（二）HPLC
对照品与供试品保留时间一致
27
第三节 特殊杂质及其检查法
一、阿司匹林和双水杨酸酯 杂质来源：
原料残存（生产过程中乙酰化不完全）
水解产生（贮存过程中水解产生）
28
（一）合成路线：
COONa ONa CO2 ONa H
+
COOH OH (CH3CO)2O
COOH OCOCH3
COOH O O OH
46
2. 水解后剩余滴定法 阿司匹林: 水解：
COOH
酯的一般含量测定方法
COONa
+ 2NaOH
OCOCH 3
水解
OH
+CH3COONa
剩余滴定：
2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O
47
USP方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化
钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸 10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液 （0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结 果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液 （0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。
乙酰水杨酸 苯酯
31
检查方法——HPLC法
固定相：ODS
流动相：A 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水
B 乙腈 对照液：0.5%供试品溶液 要求：供试品溶液杂质峰面积和不得大 于对照液峰面积
32
（三）双水杨酸酯中游离水杨酸的检查
水杨酸+Fe3+→显色
→测定530nm吸光度
要求：供试品溶液吸光度小于对照液
典型药物：吲哚美辛
11
苯并噻嗪甲酸类
OH O N H S O N O CH 3 R
典型药物：吡罗昔康、美洛昔康
12
其他非甾体抗炎药
OCH3
HO
NO2 尼美舒利
13
二、主要理化性质 （一）酸性 游离羧基酸性较强 芳酸>芳取代脂肪酸 可用酸碱滴定法测定含量
稀盐酸

水杨酸白色 （测定熔点）， 可溶于醋酸铵
24
六、特征元素的反应
1.氯元素的鉴别
两种鉴别方法 2.硫元素的鉴别
25
七、光谱法 （一）紫外-可见分光光度法 1.最大吸收波长发 2.最大与最小吸收波长法 3.吸光度法 4.吸光度比值法 （二）红外分光光度法
26
八、色谱法
（一）TLC
对照品与供试品斑点位置一致
48
反应摩尔比为1∶2 优点：消除了酯键水解的干扰
缺点：酸性杂质干扰
49
3.两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯
取本品 10 片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿 司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中 性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液 3 滴，滴加
3
19
二、缩合反应 1.酮或醛结构与肼基缩合
CH3 HO O O HN NH2 NO2
+
H2SO 4
NO2
O2N H N
CH3 HO
N
NO2
O
20
三、重氮化—偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物
α β OH
21
直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、 苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋 氨苯砜、贝诺酯
对照溶液的主斑点（或荧光强度）
39
优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不
需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成
几种限量的对照溶液； 缺点：不同物质，不同Rf值比较，准确度 差、直观性差。
40
2.有关物质B
HPLC法
固定相：C18
流动相：水-甲醇-乙腈-冰醋酸
检测波长：254nm
要求：杂质峰面积和小于对照液主
第六章 芳酸类 非甾体抗炎药物的分析
1
鉴别 结构 性质 杂质检查 含量测定
体内药物分析
2
芳酸类非甾体药物
药理作用：抗炎、抗风湿、止痛、
退热、抗凝血
应用：关节炎、发热、各种慢性疼痛
3
水杨酸
邻氨基苯甲酸
分类
邻氨基苯乙酸
芳基丙酸 吲哚乙酸
苯并噻嗪甲酸
4
第一节 典型药物的结构与性质
一、典型药物与结构特点 苯环——各种取代基 羧基——游离、盐、酯 氨基——酰胺
22
四、氧化反应 甲芬那酸+硫酸+重铬酸钾→深蓝色 →棕绿色
吲哚美辛+硫酸+重铬酸钾→紫色
吲哚美辛+盐酸+亚硝酸钠→绿色 →黄色
