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配制溶液的一般实验步骤

配制溶液的一般实验步骤
配制溶液步骤因配置的溶液不同而有所不同,现举两个例
子:
举例 1:配置 0.05mol/L ,400mL NaOH 溶液的步骤:要准确配置氢氧化钠的浓度,则要用容量瓶定容,实验室没有 400 毫升的容量瓶,则选用 500 毫升的容量瓶。

1.计算需要氢氧化钠的质量:0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克
2.称 1.000 克氢氧化钠于烧杯中,加少量水溶解,然后倒入
500 毫升容量瓶里,分 3 次洗烧杯,将溶液全部倒入容量瓶里,最后用水稀释至刻度线,摇匀,即,得到 0.05mol/L 的氢氧化钠溶液。

如果不需要很准确的话,可以直接用量筒量 400 毫升,称的时候只要称 0.8 克就可以了。

举例 2:配置 1.5mol/L 的稀硫酸
200mL 步骤:
第 1 步:计算:根据 C1V1=C2V2 ,计算需要浓硫酸的体积;第 2 步:量取,利用刻度吸管吸取需要浓硫酸的体积;第 3 步:稀释,将浓硫酸转移到小烧杯中,加少量水稀释;第 4 步:转移 , 待溶液温度降低后,将烧杯中的硫酸转移到 200mL 容量瓶中;
第 5 步:洗涤,洗涤小烧杯,和转移的时候用到的玻璃棒,
至少三次,将洗涤的水一并转移到容量瓶中;
第 6 步:定容,加水定容到刻度线,在距离刻度线一厘米左右改
用胶头滴管定容;
第 7 步:摇匀 ,将溶液摇匀 ,如果液面下降也不可再加水定容;第 8 步:将配得的溶液转移至试剂瓶中,贴好标签;举例 3:配制 500mL ,0.1mol/L 碳酸钠溶液步骤及注意事项所需的仪器:烧杯、容量瓶、玻璃棒、胶头滴管、分析天平、药匙、量筒步骤:第一步:计算:所需碳酸钠的质量 =0.5*0.1*106=5.3 克;第二步:称量:在天平上称量 5.3 克碳酸钠固体,并将它倒入小烧杯中;第三步:溶解:在盛有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使其溶解;第四步:移液:将溶液沿玻璃棒注入 500mL 容量瓶中;第五步:洗涤:用蒸馏水洗烧杯2〜3次,并倒入
容量瓶中;第六步:定容:倒水至刻度线 1〜2cm处改用胶头滴管滴到与凹液面平直;第七步:摇匀:盖好瓶塞,上下颠倒、摇匀;第八步:装瓶、贴签;误差分析:固体药品的称量与液体药品的量取是否准确;把溶液向容量瓶中转移,溶液洒了;未洗涤烧杯和玻璃棒;用待配液润洗了容量瓶;定容时水加多了或加少了;定容时未平视刻度线。

仰视、俯视对溶液浓度有何影响?★俯视刻度线,实际加水量未到刻度线,使溶液的物质的量浓度增大;★仰
视刻度线,实际加水量超过刻度线,使溶液的物质的量浓度
减小。

市售盐酸密度1.19,质量分数36%〜38%以37%计
算:步骤: 1.计算:假若需要 2mol/L 的硫酸 100mL ,则需 37%
浓硫酸 16.6mL;计算过程如下:假设盐酸 VmL :
(0.1L*2mol/L*36.5g/mol )/37%=V/1.19V=16.59mL, 考虑到量筒的精确度 0.1mL,故取16.6mL即可。

2•量取:16.6mL 浓硫酸; 3.溶解:把 16.6mL 浓硫酸倒入已经加入蒸馏水的小烧杯中,用玻璃棒不断搅拌。

4.转移:待溶液冷却后,将溶液沿玻璃棒倒入 100 毫升的容量瓶中。

5.洗涤:再用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒 2-3 次,并将全部洗液移入容量瓶中。

6.定容:向容量瓶内加蒸馏水,当液面接近刻度线 1-2 厘米处时,改用滴管滴加蒸馏水到一面恰好与刻度线相切。

7 .摇匀:塞上瓶塞,反复颠倒容量瓶数次,使瓶内的溶液均匀,此时可以把溶液倒入到试剂瓶中贴标签保存。

完成配制过程容量瓶的使用六忌: 1.忌用容量瓶进行溶解(体积不
准确) 2.忌直接往容量瓶倒液(洒到外面) 3.忌加水超过
刻度线(浓度偏低) 4.忌读数仰视或俯视(仰视浓度偏低,俯视浓度偏高) 5.忌不洗涤玻璃棒和烧杯(浓度偏低) 6. 忌标准液存放于容量瓶(容量瓶是量器,不是容器) 1 mol/L 的氢氧化钠溶液 250mL ,完成下列步骤:①用天平称取氢氧化钠固体 /克。

