NGF原液车间清洁验证方案预验证审核和批准版本历史目录1.目的 (4)2.范围 (4)3.职责 (4)4.参考文件 (4)5.系统说明 (5)5.1清洁程序文件 (5)6.本次验证概述 (5)7.验证实施 (6)7.1人员确认 (6)7.2文件检查 (8)7.3验证仪器和方法的确认 (11)7.4取样的确认 (13)7.5残留限度的确定 (20)8.检测 (22)8.1目检检查 (22)8.2棉签法微生物取样及检测 (25)8.3淋洗法微生物取样及检测 (28)8.4棉签法化学取样及检测 (31)8.5淋洗法化学取样及检测 (34)9.偏差报告 (37)10.附件清单 (37)11.执行的审核和批准 (37)1. 目的本清洁验证方案是为了通过采用目测、化学分析和微生物检测方法确认NGF原液车间的与产品接触的设备和工器具依照规定的清洗程序清洗灭菌后是否能够有效地除去产品残留，使各项残留量指标在预先确定的限度范围内，从而证明设备清洁规程的可行性和可靠性，进而保证产品的质量，防止污染和交叉污染。
2. 范围本方案验证范围为NGF原液车间。
3. 职责3.1上海朗脉的职责✓验证方案的编写✓准备偏差报告和解决偏差的建议✓如果出现偏差，与客户某个授权的人员进行协调3.2贝克的职责✓参与验证方案的编写✓执行前审核和批准本方案✓参与执行测试✓提供设备或系统的技术标准和其它相关的设计文件✓最终报告的编写✓针对不符合项界定解决方法✓审核和批准验证报告4. 参考文件以下是方案编写所依据的参考文件：✓《药品生产质量管理规范》（2010年修订）✓《药品GMP指南》（质量管理体系、无菌药品）✓FDA：Guide to inspections validation of cleaning processes✓APIC：Guidance on aspects of cleaning validation in active pharmaceutical ingredient plants (MAY 2014)✓PDA: Technical Report No. 49: Points to Consider for Biotechnology Cleaning Validation（2010）《中华人民共和国药典2010》5. 系统说明NGF原液车间所处环境为D级洁净区和C级洁净区，主要用于原液的提取、纯化、除菌。
由1台匀浆器、1台高速冷冻离心机、2套透析设备、3套层析设备、1个配液罐、1台超滤设备、过滤器、磁力搅拌器和蠕动泵组成。
物料在配制过程中，使用到不锈钢桶、投料斗等工器具，工器具使用手工清洗，故同时对工器具进行清洁验证。
配液罐用于透析用缓冲液的配制，并未与产品接触，故不在清洁验证范围内。
3套层析设备的清洁验证在层析设备的PQ完成。
5.1 清洁程序文件生产结束后，按照以下的操作规程进行清洗，以下为相关的清洁规程。
6. 本次验证概述本次验证所选品种及其残留限度、取样位置等均源于“原液车间清洁验证评估报告”。
本次验证为了挑战最差清洗状况，在使用结束存放一定时间进行清洗。
本次验证连续进行三个批次。
验证项目：目检、清洁剂残留检测、微生物检测（包括内毒素检测）、pH值、TOC、电导率。
验证时要求将使用后的设备在DHT为5小时后（规定DHT为4小时），再进行设备清洗。
接触生物组织的容器具放置1小时后（规定使用后立即清洗）。
将在设备清洗后第3天（SOP规定最长保存期限为2天）再目检和微生物取样检查，确定设备的清洗有效期。
本次清洁验证将与三批工艺验证同步运行。
7. 验证实施7.1 人员确认目的确认所有执行本方案的人员程序列出所有执行本方案的人员（姓名、签名和部门/公司）。
所有参与方案实施的人员应得到适当的培训，以实施本方案。
可接受标准所有执行本方案的人员（姓名、签名和部门/公司）已记录。
所有执行本方案人员已得到培训。
填写表1，如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 1 人员的确认7.2 文件检查目的确认设备相关SOP、记录是可用的。
程序核实有以下所列描述内容的文件是否齐全，相关的SOP及记录是否是可用的，并记录标题、发布日期、版本号。
✓设备清洗标准操作程序✓设备清洗记录✓清洁验证评估报告（需验证的设备确定、取样位置的确定、检测项目和可接受标准）可接受标准所有必需的文件必须是可用的。
填写表2，如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 2 文件确认7.3 验证仪器和方法的确认所需要的仪器所使用的检测分析仪器和方法已经验证或确认。
目的确认每一项验证所用的仪器和方法的验证或确认情况。
程序核实对每一台验证所用的仪器应标识出生产厂家、型号、系列号、验证或确认日期。
核实对所使用的分析方法已经验证或确认过，并记录下来。
可接受标准所有分析仪器和方法已经得到验证或确认。
填写表3。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 37.4 取样的确认目的确定设备的取样方法和取样位置，并给取样点进行取样编号。
程序列出所采用的取样方法，同时根据取样编号原则给需要取样的地方进行编号和记录。
