容量瓶中，分别以甲醇　
定容至刻度，摇匀，即得各不同提取方法供试品溶液。　精密吸取１０　ｌ，进样测定。含量测定结果见表１。　２．４正交试验优选柚皮苷的提取工艺条件　由以上试验可知，碱水提取比乙醇提取、水提取　柚皮苷收率都高。因此，又对碱水提取柚皮苷进行　正交试验筛选。由于柚皮苷含有大量果胶，因此碱　水选取氢氧化钙水溶液作为提取溶剂。　２．４．１试验设计根据生产实际，选择溶剂量、提　取温度、浸提时间、浸提次数作为考察因素，以柚皮　苷总量作为评价指标。因素水平安排见表２。　表２柚皮苷提取考察因素及７ｋ平　因　素　水平　（倍）　（℃）　（ｒａｉｎ）　ｌ　６　８Ｏ　２Ｏ　ｌ　２　８　９Ｏ　３Ｏ　２　３　ｌ０　ｌ００　４Ｏ　３　２．４．２方法与结果称取相同粉碎度的柚皮２００　ｇ，按表２安排的试验条件进行提取。提取液趁热用　纱布过滤，滤液放冷，再进行抽滤，滤液加盐酸调ｐＨ　值为４，酸液上１００　ｍｌ大孔吸附树脂，以盐酸一镁粉　反应为外指示剂。流速为１　ＢＶ／ｈ，先用２　ＢＶ蒸馏　水洗涤，后用７５％乙醇７　ＢＶ洗涤，回收乙醇，调整　浓缩液与生药量为２：１，冷处放置，析出结晶，过　滤，用少量水洗，干燥。精密称取１０　ｍｇ结晶品，置　１００　ｍｌ容量瓶中，以甲醇定容至刻度。精密吸取３．　０　ｌ置于１０　ｍｌ容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇　匀，即得供试品溶液。精密吸取供试品和对照品各　１０　ｌ，进样测定，结果见表３。　表３柚皮苷提取２［２艺正交试验结果　试验号　Ａ　Ｂ　ｃ　。　差莩譬望嚣　对表３中试验结果进行数据处理，并进行方差　分析，结果见表４。　通过比较各因素的极差值（Ｒ），得到最佳提取　条件为Ａ　Ｂ：Ｃ，Ｄ，。通过方差分析表明，影响柚皮苷　
提取的因素顺序为Ｄ＞Ａ＞Ｂ＞Ｃ，提取次数有显著　
性影响，其次是１％氢氧化钙用量和提取温度，提取　
时间影响不大。故此确定最佳提取条件为　
Ａ　Ｂ　Ｃ，Ｄ３，即用８倍量的１％氢氧化钙溶液，９０℃　
提取４０　ｒａｉｎ，提取３次。　

表４柚皮苷提取工艺方差分析　

注：查Ｆ分布Ｉ临界表得　０５（２，２）＝１９，Ｆｏ　０ｌ（２，２）＝９９。“｛”表示显著　
意义。　

３讨论　
现有的工艺以乙醇提取柚皮苷成本高，以水提　
取柚皮苷收率低。采用氢氧化钙溶剂提取，既可以　
防止果胶的溶解，又能增大柚皮苷的溶解度，并结合　
大孔吸附树脂富集与纯化，能够提高柚皮苷的收率。　
该工艺成本低，能够适合工业化生产。　

参考文献：　
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