western 转膜条件蛋白来源：RAW264.7 总蛋白蛋白名称（可保密）：一些转录因子蛋白分子量：40~70 KDWB用膜类型、孔径：0.45 NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒流400 mA 转膜时间：60~90 minPS.其实吧，以我的经验来看，除非目的蛋白特别小，或者特别大，不然转膜时间真的不是那么重要，曾经因为失误，转了15 min 就拆下来了，但从丽春红染色来看，跟平常实验也没有太大的区别。
蛋白来源：内皮细胞总蛋白蛋白名称（可保密）：occludin & AKT 蛋白分子量：65 KD & 56 KDWB用膜类型、孔径：0.45 PVDF转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压100 V转膜时间：60~70 min设备名字是“ Bio-Rad mini ”。
蛋白来源：乳鼠心肌细胞和成年鼠心肌组织总蛋白和核蛋白蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：65 KD & 55 KDWB用膜类型、孔径：PVDF（预先用甲醇处理）转膜方式（恒压、恒流）：半干转恒压12 V 转膜时间：30-40 min 设备：“ Bio-Rad mini ” 建议：最开始做过湿转（过夜的那种），太费事费时，效果也不如半干转。
蛋白来源：293T 细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：95 KD & 35 KDWB用膜类型、孔径：PVDF转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压90 V-110 V ，控制电流不要超过300 mA。
转膜时间：70 min蛋白来源：肿瘤手术标本蛋白名称（可保密）：转录因子蛋白分子量：33 KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：350 mA 恒流转膜时间：150 min转膜设备：湿转Bio-Rad说明：相同条件曾用于数个30-70 KDa的蛋白，都能成功转上，不过没有试缩短时间效果如何；实验时没为转膜条件苦恼，倒是电泳时胶的浓度及时间根据不同分子量而有区别。
蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：smad3蛋白分子量：54 KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：350 mA 恒流转膜时间：150 min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：胰腺癌细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16 KDa and 42 KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：120 V 恒压转膜时间：90 min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：大鼠血管平滑肌细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：72 KD，42 KD 和22 KDWB用膜类型、孔径：一般的PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：湿转，恒流一张膜0.26 A，两张膜0.3 A。
转膜时间：90 min设备：“ Bio-Rad mini ”建议：转膜缓冲液最多用3次，最好现用现配，我们用的没有加SDS转的时候最好能用冰块一类的东西降一下温，这样转的效果要好一些，转的时候一定要把三明治每层之间的气泡除去，同时使滤纸大于膜，膜大于胶，以免烧坏电极。
蛋白来源：大鼠PBMC 蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：55 KDWB用膜类型、孔径：0.22的PVDF膜转膜方式（恒流）：湿转转膜时间：60-90 min设备：“ Bio-Rad mini ”建议：转膜液用过两三次之后转膜效果就很差了其它按照常规就好了其实0.22 的膜一般不怕转过头以我们的经验，转膜时间、电压其实也有很大范围的调整，并不是非要固定于哪一个最合适，曾经做过一张膜转，17 KD的和170 KD的，按照170 KD的条件，17 KD的转膜也很好的。
蛋白来源：人非小细胞肺癌细胞系蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：大于250 kDWB用膜类型、孔径：millipore PVDF 膜0.45 um转膜方式（恒压、恒流）：湿转，恒流0.3A。
转膜时间：180mi n设备：“ Bio-Rad ”建议：电转保持电压在70 V以上，保持低温，如果电压低过70就需要换缓冲液了。
蛋白来源：白血病细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：28 KDWB用膜类型、孔径：0.45的NC膜转膜方式（恒流）：湿转，90 min，0.25 A设备：“ Bio-Rad ”建议：海绵厚度要合适，一次转磨用的海绵太薄，导致三明治没夹紧，转膜后拿出来一看，marker都变得七扭八歪。
但是有前辈说垫的海绵太厚可能将胶压断，没经历过，不知道是不是会有这种情况。
蛋白来源：肿瘤细胞蛋白名称（可保密）：磷酸化蛋白蛋白分子量：10-200 KDaWB用膜类型、孔径：millipore PVDF 膜0.45 um转膜方式（恒压、恒流）：120 v恒压转膜时间：120 min转膜设备：湿转Bio-Rad建议：转膜缓冲液只用2次，基本都转上，5%BSA寸闭，减少背景。
蛋白来源：胰腺B细胞蛋白名称（可保密）：******蛋白分子量：90-130 KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：250 mA恒流转膜时间：150 min转膜设备：湿转蛋白来源：原核表达蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：38 KDWB用膜类型、孔径：0.45 NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压：100 V转膜时间：120 min蛋白来源：心脏蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：220 kDa , 130 kDa , 70 kDa , 41kDaWB用膜类型、孔径：PVDF转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：70 v120 min ，180 min，5-6 h转膜设备：伯乐湿转建议改进方向（可选）：40 kDa 一下，70 v ，60-90 min 足够，40-70 kDa 90-120 min 即可。
