1、取材。

每年的6-8月，选择植株生长健壮，匍匐茎充实，尖端生长良好，无病虫害的优良植株取其茎尖或花药，作为组织培养的外植体。

2、消毒。

材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时（以茎尖为例），然后进行表面消毒。

先用70%酒精漂洗半分钟，然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟，再用0.1%的升汞（氯化汞）消毒5-8分钟，最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。

每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。

整个消毒过程都应在超净工作台内完成。

3、接种。

接种在超净工作台内进行，接种前要先用酒精灯对接种用具（镊子、接种针、接种架等）消毒自然放凉。

先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片，然后在解剖镜下找到生长点（可带1-2个叶原基）用接种针挑出生长点（小于0.5毫米），放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内，封好瓶口，置于培养室内培养成小植株。

4、室内培养。

培养室要求干净清洁，室内装有紫外线杀菌灯，每天要对室内进行消毒，以防污染。

培养温度20-28℃，最适温度25℃，相对湿度70%，光照强度1000-2000勒克斯，每日光照10小时左右。

5、继代培养。

每培养25-30天，培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株，把这些小植株分出放于继代培养基内培养；过20-30天后又会长出小植株，如此反复进行继代培养，增加繁殖系数。

6、诱导生根。

根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。

草莓试管苗生根很容易，有的在继代培养基上便可生根。

或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA，经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。

7、温室驯化。

把生好根的小苗经光照锻炼7-10天，从试管内取出，洗净根部培养基，移栽入事先准备好的营养土内，使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。

驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。

移栽后要浇透水，支小拱棚覆盖塑料薄膜保湿。

驯化温度以15-20℃，前两周空气相对湿度80-100%，第三周开始短时间放风，放风强度逐渐加大，至移栽后第四周可去掉覆盖物。

根据情况每天或隔天喷水一次，保持土壤湿润而不积水为宜。

驯化一般需2-3个月即可移出。

经病毒鉴定，确认无毒后放入网纱大棚内繁殖。

8、病毒鉴定和检验。

草莓无病毒苗的鉴定检验手段是采用小叶嫁接法、蚜虫接种鉴定法和电子显微镜检测法。

利用电子显微镜检测草莓病毒比前两种更直观，而且速度快。

其方法是利用负染色法及超薄切片法处理待测叶片，然后在电子显微镜下观察，如果被测叶片中含有较多病毒颗粒子，可被直接观察到。

经检验确认无毒的草莓苗移入网纱大棚进行繁殖。

9、网纱大棚内繁殖。

草莓病毒的传播主要靠蚜虫、飞虱等虫媒传播。

把无病毒苗放入网纱内繁殖可防止蚜虫等传播病毒。

网纱大棚内土壤要经过严格消毒，并注意定期喷施杀蚜虫药。

网纱大棚内育苗与苗圃育苗大体一致。

快速繁殖草莓秧苗比其他方法有许多优点：采用无毒材料培养的秧苗无病毒，生长健壮，叶片浓绿，可改善果实品质，提高产量；繁殖快，对新品种的推广有利，解决了新品种材料少、在生产中推广速度慢的问题。

快速繁殖不受季节影响，一年四季均可进行。

在人工控制的条件下，可工厂化育苗，根据生产需要为生产提供种苗。

现把组培草莓种苗的方法和技术简要介绍给广大草莓种植者。

1.培养基的配制：培养基由植物生长所必需的有机营养成分、微量元素和生长调节剂组成。

首先配制基本培养基，包括微量元素、有机物质、蔗糖(3%)、琼脂(0.6%)等。

为调节被培养物的生长和分化，还需加入细胞分裂素和其他生长素，如6-苄氨基嘌呤(BA)0.25毫克／升、吲哚丁酸(IBA)0.5～1.0毫克／升、GA3(赤霉素)0.1毫克／升等，组成MS培养基。

