现代分子生物学第四章作业（5-13题）
222009317011128 牛旭毅2011.10.15
5，比较原核与真核的核糖体组成？
答：相同点：核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为两个亚基，每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。
不同点：（1）原核生物核糖体由约2/3的RNA及1/3的蛋白质组成。
真核生物核糖体中RNA占3/5，蛋白质占2/5。
（2）大肠杆菌核糖体小亚基由21种蛋白质组成，分别用S1……S21表示，大亚基由33种蛋白质组成，分别用L1……L33表示。
真核生物细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质，小亚基有33种蛋白质。
6，什么是SD序列？其功能是什么？
答：定义：因澳大利亚学者夏因(Shine)和达尔加诺(Dalgarno)两人发现该序列的功能而得名。
信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S 核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶的7核苷酸序列互补的富含嘌呤的3～7个核苷酸序列(AGGAGG)，是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确的前起始复合体的一段序列。
功能：此序列富含A-G，恰与16SRNA3’端富含T-C的序列互补，因此mRNA 与核蛋白体sRNA容易配对结合。
因此SD序列对mRNA的翻译起重要作用。
7，核糖体有哪些活性中心？
答：核糖体有多个活性中心，即mRNA结合部位、结合或接受AA- tRNA部位（A 位）、结合或接受肽酰-tRNA的部位（P位）、肽基转移部位及形成肽键的部位（转肽酶中心），此外还应有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。
8，真核生物与原核生物在翻译起始过程中有什么区别？
答：原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA(fMet上角标），30s小亚基首先与mRNA 模板相结合，再与fMet-tRNA(fMet上角标）结合，最后与50s大亚基结合。
真核生物的起始tRNA是Met-tRNA(Met上角标），40s小亚基首先与Met-tRNA(Met上角标）相结合，再与模板mRNA结合，最后与60s大亚基结合生成起始复合物。
真核生物蛋白质生物合成的起始机制与原核生物基本相同，其差异主要是核糖体较大，有较多的起始因子参与，其mRNA具有m7GpppNp帽子结构，Met-tRNA （Met上角标）不甲酰化，mRNA分子5' 端的“帽子”参与形成翻译起始复合物。
9，链霉素为什么能预制蛋白质合成？
答：链霉素是一种碱性三糖，干扰fMet-tRNA与核糖体的结合，从而阻止蛋白质合成的正确起始，并导致mRNA的错读。
若以poly（U）作模板，则除苯丙氨酸（UUU）外，异亮氨酸（AUU）也会掺入。
链霉素的作用位点在30S亚基上。
10，什么是信号肽？它在序列组成上有哪些特点？有什么功能？
答：（1）信号肽(signal peptide)：分泌蛋白新生肽链N端的一段20～30氨基酸残基组成的肽段。
将分泌蛋白引导进入内质网，同时这个肽段被切除。
现这一概念已扩大到决定新生肽链在细胞中的定位或决定某些氨基酸残基修饰的一些肽段。
（2）信号肽的结构特点：1.一般带有10-15个疏水氨基酸2.常常在靠近该序列N-端疏水氨基酸区上游带有1个或数个带正电荷的氨基酸3.在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链(Ala或Gly)。
（3）信号肽的功能：1.通过与SRP的识别和结合，引导核糖体与内质网结合；2.通过信号肽的疏水性，引导新生肽跨膜转运至内质网腔。
11，简述叶绿体蛋白质的跨膜运输机制？
答：叶绿体定位信号肽一般有两个部分，第一部分决定该蛋白质能否进入叶绿体基质，第二部分决定该蛋白能否进入类囊体。
在这一模型中，蛋白质运转是在翻译后进行的，在运转过程中没有蛋白质的合成。
叶绿体蛋白质运转过程有如下特点：①活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内，这是鉴别翻译后运转的指标之一。
②叶绿体膜能够特异地与叶绿体蛋白的前体结合。
③叶绿体蛋白质前体内可降解序列因植物和蛋白质种类不同而表现出明显的差异。
12，蛋白质有哪些翻译后的加工修饰？
答：肽链刚刚被合成时大多数是没有功能的，必须经过加工修饰后才能转变为有活性的蛋白。
主要包括以下几个步骤：
1. N端的fMet（原核）或Met（真核）的切除
2.二硫键的形成。
3.特定氨基酸的修饰。
包括磷酸化，甲基化，酰基化，乙基化，糖基化，羟基化和羧基化等。
4.切除新生肽链中的非功能片段。
13.什么是核定位序列？其主要功能是什么？
答：定义：在多细胞真核生物中,每当细胞发生分裂时,核膜被破坏,等到细胞分裂完成后,核膜被重新建成,分散在细胞内的核蛋白必须被重新运入核内,因此,为了核蛋白的重复定位,这些蛋白质中的信号肽一般都不被切除，被称为核定位序列(nuclear localization sequence, NLS).NLS可以位于核蛋白的任何部位。
主要功能：使分散在细胞内的核蛋白重新运入核内，即核蛋白的重复定位。