血细胞分析仪校准的标准操作程序(SOP)
实验室与设备sop 2007-05-23 15:03:59 阅读194 评论0 字号：大中小订阅
名称：血细胞分析仪校准的标准操作程序(SOP)
关键词：血细胞分析仪校准
目的：评价血细胞分析仪的各项性能指标，核实能否按厂商说明得到预期结果的评估，保证测定结果的准确性。
【适用仪器范围】
血细胞分析仪。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
【操作步骤】
(一)评价工作环境、仪器和试剂要求
室温：20～25℃。
湿度：<80％。
试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。
参评物：为仪器配套产品（标准品、质控品、干扰物等）并在使用效期内，同时无变质和污染，或病人标本。
仪器：
(1)评价前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。
(2)仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。
（二）评价内容
1. 精密度：分批内和批间精密度。
用高、中、低三种或二种浓度质控物测定。
批内精密度，一天内三种（二种）浓度分别各测20次，批间精密度三种浓度每天各测一次，共测20天。
2. 携带污染率：为了解前一高值标本对其后低值标本测定结果影响程度的指标。
高、中、低三种浓度标本的排列须：中、中、高、低、中、中、低、低、高、高、中。
3. 包括总重复性测定随机误差与携带污染双重变异因素。
4. 线性范围：一种测定方法其线性范围应越广越好，至少应包括正常范围和常见的病理范围。
线性评价至少作五个浓度点以上，每点平行测三份。
5. 可比性：用于判断该仪器与常规方法或参考方法所得结果的一致性。
用标准物进行比对或用新鲜病人标本（40份以上）进行比对。
6. 分析干扰实验：干扰物也是标本中的一个组分，它不是被分析物，但它改变最后的结果。
根据分析干扰因素制备标本，每份标本平行测三份。
(二)操作步骤
1．从冰箱中取出参评物，放置室温15分钟，勿摇动。
2．在评价测定前，先测定两份正常人新鲜血液。
3．将参评物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。
4．颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。
5．重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。
6．瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。
7. 用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞。
8. 根据评价目的进行测定。
9.评价样本测定方法按血细胞分析仪测定程序。
(三)计算与核对标准
1．计算出各项结果的均值和精密度，均值应比日常检测报告多保留一位小数点。
2．计算与核对
[1] 精密度测定计算、SD、CV，用CV于说明书上所示的要求比较。
[2] 携带污染率：≤1%。
[3] 总重复性测定随机误差与携带污染计算双重变异因素
[4] 线性范围核对可与说明书上所示的要求比较，也可用计算斜率观察线性范围。
[5] 可比性用标准物进行比对可与说明书上所示的要求比较，用新鲜病人标本（40份以上）进行比对，可用相关系数r，r≥0.975或r2≥0.95则认为数据满足要求。
[6] 分析干扰实验：目前一般以CLIA 88为准。
3.检查评价的项目是否达到使用说明书上所示的要求。
仪器说明提供的性能指标
[1] 精度
可靠水平95％，在下述范围之内：
全血模式：
WBC （4.0×103）/µ L以上3.5％以下
RBC （4.00×106）/µ L以上2.0％以下
HBG 1.5％以下
HCT 2.0％以下
MCV 2.0％以下
MCH 2.0％以下
MCHC 2.0％以下
PLT（100×103）/µ L以上6.0％以下
LYM＃[W-SCC] 15.0%以下
MXD＃[W-MCC](1.0×103)/µ L以上30.0％以下
NEUT＃[W-LCC] 15.0％以下
LYM％[W-SCR] 15.0％以下
MXD％[W-MCR]（12％以上）30.0％以下
NEUT％[W-LCR] 15.0％以下
RDW-SD或RDW-CV 4.0％以下
PDW 12.0％以下
MPV 5.0％以下
P-LCR 20.0％以下
稀释模式
WBC（4.0×103）/µ L以上6.0％以下
RBC（4.00×106）/µ L以上3.0％以下
HGB 2.50％以下
HCT 3.0％以下
MCV 3.0％以下
MCH 3.0％以下
MCHC 3.0％以下
PLT（100×103）/µ L以上9.0％以下
[2] 正确度
全血模式
WBC：±3％或±0.2×103/µ L以内
RBC：±2％或±0.03×106/µ L以内
PLT：±5％或±10×103/µ L以内
稀释模式
WBC：±5％或±0.3×103/µ L以内
RBC：±3％或±0.05×106/µ L以内
PLT：±8％或±15×103/µ L以内
[3] 线性
WBC：1.0-9.9（×103/µ L）±0.3（×103/µ L）以内
10.0-99.9（×103/µ L）±3％以内
RBC：0.30-0.99（×106/µ L）±0.3（×106/µ L）以内
1.00-7.00（×106/µ L）±3％以内
HGB：0.1-10.0（g/dL）±0.2(g/dL)以内
10.0-25.0（g/dL）±2％以内
HCT：10.0-33.0（HCT％）±1.0（HCT％）以内
33.4-60.0（HCT％）±3％以内
PLT：10-199（×103/µ L）±10（×103/µ L）以内
200-900（×103/µ L）±5％以内
（设RBC<7.00×106/µ L）
【评价结果】
1. 仪器作全面评价或评价其中一个内容时，实验后需对结果进行核对评价，如不符合要求应检查原因，然后重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新评价。
2. 仪器故障检修后也要重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新评价。
3．书写和保存评价报告，交科室存档。