a)棉签擦拭法微生物限度取样方法：该系统清洁后，按无菌操作方法取出灭菌棉签，先用无菌溶液湿润一下，取样时，握住棉签柄，以30°角与取样面接触，缓慢并充分擦拭，取样面积为25cm2（可用特定的无菌模板确定擦拭面积），小心把取样头折断放入无菌溶液中，充分振荡使均匀，作为供试液。
b）棉签擦拭法表面清洁剂残留取样方法：待微生物限度取样结束后，用注射用水浸泡过的脱脂棉签在需要取样的部位擦拭25cm2区域面积，每25 cm2用2根棉签擦拭，将擦拭每个区域所用的2根棉签剪下棉签头放入取样瓶中。
用注射用水润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶边挤压，以去除多余的水。
将棉签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时，将其从一边移动到另一边。
擦拭的过程应覆盖整个取样表面，然后翻转棉签，让其另一侧也进行擦拭，但其方向应与前次垂直。
擦拭路线如下图所示：c）淋洗水取样方法：根据淋洗水流经设备的线路，选择淋洗线路相对最下游的一个或几个排水口，收集淋洗即将结束时的水样。
d）附取样点示意图。
e）样品应及时贴上取样标签或在取样瓶上做好标识，标明取样日期、取样部位、样品名称、批号、取样目的，并填写请验单。
e）确认棉签擦拭回收率的实验已完成，结果符合规定。
取样编号原则如下：棉签擦拭微生物样品，用设备代号+SMn棉签擦拭化学样品，用设备代号+SCn淋洗水微生物样品，用设备代号+RMn淋洗水化学样品，用设备代号+RCnS-代表擦拭样品，C-代表化学样品，R-代表淋洗样品，M-代表微生物样品，n-代表样品流水号可接受标准取样的方式和取样位置的信息是可用的。
棉签擦拭回收率在50%以上。
取样的位置和取样器具记录填写表4。
取样记录填写表5。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 4取样位置的确认1 取样位置的确认选择依据：根据清洁验证评估报告，已评估出理论最难清洁部位和易清洁部位，现通过对设备各个部件进行现场考察，最终确认各个取样点。
2 器具的确认表 5取样记录2取样编号原则棉签擦拭微生物样品，用设备代号+SMn棉签擦拭化学样品，用设备代号+SCn淋洗水微生物样品，用设备代号+RMn淋洗水化学样品，用设备代号+RCnS-代表擦拭样品，C-代表化学样品，R-代表淋洗样品，M-代表微生物样品，n-代表样品流水号7.5 残留限度的确定目的确定微生物和清洁剂的残留限度已确定。
程序核实微生物和清洁剂的残留限度是否按照GMP要求确定并记录数据。
可接受标准确定的可接受限度是可用的。
填写表6。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 6残留限度的确认8. 检测8.1 目检检查目的确认设备在清洗结束后，设备部件表面目视无残留。
程序设备清洗结束后，灭菌前，对清洗的设备部件进行目视检查，在光照良好的条件下检查所有可视之处。
如果有可能，采用手电筒或顶灯。
检查部件，记录结果。
可接受标准设备表面目视无残留。
填写表7。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 7 目检检查记录8.2 棉签法微生物取样及检测目的收集棉签法取样的样品和微生物项检测数据。
程序根据预先确定的设备取样点位置，用棉签法进行取样，记录取样人及取样日期；对样品进行处理并检测；记录检测结果并判断是否符合要求。
可接受标准残留限度符合规定。
填写表8。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 8棉签法微生物取样及检测结果取样批号：__________ Page of8.3 淋洗法微生物取样及检测目的收集淋洗法取样的样品和微生物项检测数据。
程序根据预先确定的设备取样点位置，用淋洗法进行取样，记录取样人及取样日期；对样品进行处理并检测；记录检测结果并判断是否符合要求。
可接受标准残留限度符合规定。
填写表9。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
表 9淋洗法微生物取样及检测结果取样批号：__________ Page of清洁验证方案8.4 棉签法化学取样及检测目的收集棉签法取样的样品和化学项检测数据。
程序根据预先确定的设备取样点位置，用棉签法进行取样，记录取样人及取样日期；对样品进行处理并检测；记录测试浓度及检测结果并判断是否符合要求。
可接受标准残留限度符合规定。
填写表10。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项。
清洁验证方案表 10棉签法化学取样及检测结果清洁验证方案清洁验证方案8.5 淋洗法化学取样及检测目的收集淋洗法取样的样品和化学项检测数据。
程序根据预先确定的设备取样点位置，用淋洗法进行取样，记录取样人及取样日期；对样品进行处理并检测；记录检测结果并判断是否符合要求。
可接受标准残留限度符合规定。
填写表11。
如果要求不适用，填写“N.A.”，并在备注栏中注明原因。
在偏差报告中记录在实施过程中所发生的不符合项清洁验证方案表11淋洗法化学取样及检测结果清洁验证方案9. 偏差报告所有不符合用户要求和GMP要求的偏差必须通过填写表12偏差报告进行正式地记录。
在表13记录所有的在执行中发生的偏差。