1•操作台基本要求:S ii. ⅛⅛*SΛl-≤手的工作A通冈禹基也布局α *!!崗左芋£丄fTAβ^WLJt禺整丄fl-⅛⅛' 上豹品矿播班苗2•随着传代次数的增加，连续培养细胞系遗传物质不稳定，不得将细胞存放于-20C 或-80C冰柜中，因为细胞存在次低温条件下活力迅速降低。

3.细胞污染：(1)细菌污染A S佛3相差&Λ凰示旳螯主长的丄S ⅛⅛tfΛ⅛t i li⅞⅛- 1EfeS¾⅛T可见Iii垦壬庭司的区14存査■ ⅛⅛S⅛⅛⅛⅛⅛^ffi⅛1但是⅛<⅛≡TSS⅛CAffiJ*贩色育框重∣⅛总一步施大后可快显示出吿个址≠÷aw. Ii垒空魁兰第为聊秋” ⅛2∣ιmtt.直轻国口μru SA申黑鱼方滙的巷边怅度国为t∞μ∏ι.(2)酵母污染阴站.M栢差圉煙昱示J½壁增齐的23」迄無蛍醉母污果・陌集的H*⅞⅛ffl胞呈髓兀电貶也⅛⅞!⅛⅛⅛生屮转Ke e JH* I(3)霉困污染初期PH值维持稳定，污染严重后PH值迅速升高，导致培养基浑浊。

(4)病毒污染一般不会对与其宿主物种不同的细胞培养物造成不良影响，通过电子显微镜检查、一组抗体的免疫染色，ELISA实验或者采用适当病毒引物的PCR技术可以检测出细胞为病毒污染。

(5)支原体污染唯一检测支原体污染的方法是采用荧光染色、ELISE PCR免疫染色、放射自显影4.抗生素只能作为对付污染的最后手段而且只能短期使用，并应尽快撤出5 •适合贴壁的细胞和悬浮的细胞6.基础培无血清培养基7.PH值：大多数正常哺乳动物细胞系PH为7.4; 成纤维细胞系适合轻度偏碱（pH747∙7）Sf9和sf21等昆虫细胞系最适合在PH值为6.2的环境中生长8.温度：大多数人和哺乳动物细胞系在36C至37C最佳昆虫细胞在27C为最佳禽类细胞在38.5C最佳冷血动物（15C -26C）9.动物细胞形态划分：成纤维细胞，贴附生长上皮样细胞呈多角形，贴附淋巴母细胞样细胞呈球形，不贴附特殊形态：I型有长突触U型没有轴突10.细胞增长模式天数 倒芥宰庖比⅛ι⅞⅛.长議式稱.Jt 半时數囲显示了毛部戛厦与皓齐IrrNKlf 厂up -：秆范両坝通臂质斡耗 ⅛⅛⅛tf⅛m⅛* ⅛S⅛⅛ΦJ63E→⅛K⅛⅛½⅛ff≡, ftHfr⅜∣aft⅛¾≡tt.处于楚曲养网.⅛⅛a⅛κ 旬也花的农査.延粛踊赶肓悬对am⅛nfr⅛iH⅛⅛⅛⅛f⅛a.溝継生長JaIHi 中的营养靠.⅛sf 有生壬培那臺 ⅛⅛ft^ （Sp ： -⅛⅝⅛⅛⅛3^⅛fi⅛或若鋼熬已占拥所有町用基駅时一 ⅛⅛E⅛AmLΛ^ T⅛*）τ却t ⅛J⅛SAX⅛t!Lfi^ Λ⅛Slt*11•何时传代？哺乳动物：生长的PH 值通常表示乳酸储积，且有毒性，当 PH 迅速降低（） 0.1-0.2PH 单位），同时细胞浓度增大，则应对细胞进行传代。

昆虫细胞PH 值会上升但不超过6.412. 贴壁细胞的解离方注F⅜第4S⅛⅛S^*ffi, ⅛≠J⅛. FilRn≡*站■艇植.⅞tt ⅝÷fi 细龍 ≡KH 对蛋白髓軾般眄同嵐乘.可⅛J⅞*5 -⅛ffi⅛曠蛋口斷丫戢理■帝爭反乐能、己好王逋年慝皓吋旳 细.到.特別最Mit 鈿Jl⅛ifcκ隹耀礎完蟹、r⅛⅛⅛β⅛≡⅛⅛⅛ 从堵神叩五《1説蒲下朿而不辭 TFyUE' 解■箱sa⅛4⅛≈⅛: a⅛w⅛κsa K 豊葬倩需辛利m 譚哼试輒的 ÷β⅛ h Io J8 10 ------- M I lBV 0 2 4 613.贴壁细胞的传代•的Ii齐AL•⅛⅛^^⅛ff≡. ⅛⅛⅛ ire*■'攻隹无二1百∙ml. ΛH L・3ΓC S?r?a. F^-≡,⅛⅛⅛^SΛ5⅝^>fi⅛S e k・巫曲帘靜懣，聖茹巴毎叽科36恫艺第书5｛呼勺，幵音弟，铸和離∏■ Sw叭Affifl;集SE日龍或TryPLE~txp<ess. ^⅛fl⅛U・用于≡Sfc⅛S⅛ftrf⅛的泣叩祷亂ff⅛∏: C(MJr1««-自站⅛fiBħi+β⅛r ⅛KKftI- - ?n.J:H+ S . ⅛E≠ CaUIter Cajr∣ter∙ (BeCIiman Cojfter^胞传代董程所有与创施播融的若iff輒此哥均应为无闇較芒“建狗采阎正谓的元前抒木.幵目齐尿耳JS冈蝎内H作・K AUB弄春器中眠出用过的⅛⅛⅛≠⅛F盂哥L堆不含號相携的丰墨艮博崔彳渎基堪√也伯⊂rτ√博算喪面齐壅秦2mL⅛J两）■ ⅛⅛j⅛⅛tlfe≡⅛^κs⅛⅛-ιι⅛轻加入冲⅛⅛. ⅛ιem⅛i≡s. m⅛ι⅛⅛n⅛⅛;V・⅛: niftn A p]⅛⅛∏JffifJl⅛.⅜ ⅝mju的少■血:Ir ⅛w-1. ⅛U⅛*H≠≠0⅛⅛4=⅛S^⅞^.*÷[5IiS苒h-中H入预魁料JB禹拒（洌埔：世盍日KI並下界JlEU: Zf⅛≡H足且理芒主驰屈（⅛ 10m<M-JOSrnL Ji⅛⅛⅛S⅛*.c乩将⅛s÷⅛ffi⅛圭品T弼匸鵲王舟郸。

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