避免伤及血管；印片时避免印到肝脏上； • 瑞氏染液与蒸馏水等量，染液完全覆盖印迹，并防止干片； • 显微镜的使用。 1. 用品放入指定地点，注意个人防护。
【实验步骤】
Mouse handling and manual restraint 小鼠固定方法
Intraperitoneal inje学院免疫学教研室
实验室规则
1.穿好隔离衣。
2.保持肃静和秩序，少说、多做、多想。
3.禁止饮食、吸烟，上课时关闭通讯工具。
4.用过的实验材料，放于指定地点，不得随意抛置。
5.注意节约实验试剂，爱护实验器材（显微镜的使用）。
6.易燃物品（如酒精等）不准接近火源。
7.实验结束后，将实验台整理清洁，值日同学打扫好室内
兔抗羊红细胞抗体（溶血素）制备方法
日期（天） 第1天
途径
皮内
抗原
全血
剂量（mL） 0.5
第3天 皮内 全血 1.0
第5天 皮内 全血 1.5
第7天 皮内 全血 2.0
第12天 第15天
静脉
静脉
20%悬液 20%悬液
1.0
2.0
【实验步骤】
（二）心脏采血
1. 固定家兔，用碘酒、酒精消毒心前区皮肤。 2. 胸骨左缘外侧1-2cm左右、3-4肋间，（胸骨中
线中段略偏左处），选择心跳最明显处垂直进 针。 3. 注射部位正确时，血液会自动涌入针管。缓慢 抽出所需血量，体重2kg左右的家兔，一般每次 可采血4~5ml 。
注意事项
•取血部位要准确，不要划破家兔心脏，尽量不 令动物死亡； •见到回血再取血； 1.向试管中注射血液时要将针头取下。
实验报告
• 吞噬细胞吞噬功能检测的原理、步骤及镜下观察结果； （瑞氏染色 观察倍数）
大吞噬细胞：单核、巨噬细胞（长寿） 小吞噬细胞：中性粒细胞（短寿）
【实验材料】
• 动物：小白鼠。 • 试验器材：剪刀、镊子、注射器、解剖板、瑞氏染
液、载玻片、显微镜等。 1. 抗原：白葡菌菌液。
【实验步骤】
1. 取已注射过淀粉肉汤的小白鼠一只，取白葡菌菌液 0.5ml注入其左下腹腔，轻揉腹部。
2. 30min后，将小白鼠拉颈处死，固定，打开腹腔，用 玻片在暴露的肠管上印片，自然晾干。
3. 滴加3～5滴瑞氏染液于印片上，15秒后加等量蒸馏水 ，混匀染色3min（一直保持湿润）。自来水冲洗，滤 纸吸干。
4. 显微镜下观察。 5. 交回实验器材，最后将小鼠，玻片弃掉。
【注意事项】
• 小鼠的抓法，拉颈处死手法，不能伤害动物； • 右侧腹腔注射易伤及肝脏；开腹时正中皮肤剪开，沿腹白线，
• 动物：家兔。 • 实验器材：剪刀、无菌试管、注射器、酒精棉球等。 1. 抗原：绵羊红细胞。
注射
绵羊血红细胞
【实验步骤】
（一）免疫注射 1.备皮：家兔背部剪毛。 2.消毒：碘酒棉球、酒精棉球。 3.抽取0.5～1.0mL绵羊红细胞悬液，在瓶内排出气 体。 •针头斜面向上，刺入皮内后平行进针使针头没入 ，推注0.05 ～ 0.1ml羊红细胞悬液。6～7点注射。
卫生并检查水、电等开关是否关好，离开实验室要关好门
窗。
8.认真书写实验报告！
请养成良好的习惯
实验目的和要求
【目的】
1. 掌握免疫学的基本实验方法和操作技术。 2. 通过讨论和实验结果分析，培养科学思维方法，提高独立工作能力。
【要求】
1. 课前做好预习，明确实验目的、原理、方法及操作中的注意事项等， 避免和减少发生错误。
----家兔皮内注射羊红细胞悬液 ----家兔心脏采血
【目的要求】
• 掌握免疫血清制备的基本原理，熟悉其基本 操作手法。
1. 掌握吞噬细胞吞噬功能检测的基本原理，熟 悉其基本操作手法。
Part I 吞噬细胞吞噬功能检测 【原理】
体内的吞噬细胞具有吞噬大颗粒异物的特性，在趋化因 子的作用下可到达炎症部位，对细菌等异物进行吞噬和消化。
2. 实验过程中必须持严肃认真的态度，善待实验动物。 3. 仔细地观察并真实地记录实验结果，科学分析，得出恰当结论。 4. 独自认真完成实验报告，字迹清楚，语言简练，表格清晰，画图应
力求反映实物标本的原状。 – 切实遵守实验室规则。
实验一
Part I 吞噬细胞吞噬功能检测 Part II 免疫血清的制备与应用（一）（二）
清中含有特异性抗体（抗羊红细胞抗体、溶血素）。
优质免疫血清的产生，主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及 动物的应答能力。此外，尚需考虑免疫途径、抗原剂量、注射次数、 时间间隔、有无佐剂等因素。
B细胞
流程
制备抗原
浆细胞 免疫动物
抗体（Ab、溶血素） ？
采血、分离血清
分装、保存
纯化、鉴定
【实验材料】
1. 免疫血清的制备与应用：免疫注射、心脏采血。
值日
请排好值日生，清理实验桌面，清理显微镜，关掉显微镜开关。
医学免疫学实验报告
班 级 2014级× 专业× 班
姓名
学号 实验室号 上课周次 上课时间 带教老师
4 4、7、12、14
周×下午
、、、
实验报告装订成册，以 实验室为单位于指定时 间交到21206（ 21207 、 21208）房间。
下次实验内容
凝集反应 直接凝集反应
ABO血型鉴定 沉淀反应
对流免疫电泳
免疫器官的组织结构观察
The End
Thanks For Your Attention
【实验结果】
红细胞 巨噬细胞
单核细胞
淋巴细胞 巨噬细胞吞噬现象（瑞氏染色，10×100）
Part II 免疫血清的制备与应用＊
【原理】
----免疫注射、心脏采血
将适当的抗原物质注入动物体内，经过一定时间后，
动物血清中可以产生大量的特异性抗体，这种含有特异性
抗体的血清称为免疫血清。
取羊红细胞免疫家兔一只，心脏采血，分离血清，血
【实验步骤】
【实验步骤】
【实验结果】
1. 巨噬细胞的吞噬现象：油镜下可见大量巨噬细胞，胞浆 内数量不等的蓝色细菌。淀粉肉汤已经注射2~3天，游走 至肠管外的中性粒细胞因为寿命短多已死亡。
2. 计算：
吞噬百分率＝
吞噬有细菌的吞噬细胞 100个吞噬细胞
×100％
吞噬指数＝ 100个吞噬细胞中所吞噬的细菌总数 100