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透析袋的预处理

我打算做蛋白的透析复性,透析袋买来了,但是不知道怎么做预处理在网上搜了预处理的步骤,但是有几点不明白。

我搜索的步骤如下:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,注意带手套。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。

从此时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。

我有以下几点不明白:
1.步骤一中,为什么要戴手套操作?
2.步骤二中,用“大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)煮沸”,是分别煮沸、还是两种溶液混到一块煮沸?
3.步骤四中,“透析袋必须浸没在溶液中”此处的溶液是指什么?1mmol/L EDTA(pH 8.0)?
第一点ls说了
第2点配一个溶液,含2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
第3点2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋
(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min (3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗
(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min
(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。

重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作
(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

我也做过透析袋相关实验,我们平时就是把剪好的透析袋保存于无水乙醇中,用的时候用蒸馏水洗净,然后在烧杯里面加入蒸馏水没过透析袋微波炉加热煮沸10分钟就可以了
丁香园方法
透析膜(前处理方法如下): 1. 戴手套把透析膜剪成适当长度,浸在蒸馏水中15 min 泡软。

2. 浸入10 mM sodium bicarbonate 中,并加热至80℃,一边搅拌至少30 min。

3. 换到10 mM Na2•EDTA 中浸泡30 min,以新鲜的EDTA 同样方法处理三次。

4. 再用80℃蒸馏水洗30 min,然后换到20% 酒精中,放在4℃冰箱中保存。

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你可按下述方法处理:
i. 将透析袋剪为适当长度:一般为10,20和30cm。

ii. 将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。

iii. 煮沸5min。

将透析液弃掉。

用去离子水简单冲洗透析袋。

iv. 再将透析袋浸入50ml 5mM EDTA/200mM NaHCO3透析液中。

v. 煮沸5min。

将透析液弃掉。

用大量去离子水彻底冲洗透析袋。

用铝箔包起来。

vi. 高压灭菌10min。

vii. 4℃保存。

可加入0.02%叠氮化钠避免长菌。

viii. 使用时,戴手套取所用透析袋,用去离子水将其里外全部冲洗。

透析袋买来后最好再处理一下,因为其中可能含有防腐剂及其他小分之化学物从而影响透析效果,先献上我常用的改良后的处理方法:
1 0.5M EDTA-2Na 1 毫升加10克碳酸氢钠,补蒸馏水至500毫升,调PH至8.0
2 透析袋放上述液体中煮沸10分钟
3 取出透析袋蒸馏水清洗干净,再放蒸馏水中煮沸10 分钟
4 冷却后就可以用了,如果暂时不用的话,可以放苯钾酸钠或叠氮化钠中保存
5 用过的透析袋同法处理,放50%甘油或50%乙醇中保存,下次用前蒸馏水洗净即可
6 注意取透析待一定要戴手套哦。

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