红外光谱测定注意事项及定性分析2012-6-271新快报4月30日报道备受关注的“齐二药”假药案刑事部分，昨日上午在广州中院一审宣判。

2006年4月19日，广州中山大学附属第三医院按广东省医疗机构药品集中招标中心的规定，开始采用在药品采购中唯一中标的“齐二药”亮菌甲素注射液。

65名陆续使用该药品的患者，部分出现了肾衰竭等严重症状，13名患者死亡，2人病情加重（今年1月一人死亡）。

同年5月，“齐二药”亮菌甲素注射液被认定为假药，全国紧急查封。

2012-6-272� 2005年9月，负责采购的钮忠仁和副总经理郭兴平，违反物料采购应派人对供货方实地考察和要求供货方提供样品进行检验等相关规定，严重不负责任，在未确切核实供应商王桂平（另案处理）的供货资质的情况下，2005年10月，经郭兴平同意，钮忠仁向王桂平购入了1吨由二甘醇冒充的丙二醇。

�而陈桂芬、朱传华作为“齐二药”公司负责化验、生产质量的化验室主任和主管的副总经理，在明知该批假冒丙二醇“相对密度”不合格，并且公司检验设施不齐全，检验人员检验资质不全，没有做“鉴别”检验项目的情况下，违反药品生产质量管理规定，开具虚假的合格检验报告书，致使该批假冒丙二醇被投入公司生产。

�　此外，作为公司“一把手”的尹家德，主管公司的全面工作，在明知本公司绝大多数检验人员检验资质不全的情况下，对公司的物料采购、药品生产等生产活动的管理严重不负责任，致使上述假冒丙二醇被顺利投入生产。

2012-6-2732007年8月8日上午，广州市中级人民法院公开开庭审理本案刑事部分。

广州市人民检察院以重大责任事故罪对“齐二药”公司总经理尹家德，副总经理朱传华、郭兴平，化验室主任陈桂芬，药品采购员钮忠仁提起公诉。

道德职责风险2012-6-274齐二药事件�广州中山大学附属第三医院多名患者离奇死亡，经检测，患者所使用的由“齐二药”生产的亮菌甲素注射液中含有致命的二甘醇。

�丙二醇与二甘醇�药检所的突破口—红外光谱鉴别2012-6-2752012-6-2762012-6-277红外光谱测定注意事项及定性分析2012-6-278�红外光谱基本概念�样品制备及注意事项�定性分析2012-6-279一、红外光谱基本概念1、红外光谱又称分子振动转动光谱，属分子吸收光谱。

样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收其中一些频率的辐射，分子振动或转动引起偶极矩的变化，使振-转能级从基态跃迁到激发态，相应于这些区域的透射光强减弱，记录百分透过率T%(或吸光度）对波数或波长的曲线，即为红外光谱。

UV—分子外层价电子能级的跃迁（电子光谱）IR—分子振动和转动能级的跃迁（振转光谱）2012-6-2710红外光谱产生的条件1.分子吸收红外辐射的频率恰等于分子振动频率整数倍2.分子在振、转过程中的净偶极矩的变化不为0， 即分子产生红外活性振动2012-6-27112012-6-2712透光率： 是红外光透过样品光强与红外光透过背景光强的比值，用百分数表示，吸光度是T 的负对数。

一般科学论文中以吸光度表示。

波数与波长换算公式：T (%))(/10)(41~m cm µλν=−ν红外光谱图谱处理：基线校正，校正背景漂移100%、扣除背景（药典法）、通过计算消除水峰。

平滑降供低噪声改善形状等2、红外光谱的表示方法2012-6-2713红外光谱(0.75~1000µm )远红外(转动区)(25-1000 µm)中红外(振动区)(2.5~25 µm)近红外(泛频）(0.75~2.5 µm)倍频分子振动转动分子转动分区及波长范围分区及波长范围 跃迁类型跃迁类型（常用区）13158~4000/cm -1400~10/cm -14000~400/cm -13、红外光区划分4、特点�药典所说的红外区实为中红外(振动区)(2.5~25 µm、4000~400/cm-1))，是分子吸收能量产生的振动能级的4000~400/cm-1跃迁，所产生的振动光谱。

�红外光谱（IR），是确定分子组成和结构的有力工具。

主要用于化合物鉴定及分子结构表征，亦可用于定量分析。

（与NMR、UV、MS并称四大光谱）�根据光谱中吸收峰的强度、位置和形状，可确定分子中包含哪些基团（官能团）�优点：灵敏度高、波数准确、重复性好2012-6-27145、红外吸收峰的位置：取决于各化学键的振动频率�键的振动频率与组成化学键的原子的质量和化学键的性质有关�成键原子的质量越小，吸收峰的波数就越高�键长越短，键能越高，吸收峰所在的波数也越高2012-6-2715�基频峰�分子吸收一定频率红外线，振动能级从基态跃迁至第一振动激发态产生的吸收峰（即V=0 → 1产生的峰）�基频峰的峰位等于分子的振动频率�基频峰强度大，是红外主要吸收峰2012-6-2716�泛频峰�分子的振动能级从基态跃迁至第二振动激发态、第三振动激发态等高能态时所产生的吸收峰�（即V=1→V=2，3- - -产生的峰）�泛频峰强度较弱，难辨认→却增加了光谱特征性2012-6-27172012-6-2718指纹区（可分为两个区）单、双键伸缩振动（不含氢）18001800--900900 C -O （13001300--1000） C -(N 、F 、P )，P -O ，S i -O 面内外弯曲弯曲振振动 900900--650650 用于顺反式结构结构、、 取代类型的确定2012-6-27195、红外光谱的吸收强度•峰强度可用很强（vs）、强（s）、中（m）、弱（w）、很弱（vw）等来表示。

