碘染色
沙眼衣原体始体的镜下 形态(Giemsa染色 染色) 形态(Giemsa染色)
(二)血清学分型
根据MOMP 表位氨基酸序列的差 根据 MOMP表位氨基酸序列的差 异 , 将沙眼衣原体分为 19个血清型 , 将沙眼衣原体分为19 个血清型 个血清型, 其中沙眼生物型包括15个血清型; LGV生物型包括 LGV生物型包括L1,L2,L2a和L3共4 生物型包括L 个血清型. 个血清型.
(三)抗原结构
属特异性抗原:位于胞壁的共同抗原为脂 属特异性抗原 : 多糖, 类似于 G 菌的脂蛋白多糖 , 类似于G - 菌的脂蛋白 - 脂多糖复合 物,可用补体结合试验检测. 可用补体结合试验检测. 种特异性抗原: 种特异性抗原 : 大多数衣原体种特异性抗 原位于主要外膜蛋白(major outer membrane protein, MOMP)上,可用补 MOMP) 体结合试验和中和试验检测鉴别不同种衣 原体. 原体. 型特异性抗原:根据MOMP可变区氨基酸 型特异性抗原:根据MOMP可变区氨基酸 序列的不同, 序列的不同, 可将每种衣原体分为不同的 血清型或生物型(biovar) 血清型或生物型(biovar).
衣原体的发育周期
原体和始体的比较
性状
大小( ) 大小(m) 细胞壁 代谢活性 胞外稳定性 感染性 繁殖能力 RNA:DNA比 比
原体
0.2～ 0.2～0.4 + 强 强 无 1:1
始体
0.5～ 0.5～1.0 + 弱 无 强 3:1
(二)培养特性
鸡胚接种: 鸡胚接种:6～8日龄鸡胚卵黄囊中繁 日龄鸡胚卵黄囊中 殖 , 感染后3 ～ 6 天 致鸡胚死亡 , 并可在卵 感染后 3 致鸡胚死亡, 黄囊膜中找到包涵体,原体和始体颗粒. 黄囊膜中找到包涵体,原体和始体颗粒. 组织细胞培养:可在HeLa,McCoy或 组织细胞培养:可在HeLa,McCoy或 HL 等细胞中生长良好, 可将接种有标本的 HL等细胞中生长良好 , 细胞培养管离心沉淀以促使衣原体穿入细 胞,在细胞培养管中加入代谢抑制物. 在细胞培养管中加入代谢抑制物.
3.泌尿生殖道感染 沙眼生物型D 沙眼生物型D～K血清型引起,男性多表现 血清型引起, 为非淋菌性尿道炎, 并可合并附睾炎, 为非淋菌性尿道炎 , 并可合并附睾炎 , 前列腺 炎 , 直肠炎等 ; 女性表现为尿道炎 , 宫颈炎 , 直肠炎等; 女性表现为尿道炎, 宫颈炎, 输卵管炎与盆腔炎等. 输卵管炎与盆腔炎等. 4.婴幼儿肺炎 5.性病淋巴肉芽肿 侵犯男性腹股沟淋巴结, 侵犯男性腹股沟淋巴结 , 引起化脓性淋巴 结炎和慢性淋巴肉芽肿, 常形成瘘管; 结炎和慢性淋巴肉芽肿 , 常形成瘘管 ; 亦可侵 犯女性会阴, 肛门, 直肠, 引起会阴- 肛门犯女性会阴 , 肛门 , 直肠 , 引起会阴 - 肛门 - 直 肠组织狭窄. 肠组织狭窄.
