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植物病原细菌研究方法 ppt课件

除了球菌、杆菌、蛆旋菌三种基本形态外,还有许多 具其他形态的细菌。例如柄杆菌细胞上有柄、菌丝、附 器等细胞质伸出物,细胞呈杆状或梭状,并有特征性的 细柄;球衣菌能形成衣峭,杆状的细胞呈链状排列在衣 鞘内而成为丝状,而支原体由于只有细胞膜,没有纫胞壁, 故细胞柔软,形态多变,具有高度多形性。另外,人们 还发现了细胞呈星形和方形的细菌。
细菌的三种基本形态: 球状、杆状和螺旋状
1. 球 菌
单球菌
双球菌
链球菌四联球菌ຫໍສະໝຸດ 八叠球菌葡萄球菌2.杆菌
杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同, 菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。
杆菌的形态:短杆状、长杆状、棒杆状、梭 状、梭杆状、月亮状、分枝状、竹节状等;按 杆菌细胞的排列方式则有链状、栅状、“八” 字状以及有鞘衣的丝状等。
2.杆 菌
短杆菌
长杆菌 梭状芽孢杆菌
2.杆 菌
单杆菌
链状杆菌
2.杆 菌 杆菌细胞两端的形态特征
3、螺旋菌
螺旋状的细菌称为螺旋菌。 根据其弯曲情况分为: 弧菌:螺旋不满一圈,菌体呈弧形或逗号形
例:霍乱弧菌、逗号弧菌 螺旋菌:螺旋满2—6环,螺旋状
例:干酪螺菌 螺旋体:旋转周数在6环以上,菌体柔软。
①革兰氏染色法:
革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法,由丹麦
医生Hans Christian Gram于1884年创立。
基本步骤: 涂片固定—— 结晶紫初染1min—— 碘液媒染
1min——95%乙醇脱色0.5min—— 番红复染 min 结果:
革兰氏阳性菌——紫色; 革兰氏阴性菌——红色。
实验材料
1500个大肠杆菌头尾相接等于3mm;
109个大肠杆菌重1 mg.
由于菌种不同,细菌的大小存在很大的差异;对于同一 个菌种,细胞的大小也常随着菌龄变化。另外,对于同一 个菌种染色前后其细胞大小都有所不同。所以,有关细菌 大小的记载,常是平均值或代表性数值。
细菌细胞的大小
菌名
乳链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 霍乱弧菌
直径或宽×长 ( μm × μm )
0.5 ~1 0.8 ~1 0.5 × (1 ~3) (0.8 ~1.2) ×( 1.2~3) (0.2 ~ 0.6) ×(1 ~ 3)
(二)、 细菌的形态
不同细菌的形态可以说是千差万别,丰富多彩,但就 单个有机体而言,其基本形态可分为球状、杆状与螺旋 状三种.
植物病原细菌的革兰氏染色
(细菌的革兰氏染色反应是细菌分类鉴定的一个重要特征)
细菌细胞壁的结构
❖革兰氏阳性菌细胞壁:由肽聚糖和磷壁酸组成
磷壁酸:占40%。G+
菌所特有,其主链由数十 个磷酸甘油或磷酸核糖 醇组成,有的还有由D— Ala和还原糖组成的侧链。
肽聚糖:
占30~70% ,不同菌种中肽 聚糖(肽链)组分不同。
第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反 应;
G+ 菌:细胞壁厚,肽聚糖含量高,交联度大,当乙醇脱色 时,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故结晶紫-碘复合物被阻留 在细胞内,细胞不能被酒精脱色,仍呈紫色;
Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩, 因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物 溶出细胞壁,酒精将细胞脱色,细胞无色,沙黄复染后呈红 色。
毛发状的结构。 鞭毛具有运动功能,一般认为鞭毛靠鞭毛丝旋转而 动,它们是细菌的“运动器官”。
植物保护学研究方法系列专题
植物病原细菌研究方法
内容提纲:
➢ 细菌的基本形态特征 ➢ 常规细菌生理生化检测方法 ➢ 细菌种类鉴定方法 ➢ 植物病原细菌检测和细菌病害诊断方法 ➢ 有益细菌的利用研究
细菌的基本形态特征
细菌(bacteria)是单细胞原核微生物, 个体微小,形态简单,以二等分裂方式繁殖。 在自然界中,细菌分布最广、数量最多。
例:梅毒密螺旋体
3、螺旋菌
弧菌
螺旋菌
螺旋体
细菌的特殊形态: 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细
菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘 细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。
细菌的特殊形态
二、细菌的细胞结构
基本结构包括: 细胞壁、细胞膜、细胞质、核区、 间体、核糖体、气泡和储藏物。 特殊结构包括: 荚膜、鞭毛、纤毛、芽孢。
①革兰氏染色法
阳性菌 阴性菌
革兰氏染色阴性——大肠杆菌
革兰氏染色阳性——枯草芽孢杆菌
注:
(1)、实验细菌为活跃生长期的培养物; (2)、菌液不能太浓,涂片不宜过厚,造成假阳性; (3)、火焰固定涂片,以载玻片不烫手为宜; (4)、脱色时间把握好,过长,假阴性;过短,假阳性。
✓细菌鞭毛染色
鞭毛:某些细菌表面由细胞内生出的细长、波曲、
待测细菌 枯草芽孢杆菌(G+) 甘蓝黑腐病菌(G-) 染液:结晶紫草酸铵染剂、鲁戈尔碘液、复染剂(番红O) 用具:移植饵、清洁无脂载玻片
示范图
清洁无脂载玻片
阳性对照菌
(紫色或蓝黑色)
待测菌
阴性对照菌
(红色)
对照菌呈现正确颜色,实验才为成功
简单染色
制备涂片标本→染色
涂片
干燥
固定
镜检
水洗、吸干
染色1min
细菌的形态和大小 细菌的细胞结构 细菌的繁殖与群体形态
(一)细菌的大小
细菌大小的测定: (1)测量: 测微尺
(2)长度单位:微米(μm)
(3)表示:
球菌:直径 杆菌: 宽×长 螺菌: 宽、长、螺距
通常球菌直径:0.2 — 1.5 μm,
杆菌:长1— 5 μm, 宽0.5— 1 μm。
例如:大肠杆菌:平均长度:2 μm ; 宽度0.5μm
细菌细胞结构
1.固体斜面培养
2. 液体培养基
3. 半固体培养
植物病原细菌概述
绝大多数为好气性细菌;生长温度大多为2528℃,少数可以20℃或在35℃中(如青枯菌) 生长。
植物病原细菌都不产生芽孢,因此对高温比较 敏感,一般在50℃左右的热水中处理10分钟即失 活,适宜的pH为6-7。
常规细菌生理生化检测方法
❖革兰氏阴性菌细胞壁:分内壁层和外壁层。
外壁层:位于肽聚糖层的外
部。 脂多糖; 脂蛋白、
包括: 蛋白质层: 基质蛋白、 外壁蛋白;
磷脂.
内壁层:紧贴胞膜,仅由
1—2层肽聚糖分子构成,占细 胞壁干重5-10%,无磷壁酸。
❖革兰氏染色的原理
❖革兰氏染色原理:
第一步:结晶紫使菌体着上紫色;
第二步:碘和结晶紫形成大分子复合物,分子大,能被细胞 壁阻留在细胞内;
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