•基线：透光率90%左右，最大峰：透光率10%左右。

2012-6-2720红外光谱红外光谱仪的保养和维护仪的保养和维护�仪器安装：� 电源：220V，火、零、地三相电源，并安装磁力启动器。

如无规范的地线应单独安装，要求接地良好，电阻在1 Ω ， 以下最好配稳压电源。

�环境：温度17--27℃ ，相对湿度50%左右，湿度太低易产生静电，太高仪器部件易损。

注意防尘，地面不宜铺地毯并与化学实验室分开，防止卤化物进入。

�实验台应结实、牢靠，防止长期放置产生变形弯曲，仪器后留一定空间，离墙壁0.5米以上仪器及其校正�色散型红外分光光度计或傅里叶变换型红外光谱仪�应对仪器定期进行校正检定：按现行国家质量与核查技术监督局“傅里叶变换红外光谱仪检定规程”和《中国药典》附录规定，并要参考仪器说明书�用聚苯乙烯薄膜（厚度约为0.04mm）校正2012-6-27212012-6-27223027cm-1、2851cm-1、1601cm-1、1028cm-1、907cm-1项目波数准确度波数重现性波数范围3000附近1000附近4000～400（㎝-1）允差≤±5≤±1≤±2（㎝-1）2012-6-2723�在3110㎝-1～2850㎝-1应能显示7个吸收带�其中峰2851㎝-1与谷2870㎝-1之间的分辨深度应不小于18%透光率；（透光率差值）�峰1583㎝-1与谷1589㎝-1之间的分辨深度应不小于12%透光率。

�仪器的标称分辨率，不低于2 ㎝-12012-6-27243500.034003200300028002600CM-12012-6-2725红外光谱仪的日常管理1、电源通电15分能量就能达到最高，开机30分即可测试样品，减少开关机次数，下班后关机切断电源。

2、控制空气湿度，特别夏天，致少每周开机几小时，如天天使用，即使空气湿度大，对仪器也不会造成影响。

3、红外光谱仪除样品舱外，其余部分为密闭体系，并安装有干燥剂除湿，要经常观察干燥剂的颜色，及时处理和更换失效的干燥剂。

样品舱中放干燥剂，并经常于120 ℃ 干燥，放至室温后放入样品舱。

4、发束器和检测器最容易损坏，由于含有溴化钾或碘化铯结晶最怕潮气，一定要保持光学部分的干燥剂处于有效状态。

分束器不要轻易取出，光学台定期用干燥的氮气或空气吹扫2012-6-2726二、样品制备及注意事项对固体、液体、气体样品，对单一组分的纯净物和多组分混物都可用红外光谱法测定不同的样品采用不同的制样技术，同一样品采用不同的制样技术，可能会得到不同的光谱.化合物的红外光谱图的特征谱带的频率、强度和形状会随着测定的状态、制样方法而发生变化。

要得到一张高质量的光谱图，除优良的仪器，选用合适的制样方法，制样技术和技巧也非常重要。

可能相同的样品，采用相同的制样方法，不同的实验者制备的样品测定的光谱差别很大。

2012-6-2727红外样品的制备固体样品： 压片法、糊状法、溶液法、薄膜法液体样品的制备：溶液法、成膜法气体样品的制备：充入气体样品槽。

药品检验中最常见为固体样品压片法2012-6-27282012-6-2729固体样品的制备---压片法�压片法需稀释剂（KBr 或kCl ）、玛瑙研钵、压片磨具和压片机�取供试品1-1.5mg ，置玛瑙研钵中，加入干燥的稀释剂细粉约200--300mg （为200：1），充分研磨均匀，置压片机中，使铺布均匀，抽真空2分钟，加压至8—10T/cm 2，保持压力2分钟撤去压力并放气后取出制成的供试片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品。

亦可采用其它直径的压模制片， 样品与分散剂的用量需相应调整以制得浓度合适的片子。

�切记：溴化钾对钢制模具表面的腐蚀性很大，模具用过后必须及时清洗干净，然后保存在干燥环境中。

压片机压片模具2012-6-2730注意事项�为了保证一次成功，粉未用天平称量，特别是1mg的样品，非结晶粉未轻，结晶粉未重。

量太少光谱吸收度太低，信燥比不能满足要求，水汽峰干扰严重；量大，会有全吸收；最强吸收峰吸光度在0.5—1.4（透射率约4%---30%）。

�含强极性基团的样品，如含羰基化合物，特别是脂肪酸类；氰根化合物，碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐，样品只需取0.5mg左右。

�溴化钾取150mg为宜，太少易碎，太多不易透明。

潮湿的样品需真空或40 ℃烘箱干燥后方可压片�极易吸潮的样品不能用KBr压片法�易由固变液的样品不能用KBr压片法2012-6-27312012-6-2732注 意 事 项�分析纯溴化钾可满足测试要求�溴化钾易吸潮，用前至少需经溴化钾易吸潮，用前至少需经120 120 ℃干燥干燥44小时，并置于干燥器中保存。

�新购的溴化钾，经空白片测定，其光谱图中未有杂质吸收峰即可使用�溴化钾烘干前应研磨至溴化钾烘干前应研磨至2.52.5μ m m以下，颗粒大小在以下，颗粒大小在以下，颗粒大小在2.5---252.5---25 μ m,m,会引起散射，会引起散射，供试品研磨应适度，通常以粒度2～5μm 为宜。