②将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中加少量蒸馏水将其溶解,待完全溶解后将溶液沿玻璃棒移入 250mL 的容量瓶中。

③用少量蒸馏水冲洗 2〜3次,将冲洗
液移入容量瓶中,在操作过程中不能损失点滴液体,否则会使溶液的浓度偏低。

④向容量瓶内加水至刻度线1〜2cm
时,改用胶头滴管小心地加水至溶液凹液面与刻度线相切,若加水超过刻度线,会造成溶液浓度偏低应该重新配制。

⑤ 最后盖好瓶盖,摇匀,将配好的溶液移入试剂瓶中贴好标签。

常用贮液与溶液
1mol/L 亚精胺( Spermidine ):溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为10mL。

分装成小份贮存于-20 C。

1mol/L 精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为
10mL 。

分装成小份贮存于 -20C。

10mol/L 乙酸胺(ammoniumacetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L 后,用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/mL 牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于 9.5mL 水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到 10ml ,然后分装成小份贮存于 -20C。

1mol/L 二硫苏糖醇(DTT ):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4mL水,分成小份贮存于-20C,或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加 0.65mL 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。

8mol/L 乙酸钾( potassiumacetate)溶解 78.5g 乙酸钾于足量的水中,加水定容到100mL。

1mol/L氯化钾(KCl): 溶解7.46g 氯化钾于足量的水中,加水定容到 100mL 。

3mol/L乙酸钠(sodiumacetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90mL 水中,用冰乙酸调溶液的 pH 至 5.2,再加水定容到 100mL。

0.5mol/L EDTA: 配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液
( 0.5mol/L ),混合后形成 EDTA 的三钠盐。

或称取 186.1g 的Na2EDTA • 2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至
1L。

1mol/L HEPES :将 23.8gHEPES 溶于约 90mL 的水中,用NaOH调pH (6.8〜8.2),然后用水定容至 100ml。

1mol/L HCl :加8.6ml 的浓盐酸至 91.4ml 的水中。

25mg/ml IPGT : 溶解250mg 的IPGT (异丙基硫代-[3 -D-半乳糖苷)于10ml 水中,分成小份贮存于 -20 C。

1mol/LMgCI2:溶解20.3g MgCI2 • 6H2O于足量的水中,定容到100mL。

100mmol/L PMSF :溶解174mg的PMSF (苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。

分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20°Co 20mg/mL 蛋白酶 K ( proteinase K):将 200mg 的蛋白酶 L 加入到 9.5mL 水中,轻轻摇动,直至蛋白酶 K 完全溶解。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小
份贮存于-20 Co 10mg/mL R-nase (无 D-Nase)( D-Nase —freeR-Nase)溶解 10mg 的胰蛋白 RNA 酶于 1mL 的 10mmol/L 的乙酸钠水溶液中(pH5.0)o溶解后于水浴中煮沸 15min , 使 DNA 酶失活。

用 1mol/L 的 Tris — HCl 调 pH 至 7.5,于-20C 贮存。

(配制过程中要戴手套)5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g 氯化钠于足量的水中,定容至 100mL 。

10N 氢氧化钠(NaOH ):溶解400g氢氧化钠颗粒于约 0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L。

10% SDS (十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含
0.9L 的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。

用水定容至1L。

2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g 山梨(糖)醇于足量水中使终体积为 100mL。

100%三氯乙
酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入 100mL水,用磁力搅
拌器搅拌直至完全溶解。

(稀释液应在临用前配制) 2.5%X - gal (5-溴4氯-3-吲哚—B -半乳糖苷):溶解25mg 的 X-gal 于
1ml 的二甲基甲酰胺( DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-
20C。

100x Denhardt 试剂(Denhardt'sregent)成分及终浓度配制 100mL 溶液各成分用量 2%聚蔗糖( Ficoll , 400 型)2%聚乙烯吡咯烷酮( PVP-40)
2%BSA (组分 V)
水 2g
2g
2g
加水至总体积为 100mL。

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