圆 - 3 88%~100% 不 感 敏
对 胺 敏 性 磺 的 感
一,生物学性状
(一)发育周期与形态染色
包括原体和 包括原体和网状体 原体( 原体(Elementary body, EB):呈球形, body, EB) 呈球形, 椭圆形或梨形,直径0 椭圆形或梨形,直径0.2～0.4 m,是发育成熟 m, 的衣原体. 具有强感染性 , 的衣原体 . 具有强感染性, 在宿主细胞外较稳 定 , 无繁殖能力 . 当进入宿主易感细胞后 , 宿 无繁殖能力. 当进入宿主易感细胞后, 主细胞膜围于原体外形成空泡, 主细胞膜围于原体外形成空泡 , 原体在空泡中 逐渐发育,增殖成为网状体.Giemsa染色呈紫 逐渐发育,增殖成为网状体.Giemsa染色呈紫 色,Macchiavello染色呈红色. Macchiavello染色呈红色.
(二)分离培养
取感染组织的渗出液或刮取物, 取感染组织的渗出液或刮取物,接种于 鸡胚卵黄囊或传代细胞, 再用IFA 或 鸡胚卵黄囊或传代细胞 , 再用 IFA或 ELISA 检测培养物中的衣原体. 检测培养物中的衣原体.
(三)衣原体抗原与核酸组分检测
ELISA:检测沙眼衣原体LPS和 ELISA:检测沙眼衣原体LPS和MOMP PCR和 LCR( 链接酶链反应) PCR 和 LCR ( 链接酶链反应 ) 等扩增 技术检测沙眼衣原体DNA 技术检测沙眼衣原体DNA
网状体,亦称始体( 网状体,亦称始体(Initial body):体积 body) 较大,直径0 较大,直径0.5～1.0 m,圆形或椭圆形,电子 圆形或椭圆形, 致密度较低, 无胞壁, 代谢活跃, 致密度较低 , 无胞壁 , 代谢活跃 , 以二分裂方 式繁殖, 在空泡内增殖成许多子代原体. 式繁殖 , 在空泡内增殖成许多子代原体 . 成熟 的子代原体从被破坏的感染细胞中释放, 的子代原体从被破坏的感染细胞中释放 , 再感 染新的易感细胞, 开始新的发育周期, 染新的易感细胞 , 开始新的发育周期 , 每个发 育周期约48 ～ 育周期约 48～ 72 h . 网状体是衣原体发育周期 中的繁殖型,不具感染性,Macchivello染色呈 中的繁殖型,不具感染性,Macchivello染色呈 蓝色. 蓝色.
人 肺 炎
鸟 , 等 乳 类 低 哺 类
牛 羊 , 呼 道 染 吸 感
肺 炎 呼 道 染 吸 感 圆 椭 , 圆 - 不 明 14%~95% <10% 不 感 敏
性 播 病 呼 道 染 传 疾 吸 感 圆 椭 , 圆 + 18 >90% <10% 敏 感 梨 形 - I (TW AR株 ) >90% <10% 不 感 敏
第21章 21章 衣原体 Chlamydiae
南华大学医学院 吴移谋 教授
第一节 概述
定义: 定义:
一类严格真核细胞内寄生 , 具有独特发育周期, 具有独特发育周期 , 并能通过细 菌滤器的原核细胞型微生物, 菌滤器的原核细胞型微生物 , 归 属于细菌学范畴. 属于细菌学范畴.
共同特性
有细胞壁, 有细胞壁,G-,呈圆形或椭 圆形, 具有独特的发育周期, 圆形 , 具有独特的发育周期 , 类 似细菌的二分裂方式繁殖. 似细菌的二分裂方式繁殖. DNA和RNA两种核酸 两种核酸, 有DNA和RNA两种核酸,含 核糖体; 核糖体 ; 具有严格的细胞内寄生 对多种抗生素敏感. 性,对多种抗生素敏感.
