第七讲 临床生化诊断试 剂盒的选择与评价
主要内容
试剂盒分类和特 点 试剂盒的制备 试剂盒的选择 试剂盒性能评价
主要内容
➢掌握临床生化诊断试剂盒的性能指标及 质量评价方法，能正确地选择和评价试 剂盒。 ➢熟悉诊断试剂盒的分类和特点。 ➢了解诊断试剂盒的发展史以及与方法学 的关系，诊断试剂盒的制备及其组成成 分的质量要求。
第一节 试剂盒的分类和特点
多项同测组合试剂盒
➢这类型试剂主要是用于三点双项同测终点法、 三点双项同测连续监测法和三点双项同测终点 速率法测定的试剂盒。 ✓在同一比色杯中，先后加入两种试剂与检品中 的两种被检物发生反应，在各反应达到平衡期 时分别测定，整个测定过程进行三次比色，测 定两个项目，称为三点双项同测终点法。
干粉片型试剂
液体单剂型试剂
流动离心式分析议
免疫学法
液体型商品试剂
液体双剂型试剂
任选分立式分析仪
干化学法
干式多层胶片型试剂 单剂型干片式试剂
干片式分析仪
图6-1 临床生化诊断试剂盒分类和发展史
第一节 试剂盒的分类和特点
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
➢液体型试剂 ✓ 优点是液体型试剂的试剂组分高度均一， 瓶间差异小，测定重复性好和使用方便；它也 无需加入任何辅助试剂及蒸馏水，避免了外源 性水质对试剂的影响，性能较稳定，测定结果 较为准确。 ✓ 缺点是液体型试剂（尤其是酶试剂）保存 时间较短，不便于运输。
➢液体双试剂 所谓液体双试剂就是将某些生化检测项目所 用到的试剂，按用途科学地分成两类，分别 配成两种试剂，通常第一试剂加入后可起到 全部或部分消除某些内源性干扰的作用，第 二试剂为启动被检测物质反应的试剂，两种 试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。 然后用适当的方法检测结果。
第一节 试剂盒的分类和特点
Байду номын сангаас
第一节 试剂盒的分类和特点
多项同测组合试剂盒
➢甘油三脂、总胆固醇同时测定法 ✓R1为Tris缓冲液，含ChE、ATP、MgCl2、POD、PGOD、 甘油激酶、脂肪酶、4-AA、2-羟3.5-氯苯磺酸钠、Triton-X等; ✓R2为Tris缓冲液，含COD。 ✓当血清或标准液与R1混合后立即进行第一次比色（510nm） 得空白A。37℃5分钟后进行第二次比色，为TG与酶试剂反应 终点的A，又是TCH测定的空白A。然后加入R2，37℃作用 5～10分钟，进行第三次比色，为CH与酶试剂反应终点的A。
第一节 试剂盒的分类和特点
多项同测组合试剂盒
计算: TG浓度=[A2（样品）-AB（样品）]/[A2（TG标 准）-AB（TG标准）]× TG标准浓度 TC浓度=[A3（样品）-A2（样品）]/[A3 （TC标准）-A2（TC标准）]×CH标准浓度
第一节 试剂盒的分类和特点
卡式试剂盒
➢试剂首先装入试剂瓶，瓶上充分使用编码技 术，而后根据编码启动调配、使用及更换储存。 其特点是： ✓ ①卡式试剂瓶上条码令使用者可快捷准确 地输入试剂数据，如测试数量、批号、有效期， 保证正确识别试剂。 ✓ ②试剂装载后能自动调配，可消除潜在误 差，并节省操作时间。
第一节 试剂盒的分类和特点
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
➢液体单试剂 ✓所谓液体单试剂就是将某种生化检验项目所 用到的试剂科学地混合在一起，组成为一种试 剂。应用时，只须将标本和试剂按一定比例混 合，即可进行相应的生化反应，然后用适当的 方法检测结果。
第一节 试剂盒的分类和特点
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
➢临床生化诊断试剂种类繁多，有液体型、粉 剂型、片剂型，有单一试剂、双试剂、干试剂 、多试剂等。 ➢纵观近20多年来的发展，临床生化体外诊断 试剂盒的分类和发展历史可用下图6-1 表示。
第一节 试剂盒的分类和特点
方法学
化学分析法
物理性状
液体型自配试剂
组合形式
液体多剂型试剂
操作方式
手工法多步操作
酶法分析
第一节 试剂盒的分类和特点
快速反应试剂盒
➢快速反应试剂盒是为了适应生化分析的技 术进步，缩短反应时间，提高工作效率。 ✓ 如血糖快速测定试剂盒。同一般葡萄糖氧 化酶法试剂相比是明显增加了GOD及POD用 量，更主要是增加了变旋酶，可使反应加快， 3～4分钟后即生成最终颜色。
第一节 试剂盒的分类和 特点
快速反应试剂盒
➢快速胆固醇试剂盒 样品与试剂比例是1:100。37℃反应2分钟即可 完成反应。它加大胆固醇酯酶和胆固醇氧化 酶等效应酶用量，从而使反应加速。 ➢目前要求这种快速反应的试剂用户还不多， 但它是一种发展趋势。
第一节 试剂盒的分类和特点
一步法试剂盒
➢主要是用特异性抗体参与反应的新型试剂。 ✓ 如HDL测定。以往多采用超速离心法和沉 淀法使HDL从其他脂蛋白中分离后再用生化分 析仪分析测定HDL中胆固醇，操作繁琐。 ✓采用抗LDL及VLDL血清预先抑制LDL及 VLDL，然后直接测定HDL。类似的试剂盒还 有CK及其同工酶CK-MB的测定。
临床生化试剂盒
➢临床生化商品试剂与标准液按检测项目组合 成一套放在一个包装盒内叫试剂盒（reagen kit），或叫试剂组合（reagen set）。 与自动化分析仪匹配的试剂盒的研制、生产 和供应走向产业化的道路，它无疑是临床生 化发展史上一个巨大的技术进步。
第一节 试剂盒的分类和特点
试剂盒的分类和发展
➢单试剂的缺点 存在抗干扰能力差，给测定结果带来相当大 的分析误差。例如 ✓ 内源性甘油给甘油三酯测定的干扰。 ✓ 内外源性NH4+对尿素酶法测定的干扰。 ✓ 内源性丙酮酸对ALT、AST测定的干扰。 ✓ 维生素C和胆红素对Trinder反应的干扰。
第一节 试剂盒的分类和特点
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
➢粉（片）剂型试剂 所谓粉剂型及片剂型试剂，即是将试剂的各组 分用球磨技术粉碎成粉剂或混合后压成片剂， 使用前再加入指定的溶液复溶成液体试剂。
第一节 试剂盒的分类和特点
液体型试剂和粉（片）剂型试剂
➢粉（片）剂型试剂 缺点 ✓①要使试剂各组分混合得非常均匀，技术难 度很大； ✓②分装过程中的称量误差及复溶时加水量的 准确性影响试剂的瓶间差； ✓③水质优劣对试剂的稳定性和测定的可靠性 有相当大的影响。