配好后装入三角瓶或试管，经高压消毒后备用。

2.采取茎苗：在6月份选取刚扎根的匍匐茎苗，对茎苗进行消毒。

消毒方法是，剥去茎苗外面的叶片，用肥皂水洗干净，再用自来水冲洗一小时。

在无菌条件下，用70%的酒精漂洗10分钟后，用5%的次氯酸钠溶液消毒7～8分钟，再用无菌水冲洗5遍，使接种材料无细菌和真菌。

然后在超净工作台上，无菌条件下剥取茎尖生长点0.5毫米，接种到上述已配好的培养基上，每个培养瓶可接种5～7个茎尖。

接种后，在26℃的恒温、光强2000勒[克斯]、每天光照6小时的条件下进行培养。

3.初代培养：对刚接种到培养基上的匍匐茎尖进行培养，使茎尖分生组织分化出芽和无根小植株。

在培养基上加入有利分化的激素，成为分化培养基。

茎尖经30天以上的培养，一个茎尖能分化出数个无根小植株。

4.继代培养：把已分化好的新芽转入到新培养基上，进行继代培养繁殖，使新芽不断增殖，加速生长。

3～4个星期后，可获得30～40个腋芽形成的芽丛，芽丛中有的抽生新茎，并有正常叶片。

经过多次继代培养，使增殖的数量达到一定要求，再把无根苗转入生根培养基上培养，促进生根。

5.生根培养：生根培养时要撤去BA，即去掉了细胞分裂素类的激素，增加生根培养激素，如吲哚丁酸(IBA)等。

生长在这种培养基上的无根植株不再增殖，在每株无根苗基部生出许多不定根，可得到成批完全小植株。

6.移植：在把试管苗种植到土壤里以前，可先将其培养在无菌土壤中，或在盛有由蛀石、草炭、锯末等基质组成的培养土的小塑料盆中进行培养。

培养时，应将试管苗放在温室中，温度保持在20～25℃为宜。

为了保持湿度，以利于试管苗成活，移植后的14天内要用薄膜遮阴，待外界气温适合时，再移植到田间培植。

要注意防治蚜虫等虫害，加强田间水、肥管理，可喷两次50毫克／千克赤霉素，促进抽生匍匐茎。

新抽生的匍匐茎苗为原种苗，经多次、多量繁殖，即可获得成批生产用苗。

以国外引入和国内自己培养的新优草莓品种丰香、盛港及美国6号等为试材进行组织培养繁苗试验，总结出草莓的组培苗生产、驯化和移栽等系列的技术体系，不仅能快速培养出大量脱毒种苗，而且取得较好的社会效益和经济效益。

组织培养技术1、培养程序和培养基5--6月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎尖，大小为0．3--0．4mm，作为组织培养的外植体。

用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6-BA0．5mg/L，NAA 0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L，pH值调至5．8--6．0。

在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA 0．5mg/L、NAA 0．01mg／L。

扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。

在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。

诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。

试验表明：以IBA 0．1mg／L的浓度处理的生根率最高，为100％，平均根条数为2．4条。

不加TBA及IBA浓度超过0．2mg／L，多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降低。

2、操作技术要点及培养条件(1)灭菌与接种预处理为了灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。

可用多种湿润剂，我们采用的是75％的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。

灭菌处理在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。

我们曾用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；次氯酸钙(漂白粉)，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟。

其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。

升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。

因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。

灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。

接种以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中。

培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟。

从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在25±2℃。

每日光照12小时，光强以2000Lx为宜。

培养室温度在18--26℃范围内，瓶苗可以正常生长及发根，但在28℃以上时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生玻璃化现象。

组培苗的移栽技术1、移栽技术试管苗的苗龄为15天，主根长1．5cm左右，白色无须根，移栽成活率可达90％--100％。

移栽前要将培养瓶从培养室中取出置于自然条件下，打开瓶盖进行透气锻炼。

24小时后，从瓶中取出幼苗，清除干净根部及根颈处的培养基，栽入苗圃或穴盘中进行驯化。

基质可采用经过灭菌处理的腐熟的锯木屑或腐叶土，也可采用经过灭菌处理的由蛭石与珍珠岩按体积计以1：1比例配成的混合物，或园土与煤渣按体积计以2：1比例配制成的混合物。

2、提高移栽成活率的关键选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在3片以上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。

栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用0．2％冰乙酸中和使碱性降低。

移栽时采取“深栽浅埋”。

深栽就是在移栽时根要栽得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于土表。

注意控制光照与温度、湿度。

小苗移栽后，放在温室内或塑料拱棚内培养，温度控制在15--20℃，湿度维持在80％左右为宜。

同时由于刚移栽的小苗茎杆脆嫩，应尽量采用喷雾状浇水，水量也不宜过大，落干后再喷。

遮光50％，一周后，可逐渐增强日光照射。