实验1 细胞凝集反应
（赵海泉主编基础生物学实验指导细胞生物学分册中国农业大学出版社2008.8.）
一、实验目的与原理
1．目的
学习植物凝集素的提取方法，观察红细胞凝集现象。

2．原理
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为细胞间的联系和识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素（1ectin）是一类含糖并能与糖专一结合的蛋白质（少数例外），它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

二、实验用品
1．材料
土豆块茎，兔血。

2．试剂
0.9 % NaCl溶液，PBS缓冲液（称取7.2 g NaCl、1.48 g Na2HPO4、0.43 g KH2PO4。

加蒸馏水定容至1 000 mI，pH 7.2）。

3．器材
离心机，显微镜，天平，注射器，6号针头，载玻片，容量瓶，滴管，离心管等。

三、实验内容与操作
（一）提取凝集素
称取土豆去皮块茎20 g，加100 ml PBS缓液，浸泡2 h，将浸出的粗提液过滤，即为可溶性土豆凝集素提取液。

（二）制备2%的红细胞悬液
以无菌方法抽取兔静脉血液（加抗凝剂）2 mI。

加8 mL 0.9 % NaCl溶液，
以2 000 r/min离心5 min，去掉上清液，再加0.9 % NaCl溶液至10 ml，反复洗涤5次。

最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液。

（三）凝集反应
用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各1滴，置载玻片上，充分混匀，静置20 min后于低倍显微镜下观察血细胞凝集现象。

四、注意事项
1．若沉淀压积的红细胞暂时不用，应将其4℃保存。

下次使用前，先洗涤再用生理盐水配成2%红细胞悬液。

2．以PBS液加2%血细胞液作对照实验。

五、作业与思考题
1记录血细胞凝集情况。

2实验课程感想或感受。

教学内容：
1实验室安全教育。

2教学方法改革。

创新小导师制
3实验报告写作要求
4本次实验内容讲解。

知识点：
实验动物知识。

采血操作。

凝集素。

显微镜。

记录方法。