w e s t e r n转膜条件蛋白来源：RAW264.7总蛋白蛋白名称（可保密）：一些转录因子蛋白分子量：40~70KDWB用膜类型、孔径：0.45NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒流400mA转膜时间：60~90minPS.其实吧，以我的经验来看，除非目的蛋白特别小，或者特别大，不然转膜时间真的不是那么重要，?曾经因为失误，转了15min就拆下来了，但从丽春红染色来看，跟平常实验也没有太大的区别。
蛋白来源：内皮细胞总蛋白蛋白名称（可保密）：occludin&AKT蛋白分子量：65KD&56KDWB用膜类型、孔径：0.45PVDF转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压100V转膜时间：60~70min设备名字是“Bio-Radmini”。
蛋白来源：乳鼠心肌细胞和成年鼠心肌组织总蛋白和核蛋白蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：65KD&55KDWB用膜类型、孔径：PVDF（预先用甲醇处理）转膜方式（恒压、恒流）：半干转恒压12V转膜时间：30-40min设备：“Bio-Radmini”建议：最开始做过湿转（过夜的那种），太费事费时，效果也不如半干转。
?蛋白来源：293T细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：95KD&35KDWB用膜类型、孔径：PVDF转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压90V-110V，控制电流不要超过300mA。
转膜时间：70min?蛋白来源：肿瘤手术标本蛋白名称（可保密）：转录因子蛋白分子量：33KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：350mA恒流转膜时间：150min转膜设备：湿转Bio-Rad说明：相同条件曾用于数个30-70KDa的蛋白，都能成功转上，不过没有试缩短时间效果如何；?实验时没为转膜条件苦恼，倒是电泳时胶的浓度及时间根据不同分子量而有区别。
蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：smad3蛋白分子量：54KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：350mA恒流转膜时间：150min转膜设备：湿转Bio-Rad?蛋白来源：胰腺癌细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16KDaand42KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：120V恒压转膜时间：90min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：大鼠血管平滑肌细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：72KD，42KD和22KDWB用膜类型、孔径：一般的PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：湿转，恒流一张膜0.26A，两张膜0.3A。
转膜时间：90min设备：“Bio-Radmini”建议：转膜缓冲液最多用3次，最好现用现配，我们用的没有加SDS，转的时候最好能用冰块一类的东西降一下温，这样转的效果要好一些，转的时候一定要把三明治每层之间的气泡除去，同时使滤纸大于膜，膜大于胶，以免烧坏电极。
?蛋白来源：大鼠PBMC蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：55KDWB用膜类型、孔径：0.22的PVDF膜转膜方式（恒流）：湿转转膜时间：60-90min设备：“Bio-Radmini”建议：转膜液用过两三次之后转膜效果就很差了其它按照常规就好了??其实0.22的膜一般不怕转过头以我们的经验，转膜时间、电压其实?也有很大范围的调整，并不是非要固定于哪一个最合适，曾经做过??一张膜转，17KD的和170KD的，按照170KD的条件，17KD的转膜也很好的。
蛋白来源：人非小细胞肺癌细胞系蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：大于250kDWB用膜类型、孔径：milliporePVDF膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：湿转，恒流0.3A。
转膜时间：180min设备：“Bio-Rad”建议：电转保持电压在70V以上，保持低温，如果电压低过70就需要换缓冲液了。
蛋白来源：白血病细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：28KDWB用膜类型、孔径：0.45的NC膜转膜方式（恒流）：湿转，90min，0.25A设备：“Bio-Rad”建议：海绵厚度要合适，一次转磨用的海绵太薄，导致三明治没夹紧，转膜后拿出来一看，marker都变得七扭八歪。
但是有前辈说垫的海绵太厚可能将胶压断，没经历过，不知道是不是会有这种情况。
?蛋白来源：肿瘤细胞蛋白名称（可保密）：磷酸化蛋白蛋白分子量：10-200KDaWB用膜类型、孔径：milliporePVDF膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：120v恒压转膜时间：120min转膜设备：湿转Bio-Rad建议：转膜缓冲液只用2次，基本都转上，5%BSA封闭，减少背景。
蛋白来源：胰腺β细胞蛋白名称（可保密）：******蛋白分子量：90-130KDaWB用膜类型、孔径：PVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：250mA恒流转膜时间：150min转膜设备：湿转蛋白来源：原核表达蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：38KDWB用膜类型、孔径：0.45NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒压：100V转膜时间：120min蛋白来源：心脏蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：220kDa，130kDa，70kDa，41kDaWB用膜类型、孔径：PVDF转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：70v120min，180min，5-6h转膜设备：伯乐湿转建议改进方向（可选）：40kDa一下，70v，60-90min足够，40-70kDa90-120min 即可。