70-120 kDa ，70 v，120-180 min 足够，120-180 kDa ，180-240 min ，180 kDa 以上建议6 h。
蛋白来源：卵巢癌细胞膜蛋白蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：53 KDWB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45 um转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：80 V 100 min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：人宫颈癌HELA细胞总蛋白蛋白名称（可保密）：B -acti n蛋白分子量：42WB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45 um转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：50 4 h转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：脑组织蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16 KD、27 KD、32 KD、42 KDWB用膜类型、孔径：PVDF 0.22 um转膜方式（恒压、恒流）：半干转恒流1 mA/cm 2或2 mA/cm2 转膜时间：不定转膜设备：北京六一仪器建议：我共做了六个蛋白，所以总在想节约时间的方式。
在 预试时我会观察电压数与转膜效率的关系，所以我不会按时间来定何时转完，而是按电 压来定。
通过染胶来确定电压数与转移蛋白分子量上限的关系。
不用多浪费时间。
并且六一的半干转膜仪随着使用次数的增多, 转膜效率（尤其是使用后期）的关系并不稳定，单纯依靠时 蛋白来源：CHO cell 蛋白名称（可保密）：酶原 蛋白分子量：40 KDWB 用膜类型、孔径：0.22 的 PVDFM （ Biorad ）转膜方式（恒压）：100 V ，湿转，转膜时间：60 min 。
设备：Tanon （上海天能） 建议：1. 转膜液现用现配，用完倒掉。
2.转膜时间，电压可以适当调整。
分子量大或者小一些的蛋白，采用此条件一样转膜效 率很高。
蛋白来源：Hepg2蛋白名称（可保密）：EGFR 蛋白分子量：170kdWB 用膜类型、孔径：pvdf 0.45 转膜方式（恒压、恒流）： 24V转膜时间：2个半小时 转膜设备：伯乐半干转蛋白来源：肝癌细胞 蛋白名称：HIF-1 a 蛋白分子量：120 kDWB 用膜类型、孔径：NC 膜转膜方式（恒压）：80伏，湿转 转膜时间：150分钟 设备："Bio-Rad mini ”建 议：湿转，转膜液特别重要，否则会导致电压或者电流不稳影响转膜条带。
转膜均现配 先用，不重复利用。
转膜时间一般是 150分钟，80伏恒压。
经李春红染 色，靠近蛋白胶的一侧膜上蛋白染色深， 膜另外一面染色浅， 说明蛋白未转过。
该湿转条件自己做过的蛋白分子量范围：170-36 kD 。
蛋白来源：心肌细胞总和膜 蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：128 KD , 100, 60, 55, 43 KDWB 用膜类型、孔径：NC1 0.2 um转膜方式（恒压、恒流）：恒压 转膜时间： 70 V 200 min 转膜设备：湿转 Bio-Rad建议：转膜液最好现配现现用， 或配成母液，最好不重复使用，70 V 电压下，电流约154 mA 甲醇可以加到这样有的5分钟就转完了， 效率也会下降，所以时间和 间有时会有问题。
150 ml 。
对大分子量如200 KD 转膜时间延长6-8 h 。
蛋白来源：肺脏蛋白名称（可保密）：ICAM-1 蛋白分子量：85~110 KDWB用膜类型、孔径：0.22NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒流300 mA 转膜时间：120 min设备名字Bio-Rad mini一抗用的santa cruz 1 mL 包装的。
比例调整到1：800 做出很好的条带。
效价会一直降低的。
去年做的这个指标，今年夏天做就不行了。
蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16 KDaWB用膜类型、孔径：0.2 um PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：0.2 A 恒流转膜时间：65 min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：28 KDaWB用膜类型、孔径：0.2 umPVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：0.25 A 恒流转膜时间：60 min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：人肿瘤细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：80 KDWB用膜类型、孔径：0.45 um PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：半干转移系统恒流，勿超过0.85 mA/cm 2，同时转多张膜电流需累加（串联）转膜时间：60-90 min设备：Bio-Rad其实有些东西并不是非常严格的，要转移的目的蛋白分子量小，那么转移的时间就短一些，反之，则长一点；蛋白量充足，可以多转一会，蛋白量较少，则要少转一下，免得蛋白穿膜而过到了滤纸上而前功尽弃。
蛋白来源：人和鼠肝癌细胞总蛋白、胞浆、胞核蛋白蛋白名称（可保密）：*** 蛋白分子量：17--116 kdWB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45 um转膜方式（恒压、恒流）：恒流200 mA转膜时间：3 h转膜设备：湿转北京六一24D mini蛋白来源：CO COS7 293T 蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：80 72 56 52 48 25 18KDWB用膜类型、孔径：0.45 um PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：湿转90 V 电流约为230--280 mA 之间。