玻片、接种环、酒精灯。
NS+伤寒杆菌
诊断血清+伤寒杆菌
轻摇玻片1-2分钟，观察结果。
结果：对照侧——均匀混浊状；
试验侧——乳白色凝集块（阳性）； ——均匀混浊，不出现凝集（阴性）；
对照侧、试验侧均出现凝集，为自凝。
2.试管法凝集试验
【原理】用定量抗原悬液与一系列的待检血清混合，静 置后，根据每管内颗粒抗原凝集的程度，以判断待检血清 中有无相应抗体及其效价。
实验方法
1
23
4
5
② 待测血清
弃掉
0.5
6
①NS
0.5ml 0.5 0.5 0.5 0.5
00.5.5ml 00.5.5ml 00.5.5ml 00.5.5ml 00.5.5ml
0.5
③ 灭活的伤 寒O菌液
5滴
5滴 5滴
5滴
5滴
5滴
抗体稀释度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 对照管
医学免疫学实验课要求
一、严格遵守实验室规则。 二、实验前做好预习，做到心中有数。 三、示教的实验要仔细观察，联系有关理论积极思考。 四、认真分析实验结果，探讨实验原理，得出可能的结 论。若实验结果与理论不符合时，要加以分析讨论，以逐 步提高自己的科学思维能力。 五、实验课后，须按时按要求递交实验报告。 六、防止发生各种事故。
实验预期结果
上清
沉淀
清亮
大的凝集块
轻度混浊
大多凝集管底
中等混浊
小、部分凝集块
混浊
很小的凝集颗粒
与对照相同
无凝集现象
凝集程度 ++++ +++ ++ + -
管底沉淀 凝集程度
效价
最高稀释比例
待测血清的滴度
2.试管法凝集试验
效价（滴度）的判定： 产生明显凝集反应（++）的最高血清稀释度为血清 中所测抗体的效价。 • 效价愈高，表示血清中所含该抗体愈多。 • 如血清的最低稀释度仍无凝集，或血清效价低于1：80 ，则为阴性，应报“<1：80”； • 如果血清的最高稀释度1：1280仍呈“++”或更强凝集， 则血清效价应报“>1：1280”。
实验室规则
一、爱护公物，节约使用实验材料。 二、进入实验室必须穿实验服，必要的文具应放在抽屉 里，个人物品如书包、衣物等一律不得带入实验室。 三、用过的滴管、玻片等器材，应放在指定的地方。 四、实验完毕，应清理桌面，把用过的物品放回原处。 五、值日生负责整理清洁实验室，关好水、电、门、窗。 六、未经许可，不得将实验室内任何物品带出室外。
阴性对照孔应呈均匀乳状，不凝集。 左侧在3min内有清晰凝集者为（+），不出现清晰 凝集者为（—） ，阴性者ASO≤250IU/ml。
待检血清1滴
溶血素“O”1滴
生理盐水1滴
溶血素“O”致敏胶乳1滴
玻片法凝集现象
的结构互补性。
概述
一、抗原抗体反应的原理和特点
1.原理 2.特点
• 高度特异性 • 表面可逆性结合 • 可见性反应需一定条件
AgAb比例、温度、电解质、pH值、时间
抗原抗体比例对反应现象的影响
抗原抗体反应优势：
①用已知抗原检测未知抗体 ②用清学试验
二、间接凝集反应
将可溶性抗原（或抗体）先吸附于与免疫无关的载 体颗粒（如红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒等）表面，使之 成为致敏颗粒，然后再与相应的抗体（或抗原）作用， 并在电解质存在的适宜条件下，出现凝集的现象。
1.间接凝集抑制试验
将待测抗原与特异性抗体先行混合并作用一段时间， 再加入相应致敏载体悬液，若待测抗原与抗体对应，即 发生中和，不再与致敏载体发生凝集，出现凝集抑制现 象被抑制。
特异、敏感、快速、简便
抗原抗体反应的基本检测方法
根据抗原物的性质、出现结果的现象、参 加反应的成分不同，可将抗原抗体反应分为:
•凝集反应 •沉淀反应 •补体参与的反应 •免疫标记技术
实验一 凝集反应
（agglutination reaction)
颗粒性抗原(红细胞、细菌等)与相应抗体特 异结合后，在一定条件下出现肉眼可见的凝集物。
材料：诊断伤寒H菌液 、待检血清用生理盐水1：20稀 释、生理盐水
小试管、试管架、吸管等。
2.试管法凝集试验
方法： （1）取洁净试管6支列于试管架上，依次编号。 （2）每管内加入0.5mL生理盐水。 （3）吸取待检血清0.5mL加入第1管，连续倍比稀释 到第5管。从第5管吸出0.5ml弃去。第6管为对照管。 这样从第1管至第5管的血清稀释度为1：40,1：80,1 ：160，1：320,1：640. （4）每管加入诊断菌液5滴，摇匀。 （5）置37 ℃24h或52℃约1h后，观察结果。
1.间接凝集抑制试验
2.抗“O”试验
【原理】在受检血清标本中，加入溶血素“O”致敏的 胶乳试剂反应，如标本中含有高单位抗体，可出现清晰 而均匀的凝集颗粒。
试剂：ASO胶乳试剂、待检血清、双凹玻片、滴管、 生理盐水。
2.抗“O”试验
方法： （1）在右侧中加生理盐水1滴,在玻片左侧内加待检血清 1滴， （2）加溶血素“O”致敏胶乳1滴，混匀，再连续缓慢摇 动3min。观察结果。 结果：
目录
概述
实验一 凝集反应 一、直接凝集反应 二、间接凝集反应
•目的要求
实验报告内容
1.实验题目 2.实验目的 3.实验原理 4.实验材料 5.实验方法 6.实验结果 7.分析、讨论（占30分）
实验目的
熟悉抗“O”试验原理、结果观察及临床应用 。
概述
一、抗原抗体反应的原理和特点 1.原理
抗原决定基（表位）与抗体的CDR之间
包括：直接凝集反应
间接凝集反应
一、直接凝集反应
颗粒性抗原(红细胞、细菌等)与相应抗 体直接结合出现的凝集现象。
一、直接凝集反应
1.玻片法凝集反应 定性，常用于病原菌的鉴定及分型、
人类ABO血型鉴定等。
2.试管法凝集试验 定量，如诊断伤寒、副伤寒的肥达试
验等。
1.伤寒杆菌的血清学鉴定
材料：伤寒杆菌培养物，沙门菌属多价诊断血清，NS、
彻底混匀
④
52℃, 1h
2.试管法凝集试验
结果：
先观察对照管，应无凝集现象。 “++++” —细菌全部凝集，液体清澈，管底形成大片凝集物。 “+++” —细菌大部分凝集，液体澄清，管底明显凝集物。 “++” —细菌部分凝集，液体半澄清，管底有明显凝集物 “+” —少量细菌凝集，液体较混浊，管底少量凝集物。 “-” —液体混浊，细菌无凝集。与对照管相同。