COOH
水杨酸(杂质)
COOH
+
OH + (CH3CO)2O
H2SO4
70~75oC +
OCOCH3
+
CH3COOH
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例：盐酸普鲁卡因注射液的制备
∙
制备过程中加热灭菌
盐酸普鲁卡因注射液 对氨基苯甲酸
进一步脱羧转化
苯胺
引起毒性反应
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（ChP）
灵敏度法 比较法
杂质定量测定法
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对照法：取限度量的待检杂质对照品配成的对照溶 液，与一定量供试品配成的供试品溶液，在相同条 件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超 过限量。
例:
平行试验比较两 比色管的颜色或浊 度，判断杂质含量 是否符合规定。
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第三章
药物的杂质检查
第一节 药物的杂质与限量 第二节 杂质的检查方法 第三节 药物中一般杂质的检查
第四节 特殊杂质的鉴定方法
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§3-1 药物的杂质与限量
一、药物的杂质与纯度
滴定法
如：硫酸亚铁片剂中高铁盐的检查
2Fe3+ + 2KI
I2 + 2Na2S2O3 2Fe2+ + I2 + 2K+
2NaI + Na2S4O6
与药典规定限量进行比较
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（二）色谱方法
难以采用化学法、光谱法对杂质进行检查时，多
采用色谱法。
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例1.对乙酰氨基酚中氯化钠的检查
供试品溶液：
水 样品2.0g 100ml过滤 25ml 依法检查Cl ,溶解
对照溶液：标准NaCl溶液（10gCl-/ml），
取5.0ml同法操作比较，浊度不得更大。
计算：氯化物限量是多少（%）？
物稳定性的影响等方面来限定。只有合格品 和不合格品两个等级。
化学试剂纯度：从杂质可能引起的化学变化
对使用的影响方面来限定，不考虑杂质对生 物体的生理作用及毒副作用。纯度等级包括 色谱纯、光谱纯、优级纯、分析纯、化学纯 等。
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二、药物杂质的来源
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（二）杂质检查项目的确定
根据起始原料、生产工艺及稳定性情况确定。 药物在质量研究中和稳定性考察中检出的，并在批量 生产中出现的杂质和降解产物 单一对映体药物：检查其它对映体 消旋体药物：旋光度检查
（三）杂质限量的确定
在确保用药安全有效的前提下，应考虑到生产的可行
1% E1cm A / cl
c酮体 A / E
1% 1cm
0.05 = 1.15 10-4 g/ 100ml ） （ l 435 1
= 1.15 10 （g/ ml ）
-6
0.20 c样品 = 2.0 10-3 g/ml） （ 100 c酮体 1.15 106 L 100% = 0.06% 3 c样品 2.0 10
残留溶剂
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无效或低效杂质
（1）具有光学异构体的药物，生物活性有很大差异；
如：肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的12倍。
（2）顺式体与反式体药物，生物活性也不相同；
如：VA以全反式的生物活性为最高。 （3）多晶型药物，晶型不同生物活性也有差异； 如：驱虫药甲苯咪唑，有A、B、C三种晶型。
色谱法是检查药物中有关物质的首选方法。 1. 薄层色谱法 2. 高效液相色谱法
3. 气相色谱法
4. 毛细管电泳法
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1.薄层色谱法
（1）杂质对照品法：适用于杂质已知并有杂质对照 品的情况。 方法：根据杂质限量，取供试品溶液和一定浓度的 杂质对照品溶液，分别点于同一薄层板上展开，定 位后进行检查。 供试品溶液除主斑点外的其它斑点与 相应杂质对照品溶液的主斑点比较。
纯度：药物的纯净程度。 需要从药物的外观性状、理化常数、杂质检查和含 量测定等方面进行综合评定。 杂质：ChP规定任何影响药品纯度的物质，是影响 药物纯度的主要因素 。 药物的纯度检查也可称为杂质检查。
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药物纯度与化学试剂纯度：
药物纯度：从杂质对用药安全、有效和对药
10 106 5.0 C V L 100% 100% 0.01% 25 S 2.0 100
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例2.肾上腺素中酮体的检查
取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→2000)溶解并 稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度不得超过0.05， 已知酮体的百分吸收系数为435，求酮体的限量。
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二、杂质的常用检查方法
（一）化学方法
显色反应检查法 沉淀反应检查法 生成气体的检查法 滴定法
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显色反应检查法
如：氯硝柳胺中2-氯-4-硝基苯胺的检查
Cl
NHCH2CH2NH2
其中C晶型的驱虫率为90%，B晶型的驱虫率为40~60%， A晶型的驱虫率小于20%。
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四、杂质的限量
杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量。 限量表示方法：百分之几（%） 百万分之几（ppm） 对照法 控杂 制质 方限 法量 限量检查法
（4）对照药物法：适用于无合适的杂质对照品，或 杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异而难以判断限
量的情况。
方法： 选用与供试品相同的药物 作为对照。对照药物中所含待检 杂质应符合限量要求，稳定性好。
供 对
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2.高效液相色谱法
使用高效液相色谱法测定含量的药物，可采用 同一色谱条件进行杂质检查。 采用此法检查杂质时，ChP规定应进行色谱系 统适用性试验，以保证仪器系统达到杂质检查 要求。
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限量计算公式
杂质最大允许量 杂质限量 100% 供试品量
对照溶液的浓度 对照溶液的体积 100% 供试品量
写成：
C V C V L 100% 或 L(ppm) 106 S S
注意: ①单位是否统一 ②供试品是否有稀释 ③表示方法%或ppm
性、批与批之间的正常波动、药品本身的稳定性。
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（四）杂质检查方法的选择与验证
杂质检查方法包括化学法、光谱法、色谱法等。 有机杂质多采用色谱法，特别是HPLC。
检查方法要求专属、灵敏，应验证方法的专属性。
分析方法的检测限应符合质量标准中对杂质限度的 要求。
（一）生产过程中引入
（1）所用原料不纯； （2）合成工艺中未反应完全的原料、反应中间体、
副产物等；
（3）药物在制成制剂的过程中产生的新杂质； （4）合成工艺中使用的试剂、溶剂等； （5）合成工艺中使用的设备、器皿可能引入重金属。
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例：阿斯匹林由水杨酸乙酰化制得 乙酰化不完全
CO NH NO2
OH
Cl
+
O2N Cl
NH2 + NaNO2 + 2HCl
O2N Cl
N2Cl + NaCl + 2H2O
+
-
杂质：2-氯-4-硝基苯胺
O2N Cl N N NHCH2CH2NH2
显色（比色法检查）
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沉淀反应检查法
样品管 对照管
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灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量的试剂， 在规定条件下反应，不得出现正反应。即以检测 条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。
例：乳酸中枸橼酸的检查
供试品(0.5g)
水 氨试液调微碱性
5mL溶液
1ml氯化钙试液
水浴△ 5min
如：盐酸肼屈嗪中游离肼的检查
盐酸肼屈嗪 盐酸肼屈嗪 CHO H2NNH2· 2O H CN HCl N N ． HCl
NHNH2 CHO H2NNH2 + 杂质：游离肼 杂质：游离肼 OH HC NNH2 OH + H 2O
比浊法或重量法检查
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按来源分为：
一般杂质：在多种药物的生产和贮藏中容易引入 的杂质。 检查方法收载在ChP的附录中。 特殊杂质： 在特定药物的生产和贮藏中引入的杂质。 检查方法收载在ChP正文各品种的质量标准中。