70-120kDa，70v，120-180min足够，120-180kDa，180-240min，180kDa以上建议6h。
蛋白来源：卵巢癌细胞膜蛋白蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：53KDWB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：80V100min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：人宫颈癌HELA细胞总蛋白蛋白名称（可保密）：β-actin蛋白分子量：42WB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：504h转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：脑组织蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16KD、27KD、32KD、42KDWB用膜类型、孔径：PVDF0.22um转膜方式（恒压、恒流）：半干转恒流1mA/cm2或2mA/cm2转膜时间：不定转膜设备：北京六一仪器建议：我共做了六个蛋白，所以总在想节约时间的方式。
在预试时我会观察电压数与转膜效率的关系，所以我不会按时间来定何时转完，而是按电压来定。
通过染胶来确定电压数与转移蛋白分子量上限的关系。
这样有的5分钟就转完了，不用多浪费时间。
并且六一的半干转膜仪随着使用次数的增多，效率也会下降，所以时间和转膜效率（尤其是使用后期）的关系并不稳定，单纯依靠时间有时会有问题。
蛋白来源：CHOcell蛋白名称（可保密）：酶原蛋白分子量：40KDWB用膜类型、孔径：0.22的PVDF膜（Biorad）转膜方式（恒压）：100V，湿转，转膜时间：60min。
设备：Tanon（上海天能）建议：1.?转膜液现用现配，用完倒掉。
2.?转膜时间，电压可以适当调整。
分子量大或者小一些的蛋白，采用此条件一样转膜效率很高。
蛋白来源：Hepg2蛋白名称（可保密）：EGFR蛋白分子量：170kdWB用膜类型、孔径：pvdf0.45转膜方式（恒压、恒流）：24V转膜时间：2个半小时转膜设备：伯乐半干转蛋白来源：肝癌细胞蛋白名称：HIF-1α蛋白分子量：120kDWB用膜类型、孔径：NC膜转膜方式（恒压）：80伏，湿转转膜时间：150分钟设备：“Bio-Radmini”建议：湿转，转膜液特别重要，否则会导致电压或者电流不稳影响转膜条带。
转膜均现配先用，不重复利用。
转膜时间一般是150分钟，80伏恒压。
经李春红染色，靠近蛋白胶的一侧膜上蛋白染色深，膜另外一面染色浅，说明蛋白未转过。
该湿转条件自己做过的蛋白分子量范围：170-36kD。
蛋白来源：心肌细胞总和膜蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：128KD，100，60，55，43KDWB用膜类型、孔径：NC膜0.2um转膜方式（恒压、恒流）：恒压转膜时间：70V200min转膜设备：湿转Bio-Rad建议：转膜液最好现配现现用，或配成母液，最好不重复使用，70V电压下，电流约154mA。
甲醇可以加到150ml。
对大分子量如200KD转膜时间延长6-8h。
蛋白来源：肺脏蛋白名称（可保密）：ICAM-1蛋白分子量：85~110KDWB用膜类型、孔径：0.22NC转膜方式（恒压、恒流）：湿转恒流300mA转膜时间：120min设备名字Bio-Radmini一抗用的santacruz1mL包装的。
比例调整到1：800做出很好的条带。
?效价会一直降低的。
去年做的这个指标，今年夏天做就不行了。
蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：16KDaWB用膜类型、孔径：0.2umPVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：0.2A恒流转膜时间：65min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：成纤维细胞蛋白名称（可保密）：蛋白分子量：28KDaWB用膜类型、孔径：0.2umPVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：0.25A恒流转膜时间：60min转膜设备：湿转Bio-Rad蛋白来源：人肿瘤细胞蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：80KDWB用膜类型、孔径：0.45umPVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：半干转移系统恒流，勿超过0.85mA/cm2，同时转多张膜电流需累加（串联）转膜时间：60-90min设备：Bio-Rad其实有些东西并不是非常严格的，要转移的目的蛋白分子量小，那么转移的时间就短一些，反之，则长一点；蛋白量充足，可以多转一会，蛋白量较少，则要少转一下，免得蛋白穿膜而过到了滤纸上而前功尽弃。
蛋白来源：人和鼠肝癌细胞总蛋白、胞浆、胞核蛋白蛋白名称（可保密）：***蛋白分子量：17--116kdWB用膜类型、孔径：PVDF膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：恒流200mA转膜时间：3h转膜设备：湿转北京六一24Dmini蛋白来源：COCOS7293T蛋白名称（可保密）：保密蛋白分子量：80725652482518KDWB用膜类型、孔径：0.45umPVDF膜转膜方式（恒压、恒流）：湿转90V电流约为230--280mA之间。
两张膜串联叠加。
转膜时间：40min设备：Bio-Rad法码西亚蛋白来源：人肿瘤细胞蛋白名称（可保密）：磷酸化蛋白蛋白分子量：30-60KDaWB用膜类型、孔径：pallNC膜0.45um转膜方式（恒压、恒流）：恒流0.85-1mA/平方厘米膜转膜时间：60-90min转膜设备:北京六一半干转建议：转膜缓冲液用新鲜配制的，可先配成2倍的母液，转膜液的多少会影响电转的效率，一般将吸水纸润湿即可，不要和膜一起浸泡，这样效果很好。