23
五、水解反应
阿司匹林 Na 2CO3 水杨酸钠 醋酸钠 水杨酸（白色 ） 醋酸臭气
硫酸
双水杨酯 NaOH
53
二、紫外可见分光光度法
1. 直接紫外可见分光光度法
2.柱分配色谱—紫外分光光度法 三、HPLC
54
第五节 体内药物分析 一、血浆中阿司匹林与水杨酸的HPLC测定法 二、人血浆中布洛芬的HPLC测定与立体选择 性代谢研究
55
本章小结 1.结构特点 2.理化性质 3.与三氯化铁反应鉴别 4.重氮化偶合反应 5.水解反应 6.特征元素的反应
5
水杨酸类
COOH O R
R'
6
典型药物：
7
邻氨基苯甲酸类
COOH H N
R
COOH CH3 H N CH3
典型药物： 甲芬那酸
8
邻氨基苯乙酸类
R' O H N R O
典型药物：双氯芬酸钠
9
芳基丙酸类
CH 3 HO O R'
R
典型药物：布洛芬、酮洛芬、萘普生
10
吲哚乙酸类
COOH R' CH 3 N R
56
本章小结
7.紫外法鉴别
8.阿司匹林中特殊杂质的检查
9.对乙酰氨基酚中特殊杂质的检查
10.酸碱滴定法测定含量
11紫外-可见分光光度法测定含量
57
原料药：0.5%
制剂：1.5%
33
二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺
（一）合成工艺
COOH Cl + H3C CH3 NH2 Cu COOH H N H3C CH3
34
（二）检查方法
GC—程序升温法检查2,3-二甲基苯胺
限度：0.01%
供试品溶液、对照品溶液
35
三、二氟尼柳中有关物质的检查
F F
50
第一步 中和
51
第二步 水解：
水解后剩余滴定
2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O 药物与氢氧化钠反应摩尔比为1∶1
本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰
52
片剂含量测定结果的计算
每片含量 标示量% 100% 标示量 测得量（g） 平均片重（g） 供试品重（g） 100% 标示量（g / 片）
F
NH2
+
偶合 Cu
F
乙酰化
F
F
F
COCH3
氧化 F H2O2
F
OCOCH 3
F
COOH
水解
F
OH
羧化
F
OH
36
1.有关物质A 高低浓度对比法 方法：
S 供试品溶液
溶剂溶解
一定量供试品溶液 对照溶液
稀释
37
供 试 品
对 照 品
38
判断： ① ② 控制杂质斑点个数，控制杂质种类 供试品溶液所显杂质斑点不得深于
峰面积
41
第四节 含量测定 一、酸碱滴定法
1. 直接滴定法
S sol
中性乙醇
终点
酚酞 NaOH滴定
42
阿司匹林 ChP（2010） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚 酞指示液显中性） 20ml ，溶解后，加酚酞指示 液 3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。 每 lml 的 氢 氧 化 钠 滴 定 液 （ 0.1mo1/L ） 相 当 于 18.02mg的C9H8O4。
43
44
（1）测定方法及计算
反应摩尔比为1∶1
（2）讨论 ① 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。
“中性”是对中和法所用的指示剂而言
45
② 优点：简便、快速
缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） ③ 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分 析，只能用于合格原料药的含量测定
氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧
化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振 摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（ 0.05mol/L ）滴定，并 将 滴 定 的 结 果 用 空 白 试 验 校 正 。 每 lml 的 氢 氧 化 钠 滴 定 液 （0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。
14
（二）水解性 酯键、酰胺键能水解 水解产物可用于鉴别 水解反应可用于定量测定
15
（三）光谱特征 红外：鉴别 紫外：鉴别、含量测定、均匀度、溶出度 （四）基团或元素特性 酚羟基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素
16
第二节 鉴别试验
一、与三氯化铁反应 1.水杨酸反应 与三氯化铁反应生成紫堇色配合物
O OH O O
+FeCl3 +H2O
OH O
Fe
OH
17
注意：
1.反应条件：pH4～6 ，强酸性环境产物分解
2.反应灵敏，在稀溶液中进行 3.不同药物产物颜色略有差异