该菌在对4人2℃有±致1病℃力条，件可下使能伤生处长化。脓，引起败血 症等。
化妆品微生物指标检验
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SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
菌 18~24h 培 36±1℃ 养
分 离 18~24h 纯 36±1℃ 化
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度 及其一般卫生状况。
化妆品微生物指标检验
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SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
Baird Parker’s 或血琼脂
配培 养基 和稀 释液
供试 品的 处理
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
化妆品微生物指标检验
微生物检验方法
• GB/T 7918.1-1987 化妆品微生物标准检验方法 总则
• 菌落总数 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.2-1987 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定
• 粪大肠菌群：GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 粪 大肠菌群
化妆品微生物指标检验
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供试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
数据 处理
检查结果、 观察与计数
化妆品微生物指标检验
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• 化妆品中防腐剂抑制细菌的生长.
• 含卵磷脂、吐温80 营养琼脂培养基进行 中和。对尼泊金类、苯甲酸类、六氯酚 类等有效，但对卡松类的防腐剂的中和 效果有限。
• 铜绿假单胞菌 （化妆品卫生规范-2007年） GB/T 7918.4-1987 化妆品微生物标准检验方法 绿脓杆菌
• 金黄色葡萄球菌 GB/T 7918.5-1987 化妆品微生物标准检验方 法 金黄色葡萄球菌
• 霉菌和酵母菌：（化妆品化妆卫品微生生物规指标范检验-2007年）
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适用范围
总则
• 微生物检验的基本要求 • 微生物检验样品的采集、保存及制备
化妆品微生物指标检验
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• 卡松的中和剂半胱氨酸,可较好的中和卡 松的抑菌效果。因此,检测时不同的防腐 剂加入不同的中和剂
化妆品微生物指标检验
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• 为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌存在，培养后 菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
结果 判断
不产酸不产气
最终结 果判断
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44 ±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
★粪大肠菌群检查流程图
化妆品微生物指标检验
紫黑色
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铜绿假单胞菌
• 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa） 属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌， 氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还 能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐，
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
★铜绿假单胞菌检查流程图
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黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
SCDLP培养基
粉红/ 紫红色
氧化酶试验
化妆品微生物指标检验
甘露醇发酵试验
★金黄色葡萄球菌检查流程图
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灰/黑色
Baird Parker’s平板
甘露醇发酵试验 血浆凝块
液态血浆
血浆凝固酶试验
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霉菌和酵母菌
• 霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）是指化妆品检样 在一定条件下培养后，1g 或 1mL 化妆品 中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，藉
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盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
N2
绿脓菌素试验
硝酸盐还原产气试验
明胶液化 试验
明胶液化
明胶培养基（高层）
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金黄色葡萄球菌
• 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 为革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无 芽胞，无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝
该菌固是酶葡阳萄性球。菌中对人类致病力最强的一种， 能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致 败血症。
无菌容器、材料及操作
样品的均一性
化妆品微生物指标检验
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样品的检验及保管
及时检验 样品应放在室温阴凉干燥处 样品先进行微生物检验，再做其他指标 须防止微生物的再污染和扩散 如检出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发 出之日起该菌种及被检样品应保存一个月
化妆品微生物指标检验
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菌落总数检验
• 菌落总数（Aerobic bacterial count）是指化妆品 检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养 基成分、培养温度、培养时间、pH 值、需氧性 质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。 所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长 的嗜中温的需氧性菌落总数。 测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程 度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
• 2、抽/采样数量 • 按照抽样批及抽样方案
化妆品微生物指标检验
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3、检验量
检验时，应分别从两个包装单位以上的 样品中共取10g 或10mL。包装量小于20g 的样品，采样量可适当增加样品包装数 量。
化妆品微生物指标检验
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样品的制备
液体样品 膏、霜、乳剂半固体状样品 固体样品
样品的制备注意事项
化妆品微生物指标检验
3
样品的采集
总则
1、具有代表性 随机抽取相应数量的包装单位。 应从批的整体中各部位抽取，如从四角+中
间；分上、中、下层；或上、中上、中、中 下、下层；梅花点式等。
所有接触样品的工具、容器都必须保持清洁。
化妆品微生物指标检验
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JJF1070－2005 定量包装 商品净含量计量检验规则
化妆品微生物指标检验
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• 在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附 着于颗粒状的原料中,检测时不易洗脱下 来,因此,需要验证检测方法的有效性。
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双倍胆盐乳糖M
产酸稀 释液
供试 液的 制备
书写检验 记录单
增
菌 44 ±0.5℃ 检查
培 24~28h 养