汞灯用于波长检定。
用积分球的检测器波长<2500nm。
单色器
将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波 长单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦 至出射狭缝； ⑤出射狭缝。
（4 ）250-350nm内显示中、低强度的吸收， 说明羰基或共轭羰基的存在。 （5）300nm以上的高强度的吸收，说明该化 合物具有较大的的共轭体系。若高强度吸收 具有明显的精细结构，说明稠环芳烃、稠环 杂芳烃或其衍生物的存在。
溶剂对紫外吸收光谱有较大的影响，且 影响较为复杂。改变溶剂极性，会引起吸收 带形状的变化。当溶剂极性变大，大多数化 合物的振动精细结构消失，吸收带变得更为 平滑，且使λmax发生位移，因此在研究化合 物的紫外吸收光谱时，需注意选择所使用的 溶剂。
仪器介绍
紫外可见近红外吸收光谱仪 生产厂家：Varian Company, USA 仪器型号：Cary 5000 性能指标 波长范围：175-3300 nm 吸光度线性范围：0-8.0 Abs 波长精度：±0.08 nm（UV/Vis）；±0.4 nm（NIR） 应用范围（Application area）： 化学、生物、材料、医学和环境样品中无机有机成分 的定性、定量分析
紫外－可见吸收光谱的产生及基本原理
分子吸收光谱
振动能级与 转动能级跃迁 电子能 级跃迁
红外光谱 (λ: 0.75-1000 µ m) 紫外、可见吸收光谱 (λ: 200-750 nm)
10－200 nm:远紫外；200－400 nm:近紫外；400－750 nm:可见光
紫外-可见吸收光谱的产生 由于分子吸收中每个电子能级上耦合有许多的振-转能级， 所以处于紫外-可见光区的电子跃迁而产生的吸收光谱具有 “带状吸收” 的特点。
分光光度计基本部件
光源
单色器
样品室
光束分裂器 光源 单色器
比值
吸收池
检测器
显示
光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够 的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光-近红外区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在350～ 3730 nm。
紫外区：氘灯。发射190～ 350 nm的连续光谱。低于190nm 需接高纯氮气。
分光光度法定性定量的依据
紫外－可见吸收光谱定性的依据： 同一种吸光物质，浓度不同时，吸收曲线的形状相同， 最大吸收波长不变，只是相应的吸光度大小不同。
紫外－可见吸收光谱定量的依据： 吸光度的大小与其浓度相关，其定量关系符合朗伯－比 耳定律。
朗伯－比耳定律（定量分析）
I0 A lg abc I
判别顺反异构体
H
H C C H
C C
H
顺式
反式 λmax=295nm εmax=27000
λmax=280nm εmax=13500
共平面产生最大共轭效应， εmax大
判别互变异构体
O CH3 C H O C C H OC2H5
H O O H O H O H
酮式:λmax=272nm,εmax=16
OH CH3 C H O C C OC2H5
O H
O
烯醇式:λmax=243nm,εmax=16000
纯度的控制和检验
a) 根据吸收光谱判断
含10-6M蒽的苯溶液
苯溶液
b) 根据lgε判断
4.10 例如：标准菲 lg 氯仿 max( 296 nm )
3.69 ，说明精制品不纯。 现测得某菲的精制品 lg 氯仿 max( 296 nm )
共轭基团相同的不同分子， 紫外、可见吸收光谱很相 似。 O=C–C =C
两分子具有相同的 共轭基团
紫外谱图提供的结构信息
（ 1 ）化合物在 220 - 800nm 内无紫外吸收，说明该化合 物是脂肪烃、脂环烃或它们的简单衍生物（氯化物、醇、醚、 羧酸等），甚至可能是非共轭的烯。 （ 2 ） 220-250nm 内显示强的吸收（ 近 10000 或更大），这表 明K带的存在，即存在共轭的两个不饱和键（共轭二烯或、 不饱和醛、酮） （ 3 ） 250-290nm 内显示中等强度吸收，且常显示不同程度的 精细结构，说明苯环或某些杂芳环的存在。
M1
M2
出 射 狭 缝
光栅衍射示意图
样品制备
液体样品：需要稀释至一定的浓度，使其吸光值在0.1A-1A 需提供参照液体，定量需要做标准浓度曲线 固体样品：薄膜，玻璃等， 粉末样品：样品的量约为100mg,即样品的量能够铺满粉末样 品池
a
b c
比例常数，称为吸光系数
液层厚度，单位cm 浓度。当浓度 c 以 g· L-1 为单位，液层厚度 b 以 cm 为单位 时，吸光系数的单位为：L· g-1· cm-1
紫外分光光度法定性分析
比较吸收光谱曲线法：
可以将在相同条件下测得的未知物的吸收光谱与标准谱图 进行比较来作定性分析。如果吸收光谱的形状，包括吸收光谱 的λmax、λmin、吸收峰的数目、位置、拐点以及等完全一致，则 可以初步认为是同一化合物。
棱镜: 玻璃350～3200 nm, 石英185～4000 nm
光栅:波长范围宽, 色散均匀,分辨性能好, 使用方便
单色器
光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕 (600、1200、2400条/mm )。
平面透 射光栅 透 镜 光屏
原理： 利用光通过光栅时 发生衍射和干涉现象而分 双光束 一束光打到参照 一束光打到样品