二,致病性与免疫性
(一)致病性
能产生类似G 菌内毒素的毒性物质, 能产生类似 G - 菌内毒素的毒性物质 , 能 抑制宿主细胞代谢,直接破坏宿主细胞. 抑制宿主细胞代谢,直接破坏宿主细胞. MOMP能阻止吞噬体与溶酶体融合 MOMP能阻止吞噬体与溶酶体融合,表位 能阻止吞噬体与溶酶体融合, 易变异, 易变异 , 在体内可逃避特异性抗体的中和作用 而继续感染细胞. 而继续感染细胞. 热休克蛋白(HSP) 热休克蛋白(HSP)能刺激机体巨噬细胞 产生TNF产生TNF-α,IL-1,IL-6等炎症性细胞因子. IL等炎症性细胞因子.
一,生物学性状
(一)形态染色
原体直径为0 原体直径为0.38 m,电镜下呈 m, 典型的梨形,并有清晰的周浆间隙, 典型的梨形,并有清晰的周浆间隙, Giemsa染色呈紫红色 Giemsa 染色呈紫红色 , 该法对细胞 染色呈紫红色, 内包涵体的定位比碘染法敏感. 内包涵体的定位比碘染法敏感.
四种衣原体的性状比较
性 状 自 宿 然 主 主 人 疾 要 类 病 沙 衣 体 肺 衣 体 鹦 热 原 兽 衣 体 眼 原 炎 原 鹉 衣 体 类 原 人 小 , 鼠 沙 眼 幼 肺 儿 炎 原 形 体 态 包 体 原 涵 糖 血 型 清 DNA
与 同 原 种 相 衣 体 同 性 与不同衣原体种 源
四,防治原则
–预防重点是注意个人卫生 , 避免直接或 预防重点是注意个人卫生, 间接的接触传染. 间接的接触传染. –治疗药物选用强力霉素 , 罗红霉素 , 阿 治疗药物选用强力霉素, 罗红霉素, 奇霉素,加替沙星等. 奇霉素,加替沙星等. –目 前 尚 无 有 效 的 沙 眼 衣 原 体 疫 苗 , MOMP是其主要候选抗原 由于MOMP MOMP 是其主要候选抗原 . 由于 MOMP 是其主要候选抗原. 的多型性, 的多型性 , 其疫苗不易对所有型别沙眼 衣原体都产生保护性, 故增加了MOMP 衣原体都产生保护性 , 故增加了 MOMP 作为疫苗的难度. 作为疫苗的难度.
二,致病性与免疫性
(二)免疫性
产生特异性细胞免疫和体液 免疫,以细胞免疫为主. 免疫,以细胞免疫为主.
第二节 沙眼衣原体
衣Байду номын сангаас体发现
1956年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣 1956 年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣 原体, 原体, 无可争辩地结束了半个多世纪关于 沙眼病原的争论. 沙眼病原的争论 . 他是世界上发现重要病 原体的第一个中国人. 原体的第一个中国人.
二,致病性与免疫性
所致疾病
1.沙眼 通过眼通过眼 - 手 - 眼途径直接或间接密切接 触传播. 触传播 . 由 A , B , Ba 和 C 血清型引起 . 早 Ba和 血清型引起. 期流泪,后期结膜瘢痕,睑内翻, 期流泪,后期结膜瘢痕,睑内翻,倒睫及角 膜血管翳引起角膜损害,影响视力或致盲. 膜血管翳引起角膜损害,影响视力或致盲.
衣原体分类 衣原体科
衣原体属(3个种) 衣原体属(3个种) (3个种
嗜衣原体属 (6个种) (6个种 个种)
肺 炎 嗜 衣 原 体 鹦 鹉 热 嗜 衣 原 体 兽 类 嗜 衣 原 体 猫 嗜 性 衣 原 体 流 产 嗜 衣 原 体 豚 鼠 嗜 性 衣 原 体
沙 眼 衣 原 体
鼠 衣 原 体
猪 衣 原 体
三,微生物学检查法
(一)直接涂片镜检
取结膜刮片,Giemsa或碘液及荧光抗 取结膜刮片 , Giemsa 或碘液及荧光抗 体染色镜检,观察上皮细胞浆内有无包涵体. 体染色镜检,观察上皮细胞浆内有无包涵体.